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1 成果簡介本項成果針對目前全球共同關(guān)心的腫瘤、傳染病、內(nèi)分泌等重大疾病快速檢測問題，建立相關(guān)疾病診斷所需的高靈敏度化學(xué)發(fā)光免疫分析新方法，研制了一系列可用于臨床分析的化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒。 所建立的方法操作簡單，線性范圍寬，成本低，可以實現(xiàn)大規(guī)模的樣品調(diào)查和篩選。本項成果包括基于磁顆粒的多種標(biāo)志物的快速聯(lián)合檢測技術(shù)，研制高通量、 快速臨床診斷試劑盒和全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的關(guān)鍵裝置。可以實現(xiàn)腫瘤、傳染病、內(nèi)分泌等系列化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑的產(chǎn)業(yè)化。研究成果已部分應(yīng)用于臨床檢驗。2 應(yīng)用說明微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析（ MMCLEIA）方法。以磁性微粒子為載體，采用磁性微粒子表面包被技術(shù)和免疫反應(yīng)的特點，以磁性酶免疫測量分析為模型，建立了微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法。能夠較好地應(yīng)用于血清以及尿液中不同生物標(biāo)記物成分的分析。 用改良的戊二醛交聯(lián)法完成堿性磷酸酶（ ALP） 對抗體的標(biāo)記，所得酶結(jié)合物保持了單克隆抗體的免疫反應(yīng)性和酶的催化活性。 采用 4-甲氧基-4-（ 3"-磷酰氧基苯） -螺旋-（ 1， 2-二氧雜環(huán)丁烷-3， 2'-金剛烷（ AMPPD） -堿性磷酸酶（ ALP） 化學(xué)發(fā)光體系，并以異硫氰酸熒光素（ FITC） 和 ALP 分別標(biāo)記疾病標(biāo)記物的單克隆抗體。在溶液中形成 FITC 標(biāo)記抗體-抗原-ALP 標(biāo)記抗體的免疫夾心復(fù)合物后，引入偶聯(lián) FITC 抗體的微米級磁性微粒子作為反應(yīng)體系的分散固相，并最終形成雙夾心免疫復(fù)合物。在反復(fù)施加磁場的作用下，通過洗滌將沒有結(jié)合的游離蛋白與免疫復(fù)合物分離，實現(xiàn)對待測抗原的測定。 這一技術(shù)可以應(yīng)用于腫瘤標(biāo)記物的檢測。3 效益分析化學(xué)發(fā)光免疫分析由于其高靈敏度、快速、高通量等特點，可以應(yīng)用于生物樣品的快速檢測，在臨床檢測、環(huán)境分析以及食品安全分析等領(lǐng)域一直受到人們的重視。本研究成果及專利技術(shù)均從實際需要出發(fā)，不需要繁雜的樣品前處理，就可以更方便地檢測出人體或者環(huán)境生物樣品中相關(guān)物質(zhì)的含量，這種技術(shù)可以用于日常生產(chǎn)和生活中，對人類和動物的身體健康、維持全球生態(tài)平衡等方面具有很大的意義。微板式磁性微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析新技術(shù)的開發(fā)不僅為腫瘤、傳染病等重大疾病診斷與預(yù)防提供強有力的檢測工具，對于發(fā)展其他疾病診斷技術(shù)和環(huán)境雌激素類化合物的檢測也將起到重要作用。因此化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的發(fā)展拓寬了免疫分析的應(yīng)用領(lǐng)域，具有廣闊的市場前景和非常可觀的經(jīng)濟效益。4 合作方式技術(shù)轉(zhuǎn)讓或合作開發(fā)， 商談。5 所屬行業(yè)領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生。

了肝臟特異性的小分子非編碼核糖核酸microRNA-122在肝細胞抗病毒天然免疫中的重要作用，并揭示microRNA-122通過抑制RTK/STAT3信號通路賦予肝細胞強有力天然免疫功能的核心機制。 在肝癌細胞HepG2中導(dǎo)入microRNA-122可以極其顯著地增強細胞應(yīng)對各種病毒核酸（包括HCV和HBV）的天然免疫反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)microRNA-122可以直接靶向多種受體酪氨酸激酶（RTK），從而降低了HepG2細胞中STAT3的酪氨酸磷酸化水平。更有趣的是，他們發(fā)現(xiàn)STAT3可以直接抑制干擾素調(diào)節(jié)因子IRF1的表達，STAT3酸磷酸化水平的下調(diào)解除了STAT3對干擾素轉(zhuǎn)錄激活的抑制，從而使得干擾素信號通路在病原體入侵時能迅猛激活。該研究揭示了在肝細胞中miR-122–RTKs/STAT3–IRF1–IFNs通路調(diào)控干擾素表達的重要途徑，闡明了微RNA對肝細胞等非免疫細胞天然免疫能力調(diào)控的新機制。       成熟肝細胞中microRNA-122表達量極其豐富，因此在遇到病毒侵害時可迅速啟動天然免疫應(yīng)答，這種強健的天然免疫能力對于肝細胞是必不可少的，一旦肝細胞中microRNA-122含量不足（比如，病毒感染引起的炎癥可導(dǎo)致microRNA-122表達下調(diào)），就會導(dǎo)致肝細胞天然免疫能力大幅下降，更容易被病毒入侵。以上這些發(fā)現(xiàn)對于病毒慢性感染引起的肝臟疾病，特別是癌癥的治療具有重要指導(dǎo)意義。

