一種殺鞘翅目害蟲的蘇云金芽孢桿菌工程菌及制備方法和應(yīng)用
本發(fā)明公開了一種殺鞘翅目害蟲的蘇云金芽孢桿菌工程菌及制備方法和應(yīng)用,CCTCC M2013259。其步驟:A、從殺鞘翅目害蟲的Bt菌株YC-03中克隆殺蟲晶體蛋白基因cry3Aa8,將該基因插入解離載體pHT304/res中,獲得重組質(zhì)粒pHT3Aa8/res,將pHT3Aa8/res的DNA電轉(zhuǎn)Bt無晶體突變株BMB171,篩選獲得轉(zhuǎn)化子,將輔助質(zhì)粒pBMB1200轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)化子中,挑取在Amp/Erm平板上不生長在LB平板上生長的陽性轉(zhuǎn)化子,在LB液體培養(yǎng)基中傳代,挑取在LB平板上生長在四環(huán)素平板上不生長的單菌落;B、以柳藍葉甲和猿葉蟲幼蟲為試蟲,進行毒力生測,比較毒力致死中量LC50,篩選到高毒力工程菌菌株Ace-38。方法易行,操作簡便,對鞘翅目的柳蘭葉甲、馬鈴薯甲蟲、蔬菜猿葉蟲、黃守瓜等多種害蟲具有高效毒殺作用,該菌發(fā)酵性能優(yōu)良,具有開發(fā)、應(yīng)用前景。
中國科學(xué)院大學(xué)
2021-01-12