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本項目利用轉(zhuǎn)基因家蠶絲腺大規(guī)模重組表達具有生物活性人酸性成纖維細胞生長因子基因 (haFGF )及其表達系統(tǒng)和應用。根據(jù)家蠶密碼子實用偏好性優(yōu)化并改造haFGF的編碼基因，將改造 haFGF基因與分泌型絲膠1基因啟動子和分泌型絲膠1基因終止子構(gòu)成表達框，并用增強子Hr3增強表達,同 時連入piggyBac轉(zhuǎn)座臂和熒光篩選標記基因構(gòu)建表達系統(tǒng)，該表達系統(tǒng)可實現(xiàn)在家蠶絲腺中高效表達重組 haFGF ,并分泌至蠶絲中。重組haFGF的含量可占蠶絲纖維重量的5%。從50g蠶絲中可以分離純化獲得 lmg具有促進細胞增殖功效的haFGF重組蛋白，純度為98.5%。本項目表達的haFGF將會在美容化妝和醫(yī)學 臨床等領(lǐng)域具有良好的應用前景。

本發(fā)明公開了一組能特異結(jié)合結(jié)核分枝桿菌北京基因型菌株表面脂糖——甘露糖修飾的脂阿拉伯 甘露聚糖(Mannosylated lipoarabinomannan，ManLAM)的核酸適配子及其用途。該組適配子是針對 ManLAM 的小分子單鏈 DNA(ssDNA)，其核苷酸序列如 SEQ ID No.1-5 所示。該小分子單鏈 DNA 具 有與單克隆抗體類似功能，能直接并特異結(jié)合 Man LAM。采用酶聯(lián)寡核苷酸分析(Enz

骨肉瘤是一種青少年常見的惡性骨腫瘤，目前治療手段主要是外科切除加化療，這種治療方式存在很多不足。該課題擬通過放射與基因手段聯(lián)合應用進行治療骨肉瘤研究，依據(jù)可信，立項充分。自殺基因CD/5-FC 和HSV-TK/GVC 系統(tǒng)基因治療臨床試驗方案已經(jīng)得到了一定程度地開展，并且取得了不錯的結(jié)果，而本課題通過輻射誘導基因Egr-1 啟動子調(diào)控雙自殺基因CD/TK，治療骨肉瘤，從一個新的角度開展治療骨肉瘤的研究，立體新穎，如果該方法被驗證可行，將會為骨肉瘤的治療提供一種新的治療手段。該課題組已經(jīng)構(gòu)建出GFP 做標志的Egr-1 調(diào)控CD/TK 雙自殺融合基因的腺病毒載體pAdEgr-1-CD/TK，而且已經(jīng)證明其序列正確以及Egr-1 的活性，因此在此基礎(chǔ)上進一步研究其對骨肉瘤的治療效果，實驗方法可行，預計能夠按時完成課題項目。

2020年2月4日上海復旦大學公共衛(wèi)生學院張永振團隊在《自然》雜志發(fā)表了與中國呼吸道疾病爆發(fā)相關(guān)的病毒的基因組序列，該病毒基因組從就職于出現(xiàn)首批患者的海鮮市場的一名病人身上獲得。基因組分析顯示，該病毒與此前在中國蝙蝠體內(nèi)找到的一組SARS樣冠狀病毒密切相關(guān)。 張永振及同事研究了一名41歲的男性海鮮市場工人，其于2019年12月26日在武漢一家醫(yī)院住院，表現(xiàn)出呼吸系統(tǒng)疾病癥狀，包括發(fā)燒、胸悶和咳嗽。聯(lián)合使用抗生素、抗病毒藥和糖皮質(zhì)激素進行治療，但患者表現(xiàn)出呼吸衰竭，治療三天后病情無改善。團隊對從患者收集的支氣管肺泡灌洗液（肺分泌物）進行了基因組測序。他們鑒定出了一種新型病毒，并發(fā)現(xiàn)該病毒基因組與蝙蝠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的SARS樣冠狀病毒有89.1%的核苷酸相似性。盡管從單個患者的分析中不可能得出該冠狀病毒是當前疫情爆發(fā)原因的結(jié)論，不過團隊的這些發(fā)現(xiàn)已被針對其他患者的獨立調(diào)查研究證實。 

