植物紅細(xì)胞凝集素單體的純化工藝
植物紅細(xì)胞凝集素,學(xué)名Phytohemagglutinin-E (PHA-E),參考產(chǎn)品為Sigma公司產(chǎn)品,貨號為L8629。 凝集素是從豆科植物種子中提取的一種含糖蛋白質(zhì),植物凝集素具有刺激外周血淋巴細(xì)胞RNA合成和有絲分裂,促進(jìn)免疫反應(yīng),使細(xì)胞凝聚,腫瘤細(xì)胞失活,以及誘發(fā)人外周血淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗癌淋巴因子等生物學(xué)活性。PHA是由E、L兩種亞基組成的四聚體蛋白質(zhì)的混合物,按其亞基組成可分為L4、L3E、L2E2、LE3、E4具有相同物化性質(zhì)和不同生物學(xué)活性的同工凝集素。其中紅細(xì)胞凝集素(Erythrohemagglutinin ,PHA-E)含有4個相同的E亞基,具有最強(qiáng)的紅血球凝集功能,沒有白細(xì)胞凝集能力。 產(chǎn)品-紅細(xì)胞凝集素是由英國紅蕓豆(俗稱紅腰豆,屬于常見雜糧)為原料,采用親和純化技術(shù)制備得到,屬于植物提取蛋白質(zhì),產(chǎn)品為白色粉末,安全無毒。目前,紅細(xì)胞凝集素主要作為體外診斷試劑的重要組成部分,應(yīng)用于去除臨床血液樣本中的紅細(xì)胞。使得最終檢驗(yàn)結(jié)果快速準(zhǔn)確,有效避免了傳統(tǒng)采用離心方法分離血漿和紅血球中出現(xiàn)的細(xì)胞破裂等問題,因此近年來廣泛用于臨床和科研上凝集去除血液中的紅細(xì)胞。 我們建立了一套低成本快速的分離純化工藝,能特異性純化得到PHA-E,同時生產(chǎn)成本能下降至進(jìn)口同類商品售價的5%以下。該工藝不需要太多設(shè)備,普通實(shí)驗(yàn)室即可完成200mg-1000mg規(guī)模生產(chǎn)。產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)得到國外公司的肯定。目前國內(nèi)尚無該產(chǎn)品銷售。
成都醫(yī)學(xué)院
2015-01-08