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評估基因編輯工具的新方法以及高保真的新基因編輯
CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因編輯工具酶,在科研領域被廣泛應用,而在臨床方面的應用因為其脫靶活性一度停滯不前。它通過guide RNA(gRNA)與靶向DNA序列的配對,從而將Cas9錨定在靶向基因并誘導產生DNA雙鏈斷裂(DSB)。在基因編輯誘發的DSB的修復過程中,一定幾率會產生基因突變或者外源DNA片段的插入,從而達到基因編輯的目的。在實際應用過程中,一個好的基因編輯酶Cas9需要同時滿足高效切割靶位點、低脫靶活性和低染色體異常三個特點。目前在這三個方面,有一部分基于PCR的方法用于估算基因編輯效率,但其結果可靠性有待提高;有一些基于高通量測序的方法可以在體內或者體外檢測基因編輯酶的脫靶活性;尚無系統的可定量的測量基因組異常結構的方法。本項目開發了一種新的方法,可以用來同時定量檢測Cas9編輯效率和脫靶活性以及編輯引起的染色體異常結構,即primer-extension-mediated sequencing(PEM-seq)。這是對基因編輯和DNA損傷修復等領域都有巨大促進作用的新技術。與此同時,該項目包括了該團隊利用PEM-seq篩選出的一個相比于現有Cas9變體具有更低脫靶活性且與野生型Cas9切割效率相當的Cas9變體further enhanced Cas9 (FeCas9)。
北京大學 2021-02-01
法生產5’-核苷酸
5’-核苷酸為生物體內重要的生化物質,參與多種生理生化反應。本項目即利用核糖核酸(RNA)為原料,通過酶催化反應生成四種5’-核苷酸,再經分離純化,最后獲得高品位的5’-腺苷酸(5’-AMP)、5’-鳥苷酸(5’-GMP)、5’-胞苷酸( ’-CMP)和5’-尿苷酸(5’-UMP)等四種5’-核苷酸產品。這四種核苷酸目前作為營養強化劑,添加到嬰兒配方奶粉中,或作為各種核酸藥物中間體。 本項目的特點是:1)提取高活力的磷酸二酯酶,代替桔青霉直接發酵液,大大減少了設備投資及生產成本,有效地消除了對環境的污染;2)通過對酶的預處理,有效地控制了酶反應過程中的副反應,使核苷酸轉化率明顯提高;3)通過新型離子交換樹脂的有序排列組合,可一次分離純化得到高純度單核苷酸,技術上收率達80%以上;4)使用本項目生產出來的產品,含量和純度均可達 %以上。達到國外先進水平。
華東理工大學 2021-02-01
的新型固定化系列技術
已有樣品/n針對酶在工程化應用中的缺陷,如易失活、不具回收性、抗逆性差 等,采用新型固定化技術,制備出具有高活性、高耐逆和工程化回用性 良好的固定化脂肪酶,提高酶活力 10-46 倍。如:以碳納米管為載體整 合其它方法固定化 BCL,固定化酶最大蛋白比活達 50,200 U/min/g protein,酶活回收率達 3,740%,為游離酶的 54 倍,是 MPR-NKA 固定化 酶的 1.5 倍,且大幅縮短了酶促反應時間,10 分鐘就能使手性拆分反應 達到平衡,較國際報道的最高水平提高 200 倍,
華中科技大學 2021-01-12
植物油法脫膠(技術)
成果簡介:油脂精煉過程中,脫膠是非常重要的一步工序,脫膠效果的好壞 直接影響到油脂精煉的效率和最終產品的質量。傳統的脫膠方法常存在產品 質量不穩定、消耗大、得率低、“三廢”排放量大等問題。酶法脫膠工藝是現 代工業生物催化技術在傳統油脂行業中的應用,是對現有化學或物理脫膠工 藝的改進,以提高其經濟性和環保性,有著廣泛的發展前景和重要的經濟和社會價值。本技術以自行篩選所得菌株 BIT-18表達的磷脂酶為對象
北京理工大學 2021-04-14
發酵香腸法增香技術
發酵香腸是一類高檔肉制品,以其風味受到消費者歡迎。本技術利用酶法促 進發酵香腸生產過程中風味的形成,在保持產品原有風味、香型不變的情況下, 使其風味物質形成量增大 7 倍(以 GC/MS 出峰面積計),生產時間明顯縮短,產 品風味更濃、持久性更強。
江南大學 2021-04-11
鴨坦布蘇病毒E蛋白和LTB的融合蛋白及其應用
