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1、理化專業(yè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)人員2、企業(yè)管理高級(jí)人員

本發(fā)明公開(kāi)了一種來(lái)源于象耳豆根結(jié)線蟲(chóng)的Mesp1蛋白及其編碼基因和應(yīng)用。本發(fā)明提供了Mesp1蛋白，是由序列表中序列1或序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。編碼Mesp1蛋白的Mesp1基因也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明還保護(hù)Mesp1蛋白的應(yīng)用，為如下(c1)至(c3)中的至少一種：(c1)調(diào)控根結(jié)線蟲(chóng)的寄生能力；(c2)調(diào)控根結(jié)線蟲(chóng)的致病能力；(c3)調(diào)控根結(jié)線蟲(chóng)的發(fā)育。本發(fā)明還保護(hù)一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：將所述干擾Mesp1基因表達(dá)的物質(zhì)導(dǎo)入出發(fā)植物，得到轉(zhuǎn)基因植物；所述轉(zhuǎn)基因植物對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)的抗性高于所述出發(fā)植物。本發(fā)明對(duì)于象耳豆根結(jié)線蟲(chóng)致病機(jī)理研究以及抗線蟲(chóng)植物制備具有重大價(jià)值。

本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體的說(shuō)是一種許氏平鮋免疫增強(qiáng)蛋白(HMGB1)編碼基因及其重組蛋白制備和應(yīng)用。HMGB?1為序列表SEQ?ID?No.1中的氨基酸序列所示，該蛋白的編碼基因?yàn)樾蛄斜鞸EQ?ID?No.2中的堿基序列所示。其制備方法：以鰻弧菌刺激的許氏平鮋頭腎cDNA為模板，PCR擴(kuò)增HMGB1編碼基因，構(gòu)建質(zhì)粒pHMGB1；將pHMGB1轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21Transetta(DE3)，對(duì)轉(zhuǎn)化子進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)后，提取和純化蛋白，即得重組HMGB1蛋白。所述重組HMGB1蛋白可結(jié)合雙鏈DNA，并可顯著提高許氏平鮋頭腎巨噬細(xì)胞的免疫活性，提高其對(duì)鰻弧菌的殺菌功能和許氏平鮋對(duì)鰻弧菌的抵抗能力。該重組HMGB1蛋白可作為免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用于魚(yú)類鰻弧菌病害的防治。

該成果榮獲2009年度重慶市自然科學(xué)獎(jiǎng)一等獎(jiǎng),項(xiàng)目建成了世界最大和最豐富的家蠶突變基因資源庫(kù), 共保存遺傳系統(tǒng)700余個(gè)，覆蓋國(guó)際現(xiàn)存的95% ;新建立家蠶資源系統(tǒng)400個(gè);發(fā)現(xiàn)新突變基因60余個(gè)，占 同期國(guó)內(nèi)90%以上、國(guó)際70%以上。通過(guò)對(duì)重要突變基因資源的研究取得了重要?jiǎng)?chuàng)新結(jié)果，包括闡明65個(gè)新 突變基因的遺傳模式，確定了50個(gè)的所屬連鎖群（染色體）,定位40個(gè)基因；建立了27連鎖群的標(biāo)記基因; 建立了230多個(gè)形態(tài)基因的連鎖標(biāo)記體系等。構(gòu)建了世界第一套完整的家蠶近等位基因系，首次建立了3個(gè)重 要品系高純度近交系，繪制了家蠶SADF. RAPD, AFLP. SSR等分子連鎖圖譜6張，構(gòu)圖分子標(biāo)記2756 個(gè)，繭質(zhì)性狀QTLsll個(gè)，研究了一批重要突變基因的功能等。項(xiàng)目所取得的研究成果使我國(guó)家蠶遺傳資源研 究整體上達(dá)到國(guó)際領(lǐng)先水平,并為我國(guó)蠶業(yè)科學(xué)研究提供了強(qiáng)大的資源支撐。目前每年有大約50個(gè)機(jī)構(gòu)索取 基因庫(kù)資源進(jìn)行科學(xué)研究，年使用頻率超過(guò)500份次。家蠶基因資源庫(kù)建立和突變基因研究奠定了蠶學(xué)基礎(chǔ) 研究、產(chǎn)業(yè)研發(fā)、高層次人才培養(yǎng)的重要基礎(chǔ)，將對(duì)家蠶功能基因組學(xué)、實(shí)驗(yàn)生物和鱗翅目害蟲(chóng)模式等前沿 研究產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響。

