一種高效快速構建豬腸道冠狀病毒重組病毒的方法
本發明屬于動物傳染病防制技術領域。具體涉及一種高效快速構建豬腸道冠狀病毒重組病毒的方法。利用CRISPR/Cas9系統對含有PEDV AJ1102株全長cDNA的BAC質粒進行切割,再通過同源重組方式獲得EGFP基因替換PEDV AJ1102株ORF3基因的重組BAC質粒,轉染細胞后拯救出重組病毒rAJ1102?△ORF3?EGFP。由于不同的豬腸道冠狀病毒具有相似的基因組結構與復制策略,本發明也適合于其它豬腸道冠狀病毒重組病毒的構建。與傳統方法相比,本發明具有靶點選擇寬泛,特異性強,操作簡單,效率高和實驗周期短等突出優點,在一周之內便可獲得重組病毒,是一種高效快速構建豬腸道冠狀病毒重組病毒的方法。
(注:本項目發布于2019年)
華中農業大學
2021-04-11