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本發(fā)明提供一種人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7突變蛋白，含有Arg198Ile/His200Phe的突變，具有SEQ ID NO.1的氨基酸序列。是從人結(jié)直腸癌細(xì)胞系SW480cDNA文庫(kù)中選出igfbp7基因編碼序列，然后構(gòu)建到原核表達(dá)載體pET28a質(zhì)粒中，使其能夠在大腸桿菌菌株BL21中表達(dá)IGFBP7蛋白。在該表達(dá)載體的基礎(chǔ)之上，構(gòu)建人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7突變蛋，轉(zhuǎn)化BL21后表達(dá)純化突變蛋白，指出IGFBP7與胰島素結(jié)合的關(guān)鍵位點(diǎn)。本發(fā)明提供的突變蛋白，制備方法步驟簡(jiǎn)單可行且成功率較高，該蛋白與胰島素的結(jié)合能力有明顯降低，從而可以抑制胰島素抵抗，可在制備治療2型糖尿病藥物中應(yīng)用。

α-淀粉酶抑制劑是一種純天然生物活性物質(zhì)，屬于糖水解酶抑制劑的一種。 α-淀粉酶抑制劑通過(guò)對(duì)淀粉酶的抑制作用而發(fā)揮減肥效應(yīng)，并經(jīng)胃腸道排出體外，因此不必進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，不作用于大腦中樞，減肥的同時(shí)不抑制食欲，使用劑量很高時(shí)也無(wú)副作用，符合世界衛(wèi)生組織的減肥原則。對(duì)于肥胖患者，可減少糖向脂肪轉(zhuǎn)化，延緩腸道的排空，增加脂肪消耗以減少體重。因此，能用α-淀粉酶抑制劑來(lái)防止和治療肥胖癥、脂肪過(guò)多癥、動(dòng)脈硬化癥、高血脂及糖尿病等。另外，純化的α-淀粉酶抑制肽的另一重要作用是作為糖尿病的輔助治療（中藥一類(lèi)），可以阻礙或延緩其對(duì)食物中主要的碳水化合物淀粉的消化作用，阻止血糖的升高，從而能使糖尿病人吃飽飯，消除饑餓感。本成果利用固液萃取技術(shù)、膜技術(shù)、雙水相萃取技術(shù)和層析技術(shù)等現(xiàn)代生物分離技術(shù)從小麥中分離純化了 -淀粉酶抑制劑（ -淀粉酶抑制劑的活性大于2500U/mg.protein），達(dá)到了日本國(guó)應(yīng)用的要求。新工藝較原工藝相比具有操作方便，收率高，成本低，產(chǎn)品質(zhì)量好，易于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。據(jù)悉，歐美已將 -淀粉酶抑制劑開(kāi)發(fā)成保健食品,如starch blocker。每年的用量在100噸以上，且近年來(lái)每年以30％的速度在遞增。預(yù)計(jì)到2010年我國(guó)將有2億人口加入肥胖者行列，而糖尿病早已成為我國(guó)中老年人的常見(jiàn)病、多發(fā)病，因此將本成果應(yīng)用于治療上述疾病方面是極有市場(chǎng)潛力的。

IL2-Perforin融合毒素是將人IL-2和人穿孔蛋白的基因通過(guò)基因克隆技術(shù)連接后插入大腸桿菌表達(dá)質(zhì)粒并在大腸桿菌中表達(dá)的基因工程產(chǎn)品，經(jīng)體外實(shí)驗(yàn)及初步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)該融合毒素有殺傷IL-2受體陽(yáng)性T細(xì)胞及白血病細(xì)胞的功效，可被用來(lái)治療腎移植，骨髓移植等同種植排斥及某些白血病。該產(chǎn)品較現(xiàn)有的移植免疫抑制藥不同，因其作用具有選擇性，其應(yīng)用不會(huì)引起非特異性全

成果簡(jiǎn)介：本產(chǎn)品是融洗發(fā)、護(hù)發(fā)為一體的新型洗發(fā)香波，不僅有優(yōu)良的去 污性能，還具有調(diào)理、護(hù)發(fā)和抗靜電效果，同時(shí)還能達(dá)到去屑、止癢作用，在洗滌過(guò)程中對(duì)頭發(fā)、頭皮和面部皮膚沒(méi)有刺激作用。另外，洗滌時(shí)豐富的 泡沫、光滑的手感及洗后頭皮的舒適輕爽、頭發(fā)的輕盈、柔順都是其他洗發(fā)產(chǎn)品所難以比擬的。由于本產(chǎn)品的原料成本較低(每公斤 8 元左右)，質(zhì)量又 遠(yuǎn)遠(yuǎn)好于其他同類(lèi)產(chǎn)品，因而具有很強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)能力。

本熒光標(biāo)記瘤胃細(xì)菌技術(shù)操作簡(jiǎn)便、成本低、適于實(shí)驗(yàn)室測(cè)定瘤胃原蟲(chóng)吞噬速率所用，該方法的使用將有助于打開(kāi)瘤胃內(nèi)微生物循環(huán)的“黑箱”， 促進(jìn)瘤胃微生態(tài)及宿主 AA營(yíng)養(yǎng)的研究。

