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基于可切割自聚集標簽的
多肽
表達純化方法
01. 成果簡介 本項成果提供了一種多肽的合成方法,利用了自聚集短肽誘導目標多肽的聚集,使得生物合成的多肽以沉淀形式保護下來,從而避免降解;然后通過體外切割,獲得目標多肽,優化了多肽合成和分離的工藝,操作簡便且不受多肽的長度限制,有望為多肽藥物的高效制備提供一種解決方案。 具體的,在目標多肽的N端或C端融合一段自聚集短肽,這兩者之間采用一個連接肽將兩者融合。這個連接肽可以是化學切割、酶切割的識別序列或自切割肽(內含肽)。通過分子克隆,將這三段肽(目標肽、連接肽、自聚集短肽)克隆并轉化至表達菌株(如大腸桿菌BL21(DE3))中進行表達。隨后通過離心或過濾收獲菌體,利用高壓、超聲波等技術進行細胞破碎;再通過離心或過濾收集不可溶部分(聚集體);在簡單洗滌后,根據所選的連接肽的屬性進行切割,如化學切割,蛋白酶切割或誘導自切割;再通過離心或過濾去除不可溶部分,收集上清即可得到粗純多肽產品。如下圖所示: 02. 應用前景 基于本項技術可以合成糖尿病仿制藥利拉魯肽、矮小癥仿制藥生長激素(hGH)等。03. 知識產權 相關成果已授權3項中國發明專利及1項美國專利。04. 團隊介紹 團隊主要研究領域為合成生物學和生物制藥(包括他汀類化學藥物和多肽藥物),負責人林章凜博士為教授、博士生導師,教育部長江學者,廣東省“珠江人才計劃”科技領軍人才。先后承擔973、863、國家重點研發計劃專項、國家自然科學基金等科研項目,發表SCI論文50余篇,申請專利20余項。05. 合作方式 商務合作。06. 聯系方式
[email protected]
[email protected]
清華大學
2021-04-13
蛋白
質模型
蛋白
質演示模型XM-856
XM-856蛋白質演示模型 ? XM-856蛋白質演示模型顯示蛋白質分子結構形態。 尺寸:放大,28×19×45cm 材質:PVC材料
上海欣曼科教設備有限公司
2021-08-23
結合IGF-1C
多肽
的可注射性水凝膠
本發明涉及一種結合胰島素樣生長因子C結構域多肽(IGF-1C)的殼聚糖水凝膠,其具有良好的細胞相容性和生物活性。這類活性水凝膠具有可注射性,能夠作為載體材料,促進干細胞對組織損傷的治療效果。其為移植干細胞提供適宜的組織再生微環境,從而提高移植干細胞的存活率。增加干細胞在損傷區內的存活及駐留,促進移植細胞存活、增殖,減少凋亡,促進損傷部位血管新生以及功能恢復,進而提高干細胞移植治療組織損傷的治療效果。此外,移植后水凝膠并沒有促進干細胞發生不良分化。
南開大學
2021-04-10
一種酶法制備有機菜籽
多肽
的方法
其他成果/n一種酶法制備有機菜籽多肽的方法,包括:菜籽蛋白的制備;將菜籽蛋白與蒸餾水按一定料液比混勻,并進行超聲輔助濕熱處理,得到濕熱菜籽蛋白漿液;向濕熱菜籽蛋白漿液中加入三聚磷酸鈉進行超聲輔助磷酸化處理,得到磷酸化菜籽蛋白漿液;調節磷酸化菜籽蛋白漿液的pH和溫度,并加入堿性蛋白酶進行超聲輔助酶解,得到一次酶解液;調節一次酶解液的pH和溫度,并加入復合風味蛋白酶進行超聲輔助酶解,得到二次酶解液;對二次酶解液進行微波滅酶處理,得到滅酶酶解液,將滅酶酶解液離心得到菜籽多肽清液,再進行冷凍干燥處理,即得成品的有機菜籽多肽。該酶法制備有機菜籽多肽的方法,工藝安全、制備便捷。
武漢輕工大學
2021-04-11
一種牛骨膠原
多肽
的生產方法
其他成果/n種牛骨膠原多肽的生產方法,包括如下步驟:將牛骨膠原蛋白溶液與磷酸鹽溶液混勻,并加熱一定時間,得到牛骨膠原蛋白漿液;通入交流電流處理一定時間,切斷電源后再通入恒壓反向電流處理一定時間,切斷電源后再通入恒壓正向電流處理一定時間,得到牛骨膠原蛋白混合液;對牛骨膠原蛋白混合液加入一次復合酶進行超聲輔助酶解,得到一次酶解液;再加入二次復合酶進行超聲輔助酶解,得到二次酶解液;再進行微波滅酶處理,將滅酶酶解液靜置冷卻,離心取上清液后再進行冷凍干燥處理,即得成品的牛骨膠原多肽。該牛骨膠原多肽的生產方法,
武漢輕工大學
2021-01-12
一種腫瘤靶向
多肽
光敏劑鍵合物
本發明公開了一種腫瘤靶向多肽光敏劑鍵合物,屬于生物醫藥領域。所述的腫瘤靶向多肽光敏劑鍵 合物的結構為 A-B-C-D,其中,A 為光動力學治療光敏劑,B 為含正電荷的細胞穿膜肽片段,C 為基質 金屬蛋白酶特異性識別多肽片段,D 為含負電荷的多肽片段。本發明公開的多肽光敏劑鍵合物可以顯著 提高光動力學治療光敏劑在生理條件下的穩定性,極大的減少光動力學
