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本發(fā)明公開(kāi)了一種無(wú)酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器及其檢測(cè)方法，該無(wú)酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器包括由參比電極、對(duì)電極和工作電極組成的三電極體系，所述工作電極由對(duì)葡萄糖具有電催化氧化性能的材料制成；使用該無(wú)酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器檢測(cè)葡萄糖的方法，包括如下步驟：(1)電化學(xué)預(yù)處理工作電極：施加高負(fù)電位；(2)電化學(xué)氧化葡萄糖：施加葡萄糖氧化所需電位；(3)電化學(xué)清洗工作電極：施加正電位。本發(fā)明可去除樣品pH對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，使原本需要在堿性條件下進(jìn)行無(wú)酶的葡萄糖檢測(cè)，可在中性及酸性樣品中的進(jìn)行，并且具有電極穩(wěn)定性好、靈敏度高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，具有非常廣闊的應(yīng)用前景。

低聚異麥芽糖作為一種健康糖源和功能性食品添加劑廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和飼料添加劑行業(yè)中。在低聚異麥芽糖的制備過(guò)程中，α-葡萄糖苷酶的轉(zhuǎn)糖苷作用是關(guān)鍵步驟。目前國(guó)內(nèi)用于低聚異麥芽糖生產(chǎn)的α-葡萄糖苷酶大多為進(jìn)口品。本項(xiàng)目獲得的?-葡萄糖苷酶生產(chǎn)菌株發(fā)酵液酶活達(dá)到 11 U/mL，為國(guó)內(nèi)外現(xiàn) 有報(bào)道中的最高水平，發(fā)酵工藝簡(jiǎn)單易控。重組菌發(fā)酵液經(jīng)過(guò)濾除菌并濃縮后可以直接作為酶液進(jìn)行轉(zhuǎn)化。酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)低聚異麥芽糖轉(zhuǎn)化率與進(jìn)口酶相似，可以替代進(jìn)口品。 

隨著環(huán)境保護(hù)和可持續(xù)發(fā)展的呼聲日益高漲， 以天然可再生資源開(kāi)發(fā)生產(chǎn)綠色環(huán)保、性能優(yōu)良的表面活性劑 已成為當(dāng)代潮流。我國(guó)淀粉資源豐富，利用淀粉水解物——葡 萄糖為原料，開(kāi)發(fā)環(huán)保高效的表面活性劑具有很高的應(yīng)用價(jià)值。 本項(xiàng)目在前期研究基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)一類新型的基于葡萄糖的 酯基季銨鹽陽(yáng)離子表面活性劑，可應(yīng)用于日用化工、農(nóng)用化學(xué) 品、織物柔軟劑、皮革化工、造紙、礦物浮選、油田、涂料和 黏合劑等多個(gè)領(lǐng)域。

該成果 2013 年獲全國(guó)商業(yè)科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)。主要?jiǎng)?chuàng)新成果有： 1. 應(yīng)用葡萄酒風(fēng)味物質(zhì)變化規(guī)律生產(chǎn)特色新產(chǎn)品工藝優(yōu)化體系。 2. 營(yíng)養(yǎng)保健葡萄酒生產(chǎn)工藝優(yōu)化以及關(guān)鍵技術(shù)。 3. 酒泥酵母甘露糖蛋白提取應(yīng)用技術(shù)與高檔特色葡萄酒生產(chǎn)工藝集成開(kāi)發(fā)。4. 建立了新工藝產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用及技術(shù)轉(zhuǎn)移新模式。

本發(fā)明提供了如式I所示的氨基葡萄糖衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽：其中，X、Y、Z三個(gè)基團(tuán)中的相鄰兩個(gè)選自不同的雜原子，余下一個(gè)為C；R1、R2分別獨(dú)立選自H、C1～C4烷基、苯基或取代苯基；所述取代苯基的取代基選自鹵素；R3為無(wú)；或者，R2、R3與其相連的原子共同組成五元或六元芳香環(huán)或芳雜環(huán)。本發(fā)明還提供給了所述氨基葡萄糖衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽的用途。本發(fā)明提供的氨基葡萄糖衍生物，能夠有效抑制軟骨細(xì)胞中糖胺聚糖(GAG)釋放量，其生物活性甚至超過(guò)了目前臨床一線用藥氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖，為保護(hù)軟骨細(xì)胞和治療骨關(guān)節(jié)炎提供了新的用藥選擇。

