人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7突變蛋白制法及用途
本發(fā)明提供一種人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7突變蛋白,含有Arg198Ile/His200Phe的突變,具有SEQ ID NO.1的氨基酸序列。是從人結(jié)直腸癌細胞系SW480cDNA文庫中選出igfbp7基因編碼序列,然后構(gòu)建到原核表達載體pET28a質(zhì)粒中,使其能夠在大腸桿菌菌株BL21中表達IGFBP7蛋白。在該表達載體的基礎(chǔ)之上,構(gòu)建人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7突變蛋,轉(zhuǎn)化BL21后表達純化突變蛋白,指出IGFBP7與胰島素結(jié)合的關(guān)鍵位點。本發(fā)明提供的突變蛋白,制備方法步驟簡單可行且成功率較高,該蛋白與胰島素的結(jié)合能力有明顯降低,從而可以抑制胰島素抵抗,可在制備治療2型糖尿病藥物中應(yīng)用。
浙江大學(xué)
2021-04-13