本技術(shù)成果通過整合電化學、微機電和自動化控制技術(shù)，開發(fā)了一套適合于 出入境口岸動物疫病等的現(xiàn)場快速檢測設備 便攜式動物疫病現(xiàn)場檢測儀。檢 測儀在結(jié)構(gòu)上不同于現(xiàn)有的進口濁度儀，采用自主開發(fā)的微機電加熱技術(shù)保證疫 病基因的高效等溫擴增，同時集成可視化微型紫外檢測模塊使得結(jié)果的觀察和判 斷更為方便。該儀器具備穩(wěn)定的溫度控制電路、便捷的結(jié)果檢測方式，體積小方 便攜帶，且具有自主知識產(chǎn)權(quán)，避免了使用價格昂貴，且不便攜帶的實時濁度儀、 PCR儀或水浴鍋，適合于出入境口岸對動物疫病等進行現(xiàn)場的快速診斷或篩查。實驗樣機采用鏈置換聚合酶引導下的環(huán)介導等溫擴增反應生成大量焦磷酸 鎂沉淀和DNA產(chǎn)物的原理，包括四路并行的單色激光器和二極管陣列光電檢測 器，實現(xiàn)對樣本中的生物基因（DNA）進行實時檢測和分析。同時，利用磁珠 法提取核酸的基本理論，研制了手持式核酸提取裝置，對細胞中的核酸（DNA 和RNA）完成純化和提取，完成的樣本前處理工作，整個過程不需要離心機，單 個提取時間不超過30分鐘。從樣本前處理到后續(xù)的基因檢測，完成單個樣本檢 測的平均時間不超過60分鐘，可以實現(xiàn)對食品、農(nóng)產(chǎn)品、肉制品、水產(chǎn)品中各類 病原微生物的快速檢測和現(xiàn)場查驗。

通過對個體全基因組單核苷酸多態(tài)性（SNP）信息與疾病表型的全基因組關(guān)聯(lián)分析，以及兩階段獨立人群驗證，最終在2942例鼻咽癌患者中發(fā)現(xiàn)了位于14號染色體上CEP128 基因啟動子區(qū)的變異位點rs17111237與放射性腦損傷的發(fā)生存在顯著關(guān)聯(lián)，攜帶危險型等位基因的個體CEP128基因的表達水平顯著較低。特別地，聯(lián)合臨床危險因素，攜帶危險基因型的高危鼻咽癌患者放射性腦損傷五年發(fā)病風險為攜帶保護基因型的低危患者的3倍。CEP128基因編碼中心體蛋白，在纖毛形成和細胞周期調(diào)控中起著至關(guān)重要的作用。研究表明，CEP128可通過與CASK、CEP72等蛋白相互作用，維持纖毛的功能并調(diào)節(jié)細胞對射線等外界刺激的反應。我們進一步以放射性腦損傷的主要靶細胞——神經(jīng)膠質(zhì)細胞為模型探究了CEP128基因的功能，通過克隆形成實驗發(fā)現(xiàn)敲減CEP128基因的表達顯著增加了神經(jīng)膠質(zhì)細胞的放射敏感性。

