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本發(fā)明涉及一種富含維生素E植物調(diào)和油的生產(chǎn)方法,經(jīng)本發(fā)明方法加工成的植物調(diào)和油維生素E含量高.技術(shù)方案:將原料油離心,過濾去掉雜質(zhì),其特征在于:將番茄清洗干凈,切半去蒂放入組織搗碎機(jī)中搗碎,將搗碎的番茄糊與原料油中的葵花籽油,按照每毫升葵花籽油加入1克番茄糊的比例進(jìn)行混合,混合后放置避光處,提取番茄紅素,將含有番茄紅素的葵花籽油與其它原料油混合后加入脂溶性茶多酚.由于本發(fā)明在葵花籽油中溶入了番茄紅素,有效的減少了油脂中維生素E的損失,加工后的植物調(diào)和油中維生素E的含量可以達(dá)到40-50毫克/100克.

本發(fā)明提供了花生維生素E合成相關(guān)基因AhPK及其在提高植物維生素E含量和耐鹽性中的應(yīng)用，將該AhPK基因在花生中超量表達(dá)后，得到生育酚含量和活性最高的α生育酚含量顯著提高的轉(zhuǎn)基因植株。實(shí)驗(yàn)證明，將本發(fā)明的AhPK基因超量表達(dá)可顯著提高花生葉片的維生素E含量，且可明顯增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因花生種子的耐鹽性。本發(fā)明的蛋白及其編碼基因?qū)τ谥参锞S生素E合成機(jī)制的研究，以及提高植物的維生素E含量、活性和植株的抗逆性具有重要的理論及實(shí)際意義，應(yīng)用前景廣闊。

中試階段/n針對(duì)酶在工程化應(yīng)用中的缺陷，如易失活、不具回收性、抗逆性差 等，采用新型固定化技術(shù)，制備出具有高活性、高耐逆和工程化回用性 良好的固定化脂肪酶，提高酶活力 10-46 倍。如：以碳納米管為載體整 合其它方法固定化 BCL，固定化酶最大蛋白比活達(dá) 50,200 U/min/g protein，酶活回收率達(dá) 3,740%，為游離酶的 54 倍，是 MPR-NKA 固定化 酶的 1.5 倍，且大幅縮短了酶促反應(yīng)時(shí)間，10 分鐘就能使手性拆分反應(yīng) 達(dá)到平衡，較國(guó)際報(bào)道的最高水平提高 200 倍，

本發(fā)明公開了一種植物內(nèi)生菌，分類命名為巨大芽孢桿菌(Bacillus?megaterium)，完整命名為巨大芽孢桿菌(Bacillus?megaterium)SAN1，該菌株已于2013年3月11日保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱CGMCC)，保藏編號(hào)為CGMCC?No.7295。本發(fā)明還公開了所述的植物內(nèi)生菌在修復(fù)設(shè)施土壤次生鹽漬化與鎘復(fù)合污染中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的巨大芽孢桿菌CGMCC7295能夠促進(jìn)植物的生長(zhǎng)，改善土壤理化性狀，同時(shí)促進(jìn)植物對(duì)Cd的吸收，有效的消除土壤中的Cd污染；并且能高效轉(zhuǎn)化土壤的硝態(tài)氮，減輕次生鹽漬化的危害；通過巨大芽孢桿菌CGMCC7295與植物的聯(lián)合作用，可實(shí)現(xiàn)設(shè)施土壤次生鹽漬化與重金屬Cd復(fù)合污染的修復(fù)。

植物紅細(xì)胞凝集素，學(xué)名Phytohemagglutinin-E （PHA-E)，參考產(chǎn)品為Sigma公司產(chǎn)品，貨號(hào)為L(zhǎng)8629。 凝集素是從豆科植物種子中提取的一種含糖蛋白質(zhì)，植物凝集素具有刺激外周血淋巴細(xì)胞RNA合成和有絲分裂，促進(jìn)免疫反應(yīng)，使細(xì)胞凝聚，腫瘤細(xì)胞失活，以及誘發(fā)人外周血淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗癌淋巴因子等生物學(xué)活性。PHA是由E、L兩種亞基組成的四聚體蛋白質(zhì)的混合物，按其亞基組成可分為L(zhǎng)4、L3E、L2E2、LE3、E4具有相同物化性質(zhì)和不同生物學(xué)活性的同工凝集素。其中紅細(xì)胞凝集素（Erythrohemagglutinin ，PHA-E）含有4個(gè)相同的E亞基，具有最強(qiáng)的紅血球凝集功能，沒有白細(xì)胞凝集能力。 產(chǎn)品-紅細(xì)胞凝集素是由英國(guó)紅蕓豆（俗稱紅腰豆，屬于常見雜糧）為原料，采用親和純化技術(shù)制備得到，屬于植物提取蛋白質(zhì)，產(chǎn)品為白色粉末，安全無毒。目前，紅細(xì)胞凝集素主要作為體外診斷試劑的重要組成部分，應(yīng)用于去除臨床血液樣本中的紅細(xì)胞。使得最終檢驗(yàn)結(jié)果快速準(zhǔn)確，有效避免了傳統(tǒng)采用離心方法分離血漿和紅血球中出現(xiàn)的細(xì)胞破裂等問題，因此近年來廣泛用于臨床和科研上凝集去除血液中的紅細(xì)胞。 我們建立了一套低成本快速的分離純化工藝，能特異性純化得到PHA-E，同時(shí)生產(chǎn)成本能下降至進(jìn)口同類商品售價(jià)的5%以下。該工藝不需要太多設(shè)備，普通實(shí)驗(yàn)室即可完成200mg-1000mg規(guī)模生產(chǎn)。產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)得到國(guó)外公司的肯定。目前國(guó)內(nèi)尚無該產(chǎn)品銷售。

