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L-纈氨酸是生命有機體的重要組成部分，在生命體內(nèi)物質(zhì)代謝調(diào)控和信息傳遞等許多方面扮演著重要角色。L-纈氨酸屬于八種必需氨基酸之一，也是三種支鏈氨基酸之一。L-纈氨酸發(fā)酵是典型的代謝控制發(fā)酵。國內(nèi)雖有天然蛋白質(zhì)水解液分離提取 L-纈氨酸的產(chǎn)品，但由于其產(chǎn)量很低，質(zhì)量不佳，純度不高，所以無法實現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。利用微生物發(fā)酵法生產(chǎn) L-纈氨酸具有原料成本低，反應條件溫和及易實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點，是一種非常經(jīng)濟的生產(chǎn)方法。但是， 以微生物發(fā)酵法生產(chǎn) L-纈氨酸，國內(nèi)大多數(shù)菌株的產(chǎn)酸水平不高，特別是 L-纈氨酸的生產(chǎn)水平和產(chǎn)量遠不能滿足國內(nèi)市場的需求。因此，開展發(fā)酵法生產(chǎn) L-纈氨酸的研究具有極其重要的意義。本研究室通過高通量篩選策略，獲得一株高產(chǎn)纈氨酸的黃色短桿菌。 

C8H9NO3；左旋-α-對羥基苯基氨基乙酸是β-內(nèi)酰胺類半合成抗生素的側(cè)鏈重要原料，是新型廣譜抗生素阿莫西林（Amoxicillin），阿撲西林（Aspoxicillin）、頭孢哌酮（Cefoperazone），頭孢羥氨芐（Cefodroxil）、頭孢羅齊（Cefoprozil）等藥物的必不可少的重要中間體，其在醫(yī)藥工業(yè)上應用廣泛，發(fā)展前途廣闊。同時，它還應用于感光領(lǐng)域和用作鐵、磷、硅等的分析試劑。   開發(fā)的本課題已經(jīng)過湖北省化工行業(yè)辦鑒定，技術(shù)處于國內(nèi)領(lǐng)先水平。本課題已作為湖北省科技攻關(guān)項目。

在泡騰飲料、泡騰藥物和膨松食品中，一甘氨酸鈉碳酸鹽（mono-SGC）是較理想的二氧化碳氣體的來源。與其它用作發(fā)泡劑的無機化合物（比如碳酸氫鈉）相比較，一甘氨酸鈉碳酸鹽有更優(yōu)越的理化性質(zhì)和應用范圍。一甘氨酸鈉碳酸鹽分解后的產(chǎn)物是甘氨酸和二氧化碳。甘氨酸是人體必須的氨基酸，可用來治療胃酸過多與肌力衰竭，在膠原中的含量為25%-30%。所以一甘氨酸鈉碳酸鹽用作藥物和食品中的發(fā)泡劑較為安全。一甘氨酸鈉碳酸鹽在國外已應用于食品和醫(yī)藥工業(yè)中，一項美國專利報道了一甘氨酸鈉碳酸鹽的制備，但產(chǎn)率只有77%。用我們改進的方法合成一甘氨酸鈉碳酸鹽產(chǎn)率可達90%。

谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)被廣泛用于食品工業(yè)生產(chǎn)，是一種安全性很高的工業(yè)菌株；具有包括 Sec 和 Tat 分泌途徑在內(nèi)完善的蛋白分泌系統(tǒng)；沒有類似于大腸桿菌(E. coli)所帶來的內(nèi)毒素和宿主細胞蛋白污染等問題。這些顯著優(yōu)點使它成為一種有吸引力的外源蛋白表達生產(chǎn)用的底盤細胞。目前國內(nèi)生物醫(yī)藥領(lǐng)域主要依賴于 E.coli 表達體系生產(chǎn)醫(yī)藥蛋白，原創(chuàng)性外源蛋白表達體系的缺失，在知識產(chǎn)權(quán)方面將制約到我國生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。該項成果有望為我國生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)提供一個具有自主知識 產(chǎn)權(quán)的谷氨酸棒桿菌安全高效外源蛋白表達體系。