本發明的目的是提供一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗,即篩選獲得鴨坦布蘇病毒E蛋白具有優勢抗原表位的DomainIII結構域,并通過Lingker與腸毒素LTB組成新型融合蛋白LTB-Es,并以該融合蛋白作為抗原來制備鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗。本發明中鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白LTB-Es,其編碼蛋白的氨基酸序列為SEQIDNO:1;其中一種核苷酸序列為SEQIDNO:2。本發明利用原核表達載體構建了能表達鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白LTB-Es的大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌。將重組表達的蛋白純化后制備成基因工程亞單位疫苗,可使免疫后鴨群獲得免疫保護。
青島農業大學 2021-04-11
化學蛋白質組學技術在膽酸結合蛋白方面的研究
主要是利用傳統的細胞分子生物學技術以及基因修飾的小鼠疾病模型,對有限的幾個膽酸相關蛋白進行研究,進展緩慢。迄今為止還從未有在蛋白質組水平上全面發掘可以和膽酸分子相互作用的靶標蛋白的研究,而化學蛋白質組學方法的發展與應用為解決這一問題提供了理想的技術平臺。??首次以天然膽酸分子結構為基礎,設計了一系列可以模擬其生物學功能的光交聯膽酸分子探針,然后結合定量蛋白質組學技術,在活細胞水平上全面探尋了哺乳動物體內可以和膽酸分子特異性結合的潛在蛋白靶點,并從生化水平上進行了驗證。
北京大學 2021-04-11
血紅蛋白測定儀血紅蛋白儀HB1002
HB1002型血紅蛋白測定儀是以國際規定的氰化高鐵血紅蛋白光電比色法為依據,進行設計制造,它用于測定人體血液血紅蛋白濃度,采用國際單位(g/L)不需作曲線,用氰化高鐵校正液定標后,就能完成濃度直讀。 HB1002型血紅蛋白測試儀具有自動進樣,濃度直讀,數字顯示,進樣調節,操作簡便,速度快,精度高,重量輕等優點,儀器經過嚴格檢定,質量好,實行三包,適用于各級醫院病室、門診、急診、學校和部隊體檢等推廣應用。 1、三位整數數顯 2、測定范圍:15~200g/L 3、樣品稀釋:1:251 4、測量時間:3~4秒 5、進液量:2ml左右 6、精度:±3% 7、重復測量誤差:±1g/L 8、溫飄:每30分鐘±2g/L 9、工作溫度:0℃一37℃ 10、電源:AC220V±10%,50HZ 11、功耗:10W 12、外形尺寸:160×120×190MM 13、重量:2kg 相關產品: 血乳酸分析儀-血乳酸儀 血乳酸鹽分析儀 血紅蛋白檢測儀 本文中所有關于血紅蛋白測定儀http://www.xinman8.com/352.html-血紅蛋白檢測儀的文字、參數、圖片等如有產品更新換代、參數變動請聯系我們的銷售、技術工程師。
上海欣曼科教設備有限公司 2021-08-23
甲表鬼臼毒素的生物轉化及分離提純方法
研發階段/n本發明公開了一種將鬼臼毒素生物轉化為4-(2,3,5,6-四甲基吡嗪-1-基)-4′-去甲表鬼臼毒素的方法,包括:(1)、將鬼臼毒素加入到液體發酵培養基中,然后接種腐殖性土壤菌二級液體種子進行生物轉化;(2)、將步驟(1)產物經分離純化后加入到液體發酵培養基中,接種鬼臼類植物內生菌二級液體種子進行生物轉化;隨后添加川芎嗪繼續生物轉化,收集轉化產物,即得。本發明還公開了從上述產物中分離純化4-(2,3,5,6-四甲基吡嗪-1-基)-4′-去甲表鬼臼毒素及其含量檢測的方法。本發明通過生物轉化
湖北工業大學 2021-01-12
一種基于圖像分層增強的圖像霧方法及系統
本發明公開了一種基于圖像分層增強的圖像去霧方法及系統,方法包括以下步驟:S1、估測原始圖像的大氣光值 A;S2、結合所述大氣光值構造兩層半逆圖像,對兩層半逆圖像進行線性對比度增強;S3、計算原始圖像和增強后的半逆圖像在 CIE-LCH 空間 H 通道的絕對差值,根據所述絕對差值確定增強后的半逆圖像的權值分布,根據所述權值分布將兩層增強后的半逆圖像進行融合;S4、對融合后的圖像進一步線性增強,獲得最終的對比度增強的去霧
華中科技大學 2021-04-14
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