本發(fā)明提供了花生維生素E合成相關(guān)基因APG1、APG2在提高植物α生育酚含量和耐鹽性中的應(yīng)用，兩基因APG1、APG2的氨基酸序列的同源性為98.6%。本發(fā)明經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，將這2個(gè)基因分別在花生中超量表達(dá)后，得到活性最高的α生育酚含量明顯提高的轉(zhuǎn)基因植株，且可明顯增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因花生種子和植株的耐鹽性；將這2個(gè)基因的反義載體轉(zhuǎn)入花生后，轉(zhuǎn)基因植株的α生育酚含量明顯減少。本發(fā)明的蛋白及其編碼基因?qū)τ谥参锞S生素E合成機(jī)制的研究，提高植物的α生育酚含量，改良植物的抗逆性具有重要的理論及實(shí)際意義，應(yīng)用前景廣闊。

研發(fā)階段/n內(nèi)容簡(jiǎn)介：近幾年來的研究表明，番茄紅素和胡蘿卜素一樣，是防腐治病的重要功能因子，目前普遍認(rèn)為，番茄紅素的作用機(jī)理主要有以下幾個(gè)方面：（1）作為強(qiáng)抗氧化劑，猝滅單線態(tài)氧和清除自由基，防止脂蛋白和DNA受到氧化破壞，從而預(yù)防癌癥的發(fā)生，抑制LDL膽固醇氧化產(chǎn)物的形成，預(yù)防冠心病的發(fā)生。（2）促進(jìn)細(xì)胞間正常結(jié)合，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞間的結(jié)合會(huì)變?nèi)酰鸭t素能促進(jìn)具有維持細(xì)胞間正常結(jié)合的蛋白質(zhì)的合成。（3）抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移增殖因子的遺傳表達(dá)。（4）抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移增殖因子的作用，如抑制胰島素生長(zhǎng)

集約化養(yǎng)殖的動(dòng)物生長(zhǎng)迅速，極易缺乏維生素，導(dǎo)致生產(chǎn)繁殖性能降 低免疫力低下，易患各種傳染性疾病，為治療疾病，抗菌藥被大量使 用，導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體內(nèi)藥物殘留量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高岀限量標(biāo)準(zhǔn)，食品安全問題令人擔(dān) 憂。故及時(shí)補(bǔ)充維生素對(duì)增強(qiáng)動(dòng)物免疫能力,降低患病機(jī)率,進(jìn)而減少藥 物殘留保障畜產(chǎn)品健康具有重要意義。機(jī)體對(duì)常態(tài)脂溶性維生素AD3E的吸收需膽汁參與,同時(shí)受胃腸道 生理狀態(tài)及采食量、日糧中脂肪含量等多因素影響，吸收率和生物利用率 低。而乳化后維生素AD3E能夠被小腸直接吸收利用，在胃腸中釋放后 會(huì)與腸壁迅速接觸并進(jìn)入腸道黏膜細(xì)胞，2h便可被吸收，不需膽汁參與吸 收率可達(dá)100% ,生物利用率在98%左右。在畜牧生產(chǎn)中，即使畜禽患有肝 臟疾病或有脂肪吸收障礙，脂溶性維生素的吸收也不會(huì)受到影響，這對(duì)提 升患病畜禽的體質(zhì)、縮短療程有非常積極的意義。把主要的脂溶性維生素 AD3E制成乳劑,其刺激性低、適口性好,可與水混溶,顯著提高其飼喂穩(wěn)定性，且減少了維生素用量提高了生物利用度，降低了養(yǎng)殖成本；采用飲水給藥方式，使用方便；以水 為溶劑,生產(chǎn)成本和毒副作用降低,產(chǎn)品更具市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,且臨床應(yīng)用更安全,這對(duì)促進(jìn)維生素的使用，防 治畜禽疾病保障食品安全具有重要意義。預(yù)期效益:以重慶榮昌某公司近三年在國(guó)內(nèi)外維生素制劑銷售額為參考，項(xiàng)目投產(chǎn)后，正常生產(chǎn)年份年 銷售收入將達(dá)150萬-200萬元，五年累計(jì)銷售900萬元，增值稅累計(jì)130.76萬元，毛利潤(rùn)累計(jì)253.75萬元， 凈利潤(rùn)180萬元，所得稅享受西部大開發(fā)后按15%計(jì)算累計(jì)27萬元°

本發(fā)明涉及肽基核苷類雜合抗生素 Nikkoxin?E 和?Nikkoxin?F 及其制備方法，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。 本發(fā)明通過將尼可霉素的生物合成基因簇進(jìn)行突變后導(dǎo)入到多氧霉素工業(yè)菌株中進(jìn)行異源表達(dá)。經(jīng)過質(zhì) 譜和核磁共振檢測(cè)，確定產(chǎn)生了兩種氧霉素與尼可霉素雜合的核苷類抗生素。這兩種雜合抗生素對(duì)人類 或植物病原真菌具有更加顯著的抗菌活性。

【發(fā) 明 人】王欣之；王天麟；文紅梅；李偉；楊帆；劉睿【摘要】            一種抗腫瘤活性天然產(chǎn)物草胡椒素E半合成方法，首次涉及一種具有抗腫瘤活性的天然產(chǎn)物草胡椒素E(peperomin?E)的半合成方法。以中藥石蟬草全草中提取得到草胡椒素A(peperomin?A)為原料，經(jīng)過苯硒基親核取代和氧化脫苯硒基兩步得到草胡椒素E，再經(jīng)硅膠柱層析精制得到純度大于99.0%的草胡椒素E精品。