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蘇氨酸工業生產菌代謝工程系統改造
本成果從一株高產 L-異亮氨酸的 C. glutamicum 出發，運用反向代謝工程策略對其代謝通路進行理性重排，以期實現 L-蘇氨酸高產，特別是近期，通過熱誘導丙酮酸羧化酶和蘇氨酸外排泵創蘇氨酸產率紀錄，開發了一種兩段式溫控發酵蘇氨酸的重組大腸桿菌和工藝，發酵罐蘇氨酸摩爾轉化率達 103.28%。這套復 雜中心代謝途徑的自我調控維持了生產和生長的平衡。論文用實驗室前期構建的一株產蘇氨酸的重組大腸桿菌 TWF001 為宿主，首先編輯了涉及副產物有機酸合成、產物降解和轉運的基因，并證實這一系列菌種在 37 度升至 42 度情況下的生長情況等同正常 37 度發酵；然后用一套大腸桿菌熱敏啟動子去轉錄四環素啟動子阻遏蛋白，四環素啟動子后的報告基因 37 度表達，42 度不表達。
江南大學
2021-04-11
微生物轉化制造 L-瓜氨酸的方法
利用自主篩選、鑒定和保藏的一株產精氨酸脫亞氨基酶（ADI）的惡臭假單胞菌 CGMCC1347，通過發酵培養其微生物細胞，用于轉化精氨酸生成 L-瓜氨酸，用 5L 發酵罐發酵 20 小時產酶活力達到 2.17U/mL。采用卡拉膠等凝膠包埋固定化細胞反復分批轉化 10 次，酶活力不減。用固定化細胞固定床反應器進行連續轉化，連續 30 天以上，連續 30 天 mol 轉化率穩定在 90-99％，30 天平均稀釋速率 D=0.0735 h-1，固定床反應器生產效率平均 6.34 g L-1 h-1，固定化細胞生產能力 0.0108 g h-1 g -1。本技術的特點是高產精氨酸脫亞氨基酶（ADI）的惡臭假單胞菌菌株能高效轉化精氨酸生成 L-瓜氨酸，對底物總摩爾轉化率高，轉化后的產物純度高，作為生物催化劑的微生物細胞易于培養且安全無毒，生物轉化反應條件溫和，環境友好。固定化細胞可反復利用多次，或裝柱連續轉化。
江南大學
2021-04-11
抗肝癌、黑素瘤藥物－重組精氨酸脫亞胺酶的制備
精氨酸脫亞胺酶（Arginine deiminase，EC 3.5.3.6，ADI）因其可以作為 精氨酸營養缺陷型腫瘤細胞（如：肝癌、黑素瘤）的靶向治療藥物而受到廣泛關注。目前，進入癌癥臨床研究的僅有支原體來源的 ADI，處于臨床三期試驗。本項目從自然界篩選到產精氨酸脫亞胺酶的變形假單胞菌，在大腸桿菌實現 了該酶的重組表達，采用該重組 ADI 進行體外和小鼠體內抗癌活性研究，對肝癌細胞人肝癌細胞系 HepG2 和小鼠肝癌細胞系 H22 有顯著抑制作用。基于簡便靈敏的 96 孔板高通量篩選模型，篩選在體內生理條件下具有較高酶活以及底物親和性的精氨酸脫亞胺酶突變株，采用隨機突變、定點突變等非理性和半理性的蛋白質定向進化手段，獲得了最適 pH 由 6.0 提高至 7.0，在生理中性條件下（pH 7.4）酶活力較野生型 ADI 提高了 33 倍以上的 ADI 突變株，比活力為 15－17 U/mg。該改造后的 ADI 的 PEG 化和小鼠實驗正在進行中。
江南大學
2021-04-11
聚-γ-谷氨酸發酵生產及其在農業中的應用
中試階段/n成果簡介：目前，農業生產減肥增效、節能降耗、減少環境污染是人們關注的熱點。聚γ-谷氨酸（簡稱“γ-PGA”）作為一種綠色生物大分子材料，不僅可使作物增產10-30％，節肥10-20％，還可提高作物品質和作物抗病耐旱能力。華中農業大學農業微生物學國家重點實驗室率先在國際上開展了γ-PGA在農作物栽培中的應用，已申請γ-PGA發酵及γ-PGA在農業領域的應用等5項中國發明專利，其中獲得3項發明專利授權。三項相關課題鑒定成果分別于2007年，2008年，2009年通過湖北省科技廳組織的專家鑒定
華中農業大學
2021-01-12
鎢酸鋯薄膜的制備方法
鎢酸鋯薄膜的制備方法,它屬于薄膜制備領域.本發明解決了現有鎢酸鋯薄膜制備方法存在的操作復雜,成本高的問題.本發明的方法如下:一,硝酸氧鋯和溶劑混合得到A溶液;二,絡合劑,溶劑和偏鎢酸銨混合得到B溶液;三,將A和B混合,配制溶膠;四,通過旋涂制備濕膜,再將濕膜預燒;五,制備鎢酸鋯非晶薄膜;六,鎢酸鋯非晶薄膜晶化后即得鎢酸鋯薄膜.本發明的制備工藝簡單,成本低,制備得到的薄膜表面平整致密,厚度均勻,晶粒大小均勻.
