一種提高釀酒酵母合成蟲草素的方法、釀酒酵母工程菌
本發(fā)明涉及微生物基因工程技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種提高釀酒酵母合成蟲草素的方法、釀酒酵母工程菌。本發(fā)明通過將來源于蛹蟲草的密碼子優(yōu)化后的2’?羰基?3’?脫氧腺苷還原酶基因和3’?腺苷單磷酸磷酸水解酶基因使用質(zhì)粒進(jìn)行表達(dá),然后將質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至宿主細(xì)胞中得到釀酒酵母工程菌,再將活化后的釀酒酵母工程菌經(jīng)種子培養(yǎng)得到的種子液接種至含有代謝效應(yīng)物的發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)合成蟲草素。本發(fā)明通過在發(fā)酵培養(yǎng)基種添加代謝效應(yīng)物(Cu<supgt;2+</supgt;、Fe<supgt;2+</supgt;、Mg<supgt;2+</supgt;、Zn<supgt;2+</supgt;、檸檬酸、半胱氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、VB<subgt;1</subgt;和茶多酚),并對代謝效應(yīng)物的種類和濃度進(jìn)行優(yōu)化,顯著提高了蟲草素的產(chǎn)量和合成效率。通過使用本發(fā)明獲得的菌株和最優(yōu)效應(yīng)物組合,在發(fā)酵罐中蟲草素的產(chǎn)量達(dá)到2.9g/L。
南京工業(yè)大學(xué)
2021-01-12