該研究報(bào)道了一個(gè)SEP亞家族的VvMADS39基因，結(jié)合功能研究及其參與的網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)機(jī)制，證實(shí)VvMADS39對(duì)葡萄花分生組織的維持及在胚珠發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮重要作用。

本發(fā)明公開(kāi)了一種基于多傳感器技術(shù)的葡萄水分脅迫診斷方法及系統(tǒng)，方法包括以下步驟：（1）采集建模葡萄樣本的冠層覆蓋率值、冠層溫度特征值和冠層光合有效輻射值；（2）以冠層覆蓋率值、冠層溫度特征值和冠層光合有效輻射值為輸入變量，冠層水分脅迫等級(jí)為輸出變量建立檢測(cè)模型；（3）按照步驟（1）的方法采集待測(cè)葡萄樣本的冠層覆蓋率值、冠層溫度特征值和冠層光合有效輻射值，代入檢測(cè)模型計(jì)算出待測(cè)葡萄樣本的冠層水分脅迫等級(jí)。本發(fā)明通過(guò)引入多光譜成像技術(shù)、熱紅外成像技術(shù)以及多信息的數(shù)據(jù)融合技術(shù)，可實(shí)現(xiàn)葡萄水分脅迫程度的早期、快速、實(shí)時(shí)檢測(cè)，提高檢測(cè)精度。

1、成果來(lái)源、成果被評(píng)價(jià)及認(rèn)定（發(fā)明專利授權(quán)號(hào)）等情況 本項(xiàng)目來(lái)源于國(guó)家“十二五”科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目“大宗糧食綠色加工技術(shù)與 產(chǎn)品”中課題“玉米淀粉加工關(guān)鍵技術(shù)研究與示范（2012BAD34B07，479 萬(wàn)元， 研究起止時(shí)間：2012.01-2014.12）”和國(guó)家自然科學(xué)基金“酶法選擇性合成單一 類型環(huán)糊精的控制策略研究（31101228，25 萬(wàn)元，研究起止時(shí)間：2012.01- 2014.12）”，屬于農(nóng)產(chǎn)品深加工科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本項(xiàng)目累計(jì)申請(qǐng)發(fā)明專利 7 項(xiàng)（1 項(xiàng)獲授權(quán)），發(fā)表論文 11 篇（8 篇被 SCI 收錄），于 2015 年 7 月通過(guò)中國(guó)糧油學(xué) 會(huì)鑒定，獲國(guó)際先進(jìn)評(píng)價(jià)。 2、主要技術(shù)內(nèi)容、作用、對(duì)行業(yè)的意義，獲獎(jiǎng)情況 CGT 酶生產(chǎn)環(huán)糊精最不利的條件之一是產(chǎn)物特異性差，給產(chǎn)物的分離純化 帶來(lái)很大不便。同時(shí)，CGT 酶存在的另一大缺陷是其熱穩(wěn)定性較差，由于在環(huán)糊 精工業(yè)化生產(chǎn)中，底物淀粉首先要經(jīng)過(guò)高溫糊化、液化處理，然后降溫至適當(dāng)溫 度進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)，若 CGT 酶能夠適應(yīng)更高的反應(yīng)溫度，勢(shì)必有助于提高反應(yīng)效率， 因此，有必要改善 CGT 酶的熱穩(wěn)定性，提高其催化效率，進(jìn)而有效降低環(huán)糊精生20 產(chǎn)成本。本項(xiàng)目主要是通過(guò)改善 CGT 酶產(chǎn)物特異性和熱穩(wěn)定性，提高該酶的使用 性能，將其應(yīng)用于環(huán)糊精的工業(yè)化生產(chǎn)中，能顯著降低環(huán)糊精的生產(chǎn)成本，促進(jìn) 環(huán)糊精在各個(gè)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。因此，隨著環(huán)糊精在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域中的應(yīng)用 越來(lái)越廣闊，開(kāi)發(fā)改善 CGT 酶使用性能的關(guān)鍵技術(shù)顯得尤為重要，具有很好的推 廣應(yīng)用前景。 3、成果的技術(shù)指標(biāo)、創(chuàng)新性與先進(jìn)性 本項(xiàng)目在長(zhǎng)期從事淀粉生物轉(zhuǎn)化研究的基礎(chǔ)上，針對(duì)環(huán)糊精工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程 中 CGT 酶的產(chǎn)物特異性和熱穩(wěn)定性較差問(wèn)題，通過(guò)深入研究和不懈努力，逐步改 善了 CGT 酶的產(chǎn)物特異性和熱穩(wěn)定性，突破了關(guān)鍵技術(shù)，并實(shí)現(xiàn)了具有理想產(chǎn)物 特異性和熱穩(wěn)定性的β-CGT 酶突變體在酶法生產(chǎn)β-環(huán)糊精中的應(yīng)用。該酶使用 性能改善易操作，具有很好的應(yīng)用價(jià)值，技術(shù)位于國(guó)際領(lǐng)先水平。與國(guó)內(nèi)外同類 技術(shù)相比，具有以下創(chuàng)新： ①針對(duì) CGT 酶產(chǎn)物特異性較差的問(wèn)題，確定了 CGT 酶的產(chǎn)物特異性與其一級(jí) 結(jié)構(gòu)的相關(guān)性，獲得構(gòu)建具有理想產(chǎn)物特異性的 CGT 酶突變體的簡(jiǎn)單可行方法， 為從本質(zhì)上改善 CGT 酶的產(chǎn)物特異性提供理論基礎(chǔ)； ②針對(duì) CGT 酶熱穩(wěn)定性較差的問(wèn)題，采用定點(diǎn)突變技術(shù)闡明了重要氨基酸殘 基對(duì) CGT 酶熱穩(wěn)定性產(chǎn)生影響的規(guī)律，獲得了構(gòu)建具有理想熱穩(wěn)定性的 CGT 酶突 變體的簡(jiǎn)單可行方法，為從根本上改善 CGT 酶的熱穩(wěn)定性打下了基礎(chǔ)； ③ CGT 酶使用性能的改善方法簡(jiǎn)單易行，所得到具有理想產(chǎn)物特異性和熱 穩(wěn)定性的酶突變體可直接應(yīng)用于β-環(huán)糊精的工業(yè)化生產(chǎn)，能提高β-環(huán)糊精的得 率，降低β-環(huán)糊精的生產(chǎn)成本。 

