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提供遺傳性狀穩(wěn)定、高產(chǎn)蝦青素的法夫酵母（ Phaffia rhodozyma） YZUXHONG686CCTCC NO.M 208262 ， 在食品、醫(yī)藥、化妝品及養(yǎng)殖行業(yè)可得到廣泛的應(yīng)用。

中試階段/n該項(xiàng)目公開了一株飼用布拉氏酵母及其應(yīng)用，申請(qǐng)人自土壤中篩選出一株布拉氏酵母，經(jīng)體外實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，該布拉氏酵母具備良好的耐鹽，耐胃酸，耐人工腸液，耐熱的能力，該菌株已送至中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏編號(hào)：CCTCCNO：M2014211。將該菌接種于麩皮，料水比1：2，糖化酶添加量200U/g，可溶性淀粉添加量2.4%，氯化銨添加量0.9%，發(fā)酵溫度30℃，發(fā)酵周期60h，可獲得高密度的發(fā)酵產(chǎn)物。經(jīng)仔豬實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)能順利通過胃腸環(huán)境，在腸道內(nèi)發(fā)揮生理活性作用，能維持動(dòng)物腸道微生態(tài)平衡，改

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胞二磷膽堿又名胞苷-5’-二磷酸膽堿（Cytidine–5’–diphosphate choline, CDP-C，CDP膽堿），為物體內(nèi)重要的生化物質(zhì)。它是磷脂代謝的重要前體,為卵磷脂生物合成必需的輔酶。大量研究證明,CDP-C具有以下效應(yīng)：（1）促進(jìn)生物代謝,尤其是磷脂的生物合成反應(yīng)；（2）促進(jìn)心血管功能,增加腦的血流量；（3）增強(qiáng)膽堿能,賦活中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能,改善意識(shí)狀態(tài)；（4）增強(qiáng)多巴胺能,抑制錐體外系,賦活錐體系；（5）恢復(fù)損傷組織細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能,防止水腫和繼發(fā)性病變。之外,CDP-膽堿由于具有焦磷酸鍵,對(duì)于那些參與電子傳遞過程的高能分子合成尤為重要。 本項(xiàng)目利用靜息酵母細(xì)胞中較強(qiáng)的糖酵解能力及較高的磷酸膽堿轉(zhuǎn)移酶的活力。通過葡萄糖酵解產(chǎn)生的生物能，經(jīng)ATP轉(zhuǎn)移到胞苷酸，形成胞苷三磷酸，再在磷酸膽堿轉(zhuǎn)移酶的作用下，最后得到胞二磷膽堿。 目前胞二磷膽堿產(chǎn)品國內(nèi)外供不應(yīng)求，而且隨著主要原料胞苷酸的成本下降，產(chǎn)品利潤豐厚。

硒是維持人和動(dòng)物生命話動(dòng)和正常生理功能所必需的微量元素之一，具有抗 癌，保護(hù)心肌等復(fù)雜的生理功能。缺硒時(shí)，機(jī)體免疫功能降低，易發(fā)生各種缺硒疾病.已知有40余種疾病與缺硒有關(guān)，常見的如克山病、大骨節(jié)病、高血壓、缺血性心臟病、肝硬化、胰腺炎、纖維瘤、癌癥、肌瘤、糖尿病、白內(nèi)障等。由于抗腫瘤效果顯著，被譽(yù)為“抗癌之王”。我國72%面積是缺硒地區(qū)，人體普遍缺硒。目前醫(yī)療用的硒補(bǔ)充劑是亞硒酸鹽。但亞硒酸鹽不能通過飲食補(bǔ)硒，因?yàn)檫^量攝入會(huì)中毒。 硒在人體和酵母細(xì)胞內(nèi)的存在方式是有機(jī)硒，不會(huì)導(dǎo)致中毒。本項(xiàng)目提供硒酵母的生產(chǎn)和相關(guān)硒酵母食品的制造技術(shù)。

研發(fā)階段/n本發(fā)明公開了一種醬油釀造專用酵母營養(yǎng)鹽及其應(yīng)用，該營養(yǎng)鹽由酵母浸出物、無機(jī)鹽和維生素組成，能提供醬油酵母在生長代謝過程中所需的營養(yǎng)物質(zhì)，顯著提高醬油酵母的高耐性，使其在高鹽和高溫環(huán)境下能保持旺盛的生理活性，能使耐鹽魯氏酵母的耐鹽度提高到16%以上，耐溫度從45℃提高到50℃，球擬酵母的耐鹽度提高到20%以上，耐溫度從35℃提高到45℃。

該種方法通過大型食用真菌平菇作為中藥發(fā)酵出發(fā)菌種，以中藥材黨參為發(fā)酵培養(yǎng)基主料，通過添加少量的菌種生長繁殖所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)中藥黨參進(jìn)行發(fā)酵。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示中藥黨參發(fā)酵液具有抗疲勞和提高興奮功效。因此，中藥黨參發(fā)酵液可以在制備抗疲勞藥物中應(yīng)用，也可在制備相應(yīng)的保健品、食品中應(yīng)用。具有獨(dú)立自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，已成功申請(qǐng)國家發(fā)明專利 1 項(xiàng)。