利用現(xiàn)代分子生物學(xué)方法對傳統(tǒng)抗血清制備技術(shù)進行改造，突破 了過去抗血清生產(chǎn)經(jīng)驗為主造成的不確定性和不系統(tǒng)性，提高了抗血 清制備的技術(shù)含量和生產(chǎn)效率。有效去除抗血清中的非特異性抗體， 從而實現(xiàn)抗體制備的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)模化生產(chǎn)，同時也降低了生產(chǎn)成本。 免疫磁珠分離技術(shù)的最突出的優(yōu)點是特異性強，可以明顯提高檢 測的靈敏性，縮短病原體的檢測時間一至數(shù)天，并且可從復(fù)雜的樣品 中直接分離病原體，降低標(biāo)本中抑制物的干擾，提高靈敏度。 已生產(chǎn)出 3 種診斷血清產(chǎn)品，包括“致病性大腸桿菌 O 抗原診 斷血清試劑盒”、“大腸桿菌 H 抗原全套診斷血清試劑盒”和“志賀氏菌 O 抗原全套診斷血清試劑盒”，共計 147 種高特異性抗體。 經(jīng)中 國 CDC 使用證實，該血清具有反應(yīng)速度快、特異性強的特點，與日 本生研同類血清質(zhì)量相當(dāng)，遠優(yōu)于國內(nèi)同類產(chǎn)品。 繼續(xù)在市場調(diào)研的基礎(chǔ)上，再進行 11 種改類試劑盒的研發(fā)和生 產(chǎn)，填補國內(nèi)外市場空白。 本項目完成后，實施單位將可生產(chǎn) 12 種診斷血清試劑盒（包括 前期已完成開發(fā)的 3 種），按每個疾控中心每年需求每種試劑盒一套 計算，總需求量約 1200 套。此外，進出口檢驗檢疫單位對某些種類 的血清亦有一定需求，約為 300 套。按每套試劑盒平均 1 萬元的售價 計算，每年的市場可達 1500 萬元。 免疫磁珠分離試劑盒可廣泛應(yīng)用于臨床檢驗，食品檢驗，水質(zhì)／ 環(huán)境檢驗，獸藥檢驗等，市場非常之大，現(xiàn)主要的生產(chǎn)商為國外的 Dynal 和 Matrix 公司，以 Dynal 公司為例，其每年可創(chuàng)造數(shù)十億美元 的銷售額。由于依賴進口，國內(nèi)多家疾病預(yù)防控制和出入境檢驗檢疫 單位已經(jīng)向項目實施單位提出了產(chǎn)品的開發(fā)意向。該產(chǎn)品研發(fā)成本約 為每毫升 600 元，銷售價格在每毫升 2000 元左右，顯示了良好的市 場前景。

已有樣品/n目前在臨床上，兩種PD-1單抗的使用劑量為2-3mg/kg，每2-3周靜脈輸入，歷時30-60分鐘。使用劑量大且頻繁。同時，單克隆抗體的制備、純化過程繁瑣，要求嚴(yán)格，導(dǎo)致單抗的價格昂貴，使受益于該單抗的病人在接受治療時受到極大限制。由于腺病毒制備、純化簡單、產(chǎn)量高、安全性好、外源表達時間長等特點，因此我們研發(fā)的腺病毒表達PD-1單抗制備簡單、成本低、療效好、使用方便，可充分滿足臨床病人的需求。我們研發(fā)的重組腺病毒載體表達PD-1單抗為臨床相關(guān)腫瘤的治療與研究提供了一種有效的新手段，并具有

該成果 2011 年、 2013 年先后獲連云港市科學(xué)技術(shù)進步二等獎、一等獎。項目實施的核心技術(shù)為水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細菌病診斷技術(shù)與免疫技術(shù)，形成了較為完善的水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病診斷和防控的技術(shù)體系。 包括（1） 環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增技術(shù)（LAMP），（2） 黃芪佐劑水劑型滅活疫苗及卵黃抗體疫苗。

利用現(xiàn)代分子生物學(xué)方法對傳統(tǒng)抗血清制備技術(shù)進行改造，突破了過去抗血清生產(chǎn)經(jīng)驗為主造成的不確定性和不系統(tǒng)性，提高了抗血清制備的技術(shù)含量和生產(chǎn)效率。有效去除抗血清中的非特異性抗體，從而實現(xiàn)抗體制備的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)模化生產(chǎn)，同時也降低了生產(chǎn)成本。 免疫磁珠分離技術(shù)的最突出的優(yōu)點是特異性強，可以明顯提高檢測的靈敏性，縮短病原體的檢測時間一至數(shù)天，并且可從復(fù)雜的樣品中直接分離病原體，降低標(biāo)本中抑制物的干擾，提高靈敏度。 已生產(chǎn)出3種診斷血清產(chǎn)品，包括“致病性大腸桿菌O抗原診斷血清試劑

近日，東南大學(xué)智能材料研究院院長、首席科學(xué)家、化學(xué)化工學(xué)院李全團隊在細胞焦亡介導(dǎo)的光動力和光熱協(xié)同免疫腫瘤治療方面取得重要突破。

西安交通大學(xué)法醫(yī)學(xué)院朱永生課題組圍繞外周免疫如何影響中樞神經(jīng)活動這一關(guān)鍵問題，試圖闡明外周免疫與成癮行為之間的關(guān)聯(lián)及其機制。

LAG-3和PD-1是兩個潛在的器官移植免疫排斥治療靶點，成功制備了間充質(zhì)干細胞來源的FGL1/PD-L1雙靶點外泌體，發(fā)現(xiàn)其能夠在小鼠異體心臟移植模型中有效減輕移植排斥，展現(xiàn)了良好的治療效果。

本發(fā)明以四苯基卟啉金(III)為先導(dǎo)化合物，在卟啉環(huán)上引入不同較強極性基團改善分子的對稱性，且通過較強極性基團的引入促進這類化合物在水中溶解能力，并強化多取代氯化四苯基卟啉金化合物對癌細胞的靶向作用。