武漢大學
2021-04-14
膠原
蛋白
/PVA復合纖維
在崇尚自然、保護環境的當今社會, “綠色”型健康舒適纖維制品越來越受到人們的青睞。其中,蛋白纖維以其在生物降解性,人體皮膚親合性等方面特有的優異性能倍受關注。膠原蛋白/PVA復合纖維不僅秉承了蛋白纖維的優點,還克服了一般蛋白纖維力學性能、耐熱水性能不佳的缺點,且具有良好的吸濕透氣性能及染色性能。 按一定配方制備膠原蛋白/PVA復合紡絲溶液,通過濕法紡絲得到初生纖維,再經后處理
四川大學
2021-04-14
高功能滌綸
蛋白
復合面料和粘膠纖維
蛋白
復合面料
滌綸織物雖具有良好的挺闊性、褶皺彈性,但不親水,對人體皮膚不友好,沒有保健功能。粘膠纖維織 物具有 良好的吸濕、抗靜電,但對皮膚沒有保健功能。 開發的全新改性接枝技術,可以在滌綸纖維和滌綸織物表面接枝各種動植物蛋白,如蠶絲蛋白、牛奶蛋 白、大都蛋白、花生蛋白、蠶蛹蛋白等等。從而制備各種高功能滌綸蛋白復合面料。 改性接枝的滌紛蛋白復合面料,蛋白質都分布在滌綸纖維表面上,在服用時,與人體皮膚相接觸的全是 各種動植物蛋白,對人體皮膚具有良好的保健作用。同時,織物的吸濕性、抗靜電性都得到很好的改善;褶 皺彈性、挺闊性保持良好。 高功能滌綸復合蛋白面料,適宜制備高檔滌綸面料,具有很高的附加值,生產工藝流程較短、成本較 低,無需投資購買新設備。該技術也同樣適用于粘膠蛋白復合面料。粘膠蛋白復合面料對人體皮膚具有良好的保健作用
西南大學
2021-04-13
多肽
水凝膠在疫苗佐劑和抗體制備方面的應用
多肽水凝膠具有生物相容性高、可降解、具有生物活性等特點和 優點,它在生長因子和藥物的緩控釋、組織工程和再生醫學等領域具 有很高的應用前景。目前有較高轉化前景的項目是多肽水凝膠在疫苗 佐劑和抗體制備方面的應用。癌癥、艾滋病、丙肝等重大疾病疫苗的 研制具有重要的意義。在這些疾病的預防性和治療性疫苗研制中,關 鍵的一環是可激活人體細胞免疫的佐劑的發現。 本項目開發出一種多肽水凝膠,具有極強地激發細胞免疫的功能。 對比于現有的幾種可激活細胞免疫的佐劑(CpG,MPL 等),我們的 水凝膠佐劑具有以下優勢: 1)成本低,1mgCpG 價格為 5000-8000rmb,1mgMPL 價格為 2000- 4000rmb,我們的短肽實驗室合成成本 1g 低于 500rmb; 2)操作簡單,僅需物理混合就可實現與抗原復合; 3)適用于蛋白、短肽、DNA、滅活癌細胞等各類抗原,通用性 高; 4)短肽結構簡單,可大量制備,實驗室一天內一次性即可合成10g 以上該多肽,可用于制備 10000 瓶以上 1mL 的水凝膠(臨床用的 疫苗每次注射量是 0.5-1mL),可以很容易的實現中試級別的化合物 合成及疫苗制備。基于這些優點,該佐劑具有極強的應用前景,該研 究獲得科技部重大國際合作項目資助。 由于本項目的水凝膠可制備短肽抗原的抗體,它在抗體定制中具 有極高的應用前景。目前抗體制備的技術為第一步將短肽連接到載體 蛋白 BSA、KLH 等上,然后打動物 6-10 周。現有技術操作復雜(需 偶聯蛋白)、耗時長(6-10 周),而且很多時候還未能產生有效的抗體。 我們想發展的技術相比于現有技術來說具有明顯的優勢:操作簡單, 僅需物理混合短肽抗原;抗體產生迅速,4-6 周即能生成抗體;抗體 滴度高,由于無需使用載體蛋白,短肽的特異性抗體滴度更高;對于 磷酸化抗體來說,本項目的水凝膠能減少磷酸化短肽被體內磷酸酶去 磷酸化,從而提高磷酸化短肽抗體的比例。
南開大學
2021-04-13
一種金槍魚骨膠原
多肽
的制備方法
其他成果/n一種金槍魚骨膠原多肽的制備方法,包括如下步驟:將金槍魚骨蛋白與蒸餾水混勻,并進行加熱加壓處理,得到金槍魚骨蛋白漿液;調節金槍魚骨蛋白漿液pH,并加入木瓜蛋白酶進行酶解,得到酶解液;將酶解液滅酶得到滅酶酶解液;將滅酶酶解液靜置冷卻,離心取上清液后再進行超濾處理,得膠原多肽粗液;將膠原多肽粗液依次加入到陰離子交換樹脂層析柱中洗脫,葡聚糖凝膠柱層析中洗脫,采用高效液相色譜進行純化處理,即得金槍魚骨膠原多肽。該金槍魚骨膠原多肽的制備方法,工藝安全、制備便捷。
武漢輕工大學
2021-01-12
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