該技術(shù)可利用人體自身存在的機(jī)制進(jìn)行RNA的單堿基編輯，避免了任何由于表達(dá)外源效應(yīng)蛋白而引起的潛在問(wèn)題。 新型基因編輯技術(shù)（魏文勝團(tuán)隊(duì)） 　　LEAPER (Leveraging Endogenous ADAR for Programmable Editing on RNA)是一類具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新型基因編輯技術(shù)，該技術(shù)可利用人體自身存在的機(jī)制進(jìn)行RNA的單堿基編輯，避免了任何由于表達(dá)外源效應(yīng)蛋白而引起的潛在問(wèn)題。LEAPER技術(shù)具有高精度、易于遞送、長(zhǎng)時(shí)效、高安全性等多種優(yōu)點(diǎn)，并在包括遺傳性疾病治療方面展現(xiàn)出了可觀的優(yōu)勢(shì)及潛能，成功為生命科學(xué)基礎(chǔ)研究和疾病治療提供了一種全新的工具。 　　 LEAPER技術(shù)原理 　　近年來(lái)，以CRISPR/Cas9為代表的基因組編輯技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域產(chǎn)生了深遠(yuǎn)的影響，但存在的一系列問(wèn)題使該技術(shù)在臨床治療應(yīng)用中遭遇瓶頸。根源之一在于當(dāng)前的基因編輯體系依賴于外源編輯酶或效應(yīng)蛋白的表達(dá)，從而造成 (1) 蛋白分子量過(guò)大使得通過(guò)病毒載體進(jìn)行裝載及人體內(nèi)遞送十分困難；(2) 由蛋白過(guò)表達(dá)引起的DNA/RNA水平的脫靶效應(yīng)；(3) 由外源蛋白表達(dá)引起的機(jī)體免疫反應(yīng)及損傷；(4) 機(jī)體內(nèi)的預(yù)存抗體使外源編輯酶或效應(yīng)蛋白被中和從而導(dǎo)致基因編輯失敗等。 　　為解決上述問(wèn)題，擺脫傳統(tǒng)技術(shù)依賴于外源蛋白表達(dá)的桎梏，2019年魏文勝團(tuán)隊(duì)建立了具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的名為L(zhǎng)EAPER的新型基因編輯技術(shù)。與RNAi類似，LEAPER充分利用了細(xì)胞中天然存在的機(jī)制：僅用一條RNA 就實(shí)現(xiàn)了精確高效的RNA單堿基編輯，從而避免了任何由于表達(dá)外源效應(yīng)蛋白而引起的各種潛在問(wèn)題。研究人員利用LEAPER成功修復(fù)了來(lái)源于Hurler綜合征病人的缺陷細(xì)胞，為未來(lái)相關(guān)疾病的治療奠定基礎(chǔ)。此外，LEAPER還有希望衍生出多種延展型技術(shù)，為生物醫(yī)學(xué)等研究提供新型工具。