項目研究背景： 該工藝以廉價的 L-Cbz-蛋氨酸為原料， 經(jīng)內(nèi)酯化反應 得到關(guān)鍵的中間體 N-Cbz-L- 高絲氨酸內(nèi)酯， 再與丙基溴反應對羧基進行保 護得到羥基丁酸丙酯衍生物，然后 PBr3 作為鹵化試劑發(fā)生鹵化反應，引 入溴離子離去基，含有離去基的側(cè)鏈與 N-羥基鄰苯二甲酰亞胺發(fā)生 N-烷 化反應，引入 NH2-O 健，接著在濃鹽酸中脫去保護基并發(fā)生水解酞酰亞 胺反應，得到含有

       上海頎高儀器有限公司始創(chuàng)于1986年，是由原上海石油儀器廠和武漢理工大學資深技術(shù)專家組成，是以研制、生產(chǎn)、銷售石油化工及煤化工領(lǐng)域分析儀器的專業(yè)生產(chǎn)廠商。產(chǎn)品適用于石油、電力、化工、科研、質(zhì)檢及大專院校等相關(guān)行業(yè)領(lǐng)域。本公司研制生產(chǎn)的常規(guī)化工分析及專用實驗室儀器十三個系列，共260余種。同時每年還應對市場及用戶的各種個性需求，單獨開發(fā)和定制生產(chǎn)非標類特殊用途的儀器約20余種。上海頎高是國內(nèi)同行業(yè)中產(chǎn)品門類最全、配套能力最強、發(fā)展速度最快的企業(yè)之一。公司堅定嚴格按照國標行標的試驗方法規(guī)定，絕不靠偷工減料來降低成本，保證儀器部件尺寸精度以及材料性能，真正讓用戶實驗數(shù)據(jù)滿足重復性和精密度的要求。近年來我司產(chǎn)品精細獨特的設計，節(jié)能可靠的系統(tǒng)，均被工礦企業(yè)、鐵路部隊、科研院校和質(zhì)監(jiān)部門廣泛采用，受到用戶一致好評。公司內(nèi)部已實施CRM、ERP項目管理，為產(chǎn)品品質(zhì)及企業(yè)的長遠發(fā)展提供了強有力的保障。面對未來，頎高人堅守“嚴謹、求實、高效、創(chuàng)新、合作、發(fā)展”的企業(yè)精神，精益求精，以一流的產(chǎn)品、優(yōu)質(zhì)的服務滿足客戶需求，為促進提高民族分析儀器工業(yè)的振興發(fā)展作出貢獻。 　  多年來，公司非常注重新技術(shù)、新工藝、新器件、新材料的應用，不斷提升公司儀器的自動化、智能化水平。據(jù)不完全統(tǒng)計，目前公司儀器中使用單片機技術(shù)或筆記本電腦進行控制測量、分析計算的儀器，已經(jīng)達到近100種。儀器的技術(shù)含量和技術(shù)檔次得到極大的提高，深受國內(nèi)外用戶的歡迎。多年的研發(fā)和實踐，讓上海頎高儀器更加精致穩(wěn)定，更加符合國標及行標的試驗要求。公司秉承“以人為本，科技創(chuàng)新”的理念，將銷售收入的10%～15%用于研發(fā)，致力于將產(chǎn)品升級換代至世界一流水準。依靠“高、精、尖“的科技人才隊伍及運用行業(yè)領(lǐng)先的開發(fā)手段，使得頎高產(chǎn)品質(zhì)量更有保障，品種不斷更新，始終處于行業(yè)領(lǐng)先地位。        未來的一年，我們?nèi)詫⒕ぞI(yè)業(yè)，樂于研發(fā)，不斷提升，生產(chǎn)出質(zhì)量更好、性能更完備的油品儀器，來滿足市場和答謝各位朋友的關(guān)心與支持。同時繼續(xù)秉承“質(zhì)量優(yōu)、服務好、價格適中”的宗旨，竭誠向各位新老用戶提供質(zhì)量優(yōu)異的石油化工及煤化工分析儀器和良好的售后服務。歡迎各界人士惠顧考察與指導！

