一種研究活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)互作的新方法
蛋白質(zhì)之間的相互作用對(duì)生命活動(dòng)至關(guān)重要。盡管已有不少體內(nèi)研究蛋白互作的方法,但由于許多蛋白互作是高度動(dòng)態(tài)的,因此用傳統(tǒng)的方法難以捕獲。本研究基于“招募”和“聚集”的原理,即將“誘餌”蛋白A錨定在線粒體的外膜上,如B蛋白能與A蛋白互作,則將被“捕獲”到線粒體外膜,發(fā)生富集;如C蛋白不與A蛋互作,則不會(huì)發(fā)生定位變化(圖1)。文章首先用線粒體錨定(Mito-docking)的方法有效驗(yàn)證了G蛋白亞基γ2和β1間的互作,并進(jìn)一步運(yùn)用該方法研究了核轉(zhuǎn)運(yùn)受體(importinαisoforms)與貨物蛋白(經(jīng)典的核定位信號(hào)cNLS)之間的互作,揭示了核轉(zhuǎn)運(yùn)受體-貨物蛋白的識(shí)別特異性
武漢大學(xué)
2021-04-10