開發(fā)了一種還原敏感的多功能載體材料，載體的疏水性嵌段包載抗腫瘤光動力藥物Ce6，攜帶NTA基團的嵌段則通過NTA和Cas9蛋白末端His標簽之間的特異性結(jié)合高效負載Cas9蛋白/sgRNA復合物，然后通過靜電組裝在外層引入靶向腫瘤組織的iRGD分子。這樣的載體結(jié)構(gòu)設計和藥物聯(lián)合輸送為實現(xiàn)腫瘤組織特異性的基因編輯和聯(lián)合治療提供了可行性。納米藥物靶向輸送至腫瘤細胞后，在近紅外光的輻照下，Ce6產(chǎn)生的活性氧使溶酶體破裂，使納米藥物從溶酶體中逃逸出來，NTA和載體聚合物之間的二硫鍵可響應胞質(zhì)內(nèi)的谷胱甘肽等還原劑而斷裂，從而將Cas9蛋白/sgRNA復合物從載體上釋放出來，執(zhí)行基因編輯功能。在正常的組織中，由于沒有近紅外光的輻照，Cas9蛋白/sgRNA復合物難以從溶酶體中逃逸，無法執(zhí)行基因編輯的功能。通過紅外光輻照和還原敏感設計實現(xiàn)了腫瘤組織特異的基因編輯。此外，腫瘤細胞在受到Ce6所生成活性氧攻擊時，會上調(diào)Nrf2（一種活性氧代謝的關(guān)鍵蛋白）的表達，提高腫瘤細胞對活性氧的耐受性。使用靶向Nrf2基因的sgRNA，可以通過聯(lián)合輸送的Cas9蛋白/sgRNA復合物使Nrf2基因失活，提高腫瘤細胞對活性氧的敏感性。總而言之，通過多功能載體聯(lián)合輸送Ce6和Cas9蛋白/sgRNA復合物，一方面實現(xiàn)了腫瘤特異性的基因編輯，另一方面也實現(xiàn)了基因編輯和光動力治療的聯(lián)合治療，協(xié)同提高了基因編輯的特異性和治療效果，為基因編輯技術(shù)的發(fā)展提供了一個新的方向。

在基因治療中，載體將治療基因?qū)氚屑毎蛊渑c宿主染色體整合為一體或在宿主細胞中表達特定蛋白質(zhì)，從而治療因基因異常或缺陷而導致的疾病。因此，基因治療成敗的關(guān)鍵在于基因遞送系統(tǒng)。基因治療市場未來市場空間巨大。據(jù)Clinical Trial數(shù)據(jù)，目前基因藥物以病毒載體為主，約占所有載體的70%，未來病毒載體市場前景十分廣闊。2017年FDA批準羅氏公司的基于AAV病毒載體的基因療法Luxturna用來治療患有特定遺傳性眼疾的兒童和成人患者。從實驗室簡單的基因過表達、體外的基因干擾、基因編輯（CRISPR/Cas9）技術(shù) 、CAR-T免疫療法技術(shù)、到腫瘤、神經(jīng)、代謝、眼科、心臟、肝臟、肺等臨床前動物和臨床人體試驗的研究，基因病毒載體的應用無處不在。我國離世界先進水平在技術(shù)上存在巨大差距，基因運載工具由于開發(fā)難度大，生產(chǎn)工藝要求高，目前我國和國際先進技術(shù)相比還存在非常大的差距，國內(nèi)基因治療藥物的研發(fā)還處于起步階段，還存在巨大的市場需求沒有得到滿足，而目前美國FDA已有批準的的基因治療藥物收費非常高昂。    目前采用病毒載體的基因療法已經(jīng)成功用于血友病，先天性黑矇，脊髓肌肉萎縮癥等單基因疾病的治療。