通過微生物育種和基因工程手段相結(jié)合，獲得了一株脯氨酸高產(chǎn)菌株黃色短桿菌。發(fā)酵培養(yǎng) 65~68 h， L-脯氨酸產(chǎn)量高達 100 g/L，葡萄糖得率為 45%左右。 關(guān)鍵技術(shù) (1)本研究以玉米漿為氮源，有效的降低了發(fā)酵成本； (2)以葡萄糖和味精為原料生產(chǎn) L-脯氨酸的高轉(zhuǎn)化率發(fā)酵，該法綠色、環(huán)保、可持續(xù)，具有經(jīng)濟競爭力，有很好的產(chǎn)業(yè)應用前景。

γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一種重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性質(zhì)已被廣泛應用于食品，化妝品，醫(yī)藥，材料等領(lǐng) 域。解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是一株谷氨酸 非依賴型 γ-PGA 合成菌。為了提高其 γ-PGA 產(chǎn)量，項目組采用無痕 基因編輯技術(shù)對菌株進行了代謝工程改造。包括三部分：模塊化代謝 通路改造；蔗糖代謝途徑改造；谷氨酸合成途徑改造。 B. amyloliquefaciens LL3 是項目組從發(fā)酵食品中分離得到，它能 夠從蔗糖出發(fā)合成 γ-PGA。利用模塊化通路改造策略對 γ-PGA 合成 相關(guān)的八個代謝通路進行改造包括：γ-PGA 降解相關(guān)途徑；細胞呼吸 鏈；胞外蛋白及胞外蛋白酶合成途徑；細菌多糖合成途徑；次級小分 子代謝產(chǎn)物合成途徑；細胞自誘導因子合成途徑；谷氨酸合成途徑以 及 γ-PGA 合成途徑。最終整合獲得的最優(yōu)基因工程菌株 NK-anti-rocG （敲除了 epsA-O 操縱子（負責胞外多糖合成），sac 操縱子（負責果 聚糖合成），lps（脂多糖合成相關(guān)），pta（乙酸合成相關(guān)），pgdS（γ-PGA 降解酶），cwlO（細胞壁水解酶），luxS（AI-2 合成）以及表達 anti-rocG sRNA（抑制谷氨酸脫氫酶表達））γ-PGA 搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量從 3.8 g/L 提高到 11.04 g/L，較對照菌株提高了 2.91 倍。γ-PGA 產(chǎn)物純度也 從 78.6%提高到 95.2%。5-L 罐補料分批發(fā)酵實驗得到 NK-anti-rocG 菌株產(chǎn)量可達 20.3 g/L。分子量 450,000 Dal，純度 95%以上。 項目特色： 1. 菌種（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是谷氨酸非依賴型 γ-聚谷 氨酸合成菌株；發(fā)酵生產(chǎn)主要原料為蔗糖； 2. 補料分批發(fā)酵產(chǎn)量為：20.3 g/L。 3. 授權(quán)專利號為：ZL200810053900.7 市場應用前景： γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一種重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性質(zhì)已被廣泛應用于食品，化妝品，醫(yī)藥，材料等領(lǐng) 域。本項目采用谷氨酸非依賴型 γ-聚谷氨酸合成菌做為發(fā)酵菌種，以 蔗糖為原料發(fā)酵法生產(chǎn) γ-聚谷氨酸，可產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益和社會效 益。

項目簡介 作為一種主要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，賴氨酸側(cè)鏈乙酰化及乙酰賴氨酸側(cè)鏈去乙酰化 已在近年證明能有效地調(diào)節(jié)多個關(guān)鍵生命過程，并且也已證明是發(fā)展人類疾病藥物（特 別是癌癥）的新型生物靶點。本成果發(fā)展了兩個 Fmoc 保護的乙酰賴氨酸類似物（即 Fmoc硫乙酰賴氨酸和 Fmoc-甲磺酰賴氨酸）的有效制備方法及其成功應用于基于 Fmoc 化學的 固相多肽合成。本課題組的前期工作已表明含有這兩個乙酰賴氨酸類似物的肽及肽類化 合物能作為發(fā)展下一代抗癌藥物的全新起點以及作為更近一步研究蛋白質(zhì)乙

用本方法制出的反芻動物飼料添加劑瘤胃保護性賴氨酸鹽酸鹽微膠囊包衣產(chǎn)品，可減少了賴氨酸在瘤胃中的降解，增加了小腸中賴氨酸的數(shù)量，克服了賴氨酸鹽酸鹽防潮性能差和存貯不便的缺點。本方法具有時間短、包衣效率高、制粒均勻等優(yōu)點。