具有內毒素吸附能力的耶氏酵母和內毒素減毒大腸桿菌
研發有效的內毒素 LPS 脫毒方法具有重要意義,本項目一方面通過 KDO 定量方法檢測對 LPS 分子的吸附能力,從發酵食品中篩選到 LPS 吸附能力最強酵母菌株 CSW。證實 LPS 與 Y. lipolytica 細胞共存一段時間后,會產生 LPS 含量降低的現象。通過 18s r DNA 分析,菌株 CSW1 與 1.0 mg/m L 來源于 E. coil O111:B4的 LPS 共存后,可使 LPS 水平降低約 70%,而 S. cerevisiae BY4742 僅使 LPS含量近 30%。 另外一方面,過敲除大腸桿菌 E. coli 染色體基因上與 LPS 合成相關基因,構建了多株能夠直接合成新型特殊結構 Kdo2-lipid A 的突變菌株,具有低內毒素,適合用于大腸桿菌表達宿主生產各種蛋白及氨基酸。 關鍵技術 脂多糖 LPS 是存在于大多數革蘭氏陰性菌外膜的主要組成部分,可通過激活宿主細胞內 TLR4 受體信號轉導途徑等,促進炎性細胞分泌多種細胞因子,進而引發強烈的免疫反應,造成疾病或者死亡,在食品和藥品中是重要的毒力因子,因此研發有效的 LPS 脫毒方法具有重要意義。本成果獲得了食品級的 LPS 脫毒菌株,具有應用前景。工業發酵中大腸桿菌野生型菌株中內毒素釋放,是導致熱原污染的重要原因,這增加了分離純化成本,本成果從源頭改造獲得低毒性的大腸桿菌平臺菌株,避免了發酵工程中熱原產生
江南大學
2021-04-11