防治牛子宮復(fù)舊不全的中藥組合物，由以下組分組成：10?30份益母草、10?30份當(dāng)歸、10?30份黃芪、10?30份白鮮皮、10?20份延胡索、10?30份艾葉、10?30份丹參、10?20份川芎、10?20份炮姜、10?20份醋香附、10?20份海螵蛸、10?20份川斷、10?20份連翹、10?20份硼砂、10?20份薄荷、10?20份三七、10?20份白及和10?20份甘草。本發(fā)明所述的中藥組合物有效的結(jié)合了益母草、當(dāng)歸、黃芪、白鮮皮、延胡索、艾葉和丹參核心藥物的功效，并輔以川芎、炮姜、醋香附、海螵蛸、川斷、連翹、硼砂、薄荷、三七、白及和甘草輔助藥材，采用適當(dāng)?shù)闹苽浞椒ǎ瑢?shí)現(xiàn)了加強(qiáng)子宮平滑肌收縮、抑菌抗炎、增強(qiáng)免疫力、止血鎮(zhèn)痛和祛腐生肌的藥效，能有效預(yù)防和治療牛子宮復(fù)舊不全，降低產(chǎn)后子宮感染幾率，提高患牛的繁殖能力。

本實(shí)用新型具體涉及一種雙牛腿的裝配式連接節(jié)點(diǎn)，包括預(yù)制柱、預(yù)制梁，所述預(yù)制柱上設(shè)置有上牛腿柱、下牛腿柱，所述預(yù)制梁為T型梁，所述預(yù)制梁的T字部分頂端設(shè)置梯形，且梯形底角設(shè)置為45°；所述預(yù)制梁設(shè)置為四個(gè)，所述四個(gè)預(yù)制梁的梯形梁端圍繞預(yù)制柱拼接形成一個(gè)正方形，且安裝在下牛腿柱上；所述預(yù)制梁的梯形梁端上設(shè)置有豎直固定孔，所述上牛腿柱上設(shè)置有豎直安裝孔，所述豎直固定孔與豎直安裝孔中通過(guò)高強(qiáng)度螺栓固定。本實(shí)用新型梁柱連接整體性增強(qiáng)，提高了梁的剛度、強(qiáng)度以及整體穩(wěn)定性，也提高了梁柱節(jié)點(diǎn)處的強(qiáng)度和變形能力，整體

研發(fā)階段/n一種牛支原體致弱菌株及其應(yīng)用。　　成果簡(jiǎn)介：本成果利用體外高溫脅迫連續(xù)傳代180代將牛支原體臨床分離株HB0801致弱，獲得致弱株系列，通過(guò)牛體試驗(yàn)證實(shí)，第150代致弱株（F150）可作為疫苗株。通過(guò)疫苗的安全性和免疫效力等一系列動(dòng)物試驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)F150株毒力弱但免疫原性好，安全有效可用于牛支原體肺炎的免疫預(yù)防。同時(shí)本研究還利用細(xì)菌發(fā)酵技術(shù)，通過(guò)工藝路線和參數(shù)的篩選與優(yōu)化將牛支原體的活菌數(shù)由109CFU/mL提高至1010CFU/mL，提高了生產(chǎn)效率，降低了生產(chǎn)成本。　　應(yīng)用前景：目前

已有樣品/n牛源性肉制品分子鑒定試劑盒及應(yīng)用。　　成果簡(jiǎn)介：本成果屬于肉制品分子檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，可以對(duì)牛源性肉制品以及飼料中的牛源性成分進(jìn)行分子鑒定；本成果通過(guò)使用設(shè)計(jì)的特異引物對(duì)牛TNFRSF10A 特異性第八外顯子序列片段進(jìn)行PCR（Polymerase Chain Reaction）擴(kuò)增，其擴(kuò)增結(jié)果可用來(lái)判別肉制品來(lái)源或飼料中動(dòng)物源性成分是否為普通牛(Bos taurus)，從而對(duì)牛肉制品來(lái)源判別以及飼料中牛源性成分鑒定的分子診斷環(huán)節(jié)提供技術(shù)支撐。本成果中的鑒定方法簡(jiǎn)便，快速，特異性強(qiáng)，且成本較