本成果從一株高產 L-異亮氨酸的 C. glutamicum 出發,運用反向代謝工程策略對其代謝通路進行理性重排,以期實現 L-蘇氨酸高產,特別是近期,通過熱誘導丙酮酸羧化酶和蘇氨酸外排泵創蘇氨酸產率紀錄,開發了一種兩段式溫控發酵蘇氨酸的重組大腸桿菌和工藝,發酵罐蘇氨酸摩爾轉化率達 103.28%。這套復
雜中心代謝途徑的自我調控維持了生產和生長的平衡。論文用實驗室前期構建的一株產蘇氨酸的重組大腸桿菌 TWF001 為宿主,首先編輯了涉及副產物有機酸合成、產物降解和轉運的基因,并證實這一系列菌種在 37 度升至 42 度情況下的生長情況等同正常 37 度發酵;然后用一套大腸桿菌熱敏啟動子去轉錄四環素啟動子阻遏蛋白,四環素啟動子后的報告基因 37 度表達,42 度不表達。
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