該種方法通過大型食用真菌平菇作為中藥發(fā)酵出發(fā)菌種，以中藥材黃芪為發(fā)酵培養(yǎng)基主料，通過添加少量的菌種生長繁殖所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)中藥黃芪進(jìn)行發(fā)酵。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示中藥黃芪發(fā)酵液具有明顯的耐缺氧和抗凝血功效。因此，中藥黃芪發(fā)酵液可以在制備抗缺氧、抗凝血藥物中應(yīng)用，也可在制備相應(yīng)的保健品、食品中應(yīng)用。具有獨(dú)立自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，已成功申請(qǐng)國家發(fā)明專利 1 項(xiàng)。

該項(xiàng)目 成功 構(gòu)建 了 一株高 產(chǎn)堿 性果 膠 酶的畢 赤酵 母工 程 菌 (Pichia pastoris GS115),通過對(duì)發(fā)酵過程的優(yōu)化控制，在 3L 罐中酶活達(dá)到 890U/mL。 在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了堿性果膠酶的中試及其工業(yè)化研究，在 10 噸發(fā)酵罐中產(chǎn)酶達(dá)到 1305U/mL.采用該重組堿性果膠酶代替?zhèn)鹘y(tǒng)的強(qiáng)堿高溫工藝，廢水 COD 顯著降低，可生化性較大提高。處理體系 pH 值為 9.4，代于堿精練水平；酶處理溫度低于堿處理，這些結(jié)果對(duì)棉織物前處理的清潔生產(chǎn)具有重要的應(yīng)用價(jià)值。 

本發(fā)明達(dá)到的技術(shù)效果為工程化釀酒酵母菌可實(shí)現(xiàn)無需添加異源前體物或底物僅通過培養(yǎng)微生物即可從頭合成高效人參皂苷Ro、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、姜狀三七苷R1等三種齊墩果烷型稀有人參皂苷以及金盞花苷E。 一、項(xiàng)目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、技術(shù)分析 人參皂苷Ro 是人參的主要活性成分之一，具有多種藥理、生理活性,在人參中含量較低（約0.4%），無法滿足日益增長的市場(chǎng)需求，而利用微生物從頭合成人參皂苷Ro則可以有效解決該問題，顛覆傳統(tǒng)的獲取方式，然而合成途徑未知，目前尚未有利用微生物從頭合成的報(bào)道。 本發(fā)明技術(shù)方案：1.通過生物信息學(xué)分析，對(duì)現(xiàn)有數(shù)據(jù)庫中的多種植物基因組、轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和比對(duì)，初步篩選候選基因，再結(jié)合前期經(jīng)驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)通過進(jìn)化樹分析、同源建模、分子對(duì)接、保守序列分析等手段，確定最終的候選基因；2.通過酶工程等手段，對(duì)候選基因進(jìn)行重組表達(dá)、體外酶活驗(yàn)證、底物譜驗(yàn)證等，挑選最合適的酶；3.通過合成生物學(xué)、代謝工程、分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)手段，對(duì)相關(guān)酶進(jìn)行質(zhì)粒構(gòu)建、底盤宿主代謝網(wǎng)絡(luò)調(diào)控、異源途徑整合，最終成功構(gòu)建人參皂苷Ro微生物細(xì)胞工廠。 本發(fā)明解決了人參皂苷Ro天然代謝途徑未知、異源途徑與底盤宿主適配性、已報(bào)道相關(guān)酶活性低等關(guān)鍵技術(shù)問題。本發(fā)明達(dá)到的技術(shù)效果為工程化釀酒酵母菌可實(shí)現(xiàn)無需添加異源前體物或底物僅通過培養(yǎng)微生物即可從頭合成高效人參皂苷Ro、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、姜狀三七苷R1等三種齊墩果烷型稀有人參皂苷以及金盞花苷E。 本發(fā)明創(chuàng)新點(diǎn)包括：1.通過基因挖掘手段獲得的關(guān)鍵酶性能遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于已報(bào)道的酶；2.通過基因挖掘手段獲得的多個(gè)關(guān)鍵酶，實(shí)現(xiàn)了人參皂苷Ro的合成途徑構(gòu)建；3.首次實(shí)現(xiàn)了利用微生物從頭合成人參皂苷Ro、竹節(jié)參皂苷Ⅳa、姜狀三七苷R1等三種齊墩果烷型稀有人參皂苷以及金盞花苷E。 齊墩果烷型稀有人參皂苷，由于其豐富且具備一定特殊性的藥理、生理活性，可作為現(xiàn)有人參皂苷市場(chǎng)的強(qiáng)力補(bǔ)充，應(yīng)用前景廣闊。而其天然含量極低，利用微生物對(duì)其進(jìn)行從頭合成可大大降低生產(chǎn)成本與產(chǎn)物分離純化難度，減少有機(jī)試劑用量，不依賴植物種植，周期更短，符合國家綠了環(huán)保、可持續(xù)發(fā)展的硬性要求，微生物綠色制造是當(dāng)前的政策導(dǎo)向也是發(fā)展的必然趨勢(shì)。