一種保持種子活力的玉米單粒胚乳DNA的提取方法
本發(fā)明公開了屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域的玉米單粒胚乳DNA的提取方法。本發(fā)明先將種子浸泡,然后切去部分胚乳,再加入浸提緩沖液,在55℃水浴后將胚乳研磨;向胚乳中加入CTAB抽提液進行抽提,再加入蛋白酶K和醋酸鈉,最后加入飽和酚和氯仿/異戊醇,離心;向上清液中加入異丙醇,離心,用70%乙醇沖洗沉淀,干燥,加入TE中溶解。本發(fā)明方法不破壞種子本身的生活力,切除部分胚乳后仍可育苗移栽,利于進行大規(guī)模分子標(biāo)記輔助選擇;其次,本發(fā)明方法提取的DNA濃度高、純度高;此外,本發(fā)明方法可在室內(nèi)對育種后代進行分子標(biāo)記輔助選擇,工作效率高,節(jié)約人力、物力和財力;最后,本發(fā)明被切割種子被感染發(fā)霉的概率低,育苗成功率高。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-13