產(chǎn)品詳細介紹  由于qPCR是實時定量檢測致病病原體基因核酸，因此它比化學發(fā)光、實時分辨、蛋白芯片等免疫學方法更具獨到優(yōu)勢。   基因擴增儀實時熒光定量pcr儀|熒光定量pcr儀價格|abi熒光定量pcr儀|熒光定量pcr|熒光定量pcr原理|實時熒光定量pcr|熒光定量pcr技術(shù)|熒光定量pcr結(jié)果分析|實時熒光定量pcr技術(shù)|熒光定量pcr步驟|基因擴增儀-實時熒光定量pcr儀價格原理科研型TC988C（48孔） 產(chǎn)品編號：TC988C   產(chǎn)品規(guī)格：48孔X0.2 產(chǎn)品簡介：由于qPCR是實時定量檢測致病病原體基因核酸，因此它比化學發(fā)光、實時分辨、蛋白芯片等免疫學方法更具獨到優(yōu)勢。 產(chǎn)品詳情：僅供科研使用 國際領(lǐng)先水平的TC988型實時熒光定量PCR儀適用于臨床及科研以聚合酶鏈式反應為特征的、以實時熒光定量檢測分析DNA/RNA為目的的病原體檢測及基因分析。 動物疾病檢測：禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。 食品安全：食源微生物、食品過敏源、轉(zhuǎn)基因、乳品企業(yè)阪崎腸桿菌等檢測。 科學研究：醫(yī)學、農(nóng)牧、生物相關(guān)分子生物學定量研究。 應用行業(yè)：大學及研究所 技術(shù)原理： 標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈反應規(guī)律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度，求得CT值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù)。 技術(shù)參數(shù)： 標本載體 0.2ml薄壁PCR離心管 標本數(shù)量 標本數(shù)量48個，包括4個標準品 試    劑 SYBR Green I，F(xiàn)AM，Tex Red，F(xiàn)ITC等熒光染料，開放式PCR試劑 反應體系 10-100μL 建議質(zhì)控 四個陽性標準品、陰性對照   指標 熒光激發(fā)波長 470nm 熒光發(fā)射波長 530nm，640nm，710nm 570nm，605nm 熒光檢測方式 光開關(guān)陣列組合光電倍增管PMT方式? 控溫范圍 4.0℃-99.0℃? 熱蓋溫度 100℃～120℃? 升/降溫速度 ≥4.0℃/S（Max）? 溫度均勻性 ≤±0.3℃? 溫度精確度 ≤±0.3℃? 溫度顯示精度 0.1℃? 檢測范圍 101～1010DNA/RNA copy/ml CT值重復性誤差 CV≤2.1％?重要 核酸精度相關(guān)系數(shù) R≥0.997?重要   軟件 溫階 1～9 循環(huán) 1～99 保溫時間 1～9999秒     +.3.0.0.0..366999文件 1～9個連接 升級方式 遠程硬件內(nèi)控軟件升級   系統(tǒng)接口 RS-232C串行接口，雙向數(shù)據(jù) 主機操作系統(tǒng) Windows2000/XP 產(chǎn)品外形尺寸 50cm× 40cm × 35cm 產(chǎn)品重量 25kg 使用環(huán)境 溫度5～40℃，相對濕度≤80％ 使用電源 AC220 × （1±10%）V,50 × （1±2%）HZ 功耗 1100VA   多規(guī)格 提供96孔，多通道/多色、36孔等不同規(guī)格產(chǎn)品 產(chǎn)品特點： 專利技術(shù)應用實現(xiàn)快速高效均衡擴增檢測由光開關(guān)陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體，在以16位單片機為核心的電控裝置管理下，能在毫秒級時間內(nèi)完成多個標本快速均衡掃描檢測，避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現(xiàn)標準樣本的PCR熱循環(huán)擴增及高通量實時熒光激發(fā)和定量檢測。  1.走在PCR技術(shù)的前列 在PCR儀研發(fā)和市場化領(lǐng)域中歷史悠久； 將標準化的PCR檢測技術(shù)成功廣泛用于臨床；  2.快速實時PCR技術(shù)實現(xiàn)了DNA/mRNA檢測的快速性 實時檢測啟用熒光探針標記特定核酸的93 方法使準確性更高； 簡化了傳統(tǒng)PCR方法； 使用最少的樣本量，在一小時左右出結(jié)果； 3.簡便閉管分析使您完成加樣后就無須再接觸樣本 減少樣本消耗殆盡風險； 縮短了出報告時間； 簡化了試驗步驟； 4.提高了用戶高級應用的靈活性 提供了用戶自定義PCR操作平臺； 建立您的用戶自定義應用； 分析用戶自定義試驗； 相關(guān)鏈接：http://www.tocan.cn/index.php?do=product&CategoryID=1004   詳情請鏈接網(wǎng)址：www.tocan.cn聯(lián)系電話：021-51863860、18917331948   聯(lián)系QQ：278622785                          傳　　真：021-55236681 公司地址：上海市翔殷路165號A區(qū)319室 郵編：200433