哈爾濱師范大學
2021-05-04
酶法生產5’-核苷酸
5’-核苷酸為生物體內重要的生化物質，參與多種生理生化反應。本項目即利用核糖核酸（RNA）為原料，通過酶催化反應生成四種5’－核苷酸，再經分離純化，最后獲得高品位的5’－腺苷酸（5’－AMP）、5’－鳥苷酸（5’－GMP）、5’－胞苷酸（ ’－CMP）和5’－尿苷酸（5’－UMP）等四種5’－核苷酸產品。這四種核苷酸目前作為營養強化劑，添加到嬰兒配方奶粉中，或作為各種核酸藥物中間體。 本項目的特點是：1）提取高活力的磷酸二酯酶，代替桔青霉直接發酵液，大大減少了設備投資及生產成本，有效地消除了對環境的污染；2）通過對酶的預處理，有效地控制了酶反應過程中的副反應，使核苷酸轉化率明顯提高；3）通過新型離子交換樹脂的有序排列組合，可一次分離純化得到高純度單核苷酸，技術上收率達80%以上；4）使用本項目生產出來的產品，含量和純度均可達 %以上。達到國外先進水平。
華東理工大學
2021-02-01
系列可食酸茶產品開發
研發階段/n目前我國茶產業存在夏秋茶樹鮮葉利用率低、中低檔茶滯銷等突出問題，急需開創夏秋茶樹鮮葉和中低檔茶的開發利用和增值增效的新途徑。本技術成果以夏秋茶樹鮮葉為原料，利用現代生物技術研制出系列可食酸茶產品。以我們篩選獲得的獨特微生物菌種，能在茶樹鮮葉中快速發酵。發酵而成的酸茶，具有天然的發酵香，在含有茶葉功能活性成分的同時，富含有機酸、維生素和對人體有益的微生物。以發酵好的酸茶為原料，開發出甜味、辣味等系列不同風味的酸茶產品，可作為佐餐食品、休閑食品。技術水平：本成果開創了夏秋茶樹鮮葉利用的新途徑
華中農業大學
2021-01-12
生物法高效分離檸檬酸
成果簡介： 本項目針對檸檬酸發酵液或者檸檬酸母液中檸檬酸和易碳化合物的連續高效分離。整個分離過程中只添加水做洗脫劑，實現了清潔化的生產，符合現代環保要求。利用自行設計合成的新型吸附樹脂，是易碳化合物和檸檬酸的分離度達到了0.8，易碳化合物不吸附，通過調整樹脂內的孔結構和比表面積，使得分離過程中檸檬酸在樹脂上的拖尾現象得到了明顯的改善。本項目中，分離得到的
南京工業大學
2021-01-12
兩核苷酸合成測序技術
基于不同核苷酸參與合成反應產生檢測分子均相同的原理，采用天然核苷酸為原料，按照二核苷酸同時合成獲取測序編碼信息，將待測序列進行兩次循環測序，得到兩組編碼序列片段，最后解碼、并組裝出待測DNA模板的準確堿基信息（Pu D, et al. Analytica Chimica Acta, 2014,852,274-283；肖鵬峰，等.“一種兩核苷酸合成DNA解碼測序方法”，中國發明專利，ZL 2012 1012 8597.9）。該測序技術的兩次循環測序可用于未知模板的高通量DNA測序，一次循環測序可用于低通量PCR產物的測序；可以獲得更長的DNA測序長度、且提高檢測靈敏度。
東南大學
2021-04-13
烷基水楊酸鋅顯色劑
烷基水楊酸鋅是新一代無碳復寫紙用顯色劑，具有顯色速度快、密度高、發色鮮艷、抗黃變性好等特點，在市場上獲得廣泛應用。本項目以水楊酸和苯乙烯為原料，經Friedel-Crafts反應合成烷基水楊酸，加入氧化鋅螯合改性提高軟化點，采用融熔轉相新工藝制備水楊酸鋅顯色劑分散液。生產設備簡單、效率高，原料成本低、產品性能穩定。深受市場的青睞，有優異的產品質量優勢和價格優勢。
華東理工大學
2021-04-13