涉及一種血管活性腸肽的融合蛋白，所述融合蛋白包含 1 個(gè)人血 清白蛋白(Albumin Human，HSA)和 1 個(gè)血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide，VIP),該融合蛋白所具有的獨(dú)特的氨基酸序列可以 保證其在宿主體內(nèi)高水平穩(wěn)定表達(dá)，在保留 VIP 原有功能的同時(shí)，體 內(nèi)半衰期顯著延長(zhǎng)。本發(fā)明同時(shí)提供該融合蛋白的制備方法及其在制 備抗炎、抗損傷、腦血管疾病、提高睡眠質(zhì)量的藥物中的應(yīng)用。

一、項(xiàng)目分類(lèi) 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、成果簡(jiǎn)介 蛋白質(zhì)類(lèi)材料具有良好的生物相容性和優(yōu)異的生物活性，在醫(yī)用材料領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。多種材料已在臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了其優(yōu)異的生物活性?，F(xiàn)有蛋白材料多從天然生物來(lái)源中提取，理化性質(zhì)不穩(wěn)定，材料性質(zhì)難以理性設(shè)計(jì)。本技術(shù)利用合成生物學(xué)技術(shù)和化學(xué)修飾技術(shù)，建立了從分子結(jié)構(gòu)到材料性質(zhì)均能理性設(shè)計(jì)的蛋白材料研發(fā)平臺(tái)，發(fā)展了多種具有智能響應(yīng)性和獨(dú)特理化性質(zhì)的生物醫(yī)用蛋白材料，包括具有非天然催化活性的酶制劑、能夠用于傷口修復(fù)和藥物緩釋的可注射蛋白凝膠、多功能靶向抗腫瘤蛋白納米藥物、3D打印蛋白植入材料等。

本品治療骨質(zhì)疏松的療效比國(guó)內(nèi)外的鈣制劑，活性VD及降鈣素藥物在提高骨密度（BMD）與骨礦含量（BMC）上占優(yōu)勢(shì)，可補(bǔ)充因年齡增長(zhǎng)而喪失的骨基質(zhì)的有機(jī)成分，恢復(fù)有機(jī)成分與無(wú)機(jī)成分二者的平衡，促進(jìn)骨膠原纖維與羥基磷灰石的結(jié)合，使骨堅(jiān)硬而富有彈性，增加或維持骨量，因而減少骨折的發(fā)生，緩解骨質(zhì)疏松而引起的骨痛，總有效率達(dá)90%。緩解因缺鈣而造成的小腿肌肉痙攣，總有效率達(dá)92%。

淀粉類(lèi)食品的改良的發(fā)明很多，目前市售的淀粉類(lèi)食品改良劑一般采用無(wú)機(jī)鹽類(lèi)與表面活性劑進(jìn)行復(fù)配，例如明礬，碳酸鹽，亞硫酸鹽，乳化劑，蛋白粉等。這些該良劑它們對(duì)淀粉類(lèi)食品，如拉面、面包等進(jìn)行改良，可增加韌性，調(diào)節(jié)硬度和口感。但無(wú)機(jī)鹽類(lèi)食品添加劑會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的毒性，長(zhǎng)期食用會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生不良的影響。針對(duì)上述的傳統(tǒng)淀粉類(lèi)食品添加劑對(duì)人體長(zhǎng)期產(chǎn)生的不良影響，開(kāi)發(fā)出一種天然無(wú)害且品質(zhì)好的改良劑是一個(gè)亟待解決的問(wèn)題。 作為淀粉類(lèi)食品的添加劑需具備以下條件：性能穩(wěn)定，對(duì)人體無(wú)毒副作用，溫和無(wú)刺激性，具有營(yíng)養(yǎng)性，口感清香，能夠與淀粉長(zhǎng)鏈分子發(fā)生作用，對(duì)淀粉類(lèi)食品加工過(guò)程中的流變性能以及面團(tuán)的韌性，硬度，保水性，表面光潔度等性能有很好的改善。制備方法簡(jiǎn)單，耗能少，成本低，在干燥狀態(tài)下穩(wěn)定性好。 本項(xiàng)目包括天然小麥蛋白的復(fù)合改性方法及在淀粉類(lèi)食品中的應(yīng)用范圍。關(guān)鍵技術(shù)已申請(qǐng)一項(xiàng)國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利（200710009677。1，CN 101138384A）。 二、技術(shù)成熟度 制備出的復(fù)合改性小麥蛋白的乳化性、膨潤(rùn)性明顯提高，與淀粉長(zhǎng)鏈分子作用形成三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，改善了淀粉類(lèi)食品的內(nèi)部質(zhì)構(gòu)，增強(qiáng)了淀粉類(lèi)食品的韌性，去酰胺的得到的部分小分子物質(zhì)具有優(yōu)越的乳化性能，可以替代食品的乳化劑。本產(chǎn)品作為淀粉類(lèi)食品添加劑的替代物，是一種天然的無(wú)公害、環(huán)境友好產(chǎn)品，具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。 三、投產(chǎn)條件和預(yù)期經(jīng)濟(jì)效益 效益分析：小麥蛋白1000元/噸，投資總額100萬(wàn)元，生產(chǎn)能力2000噸/年、 年產(chǎn)值2000萬(wàn)元。

本成果所述融合蛋白包含1個(gè)人血清白蛋白（Albumin Human，HSA)和1個(gè)血管活性腸肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）,該融合蛋白所具有的獨(dú)特的氨基酸序列可以保證其在宿主體內(nèi)高水平穩(wěn)定表達(dá)，在保留VIP原有功能的同時(shí)，體內(nèi)半衰期顯著延長(zhǎng)。