環(huán)糊精在食品、香料、醫(yī)藥、農(nóng)藥、化工等行業(yè)有著廣泛的應(yīng)用。本項(xiàng)目通過(guò)基因工程技術(shù)構(gòu)建了高效表達(dá)?-CGT 酶工程菌，通過(guò)發(fā)酵優(yōu)化，發(fā)酵液酶活達(dá)到 100 U/ml (以?-環(huán)糊精的生成速率計(jì))以上，70400 U/ml (以水解活性計(jì))，具有發(fā)酵周期短，工藝簡(jiǎn)單易控等特點(diǎn)。發(fā)酵結(jié)束后發(fā)酵液過(guò)濾除菌可以直接作 為酶液進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)。此外，通過(guò)蛋白質(zhì)工程技術(shù)改造了酶的產(chǎn)物特異性，當(dāng)以15%淀粉為底物時(shí)，環(huán)糊精總轉(zhuǎn)化率達(dá)到 55%以上，其中α-環(huán)糊精含量達(dá)到 85％以上

一、成果簡(jiǎn)介 蘋果皮渣和葡萄籽是蘋果和葡萄加工產(chǎn)品開(kāi)發(fā)后的副產(chǎn)物，富含高品質(zhì)的功能性油脂和多酚，如籽油含量達(dá)到 22-28%，其中功能性多不飽和脂肪酸(以油酸和亞油酸為主)達(dá)到了70-80%。近年來(lái)的一系列科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，蘋果和葡萄籽油具有重要的功能特性，如降低血清 膽固醇、降血壓、抑制血栓形成、預(yù)防動(dòng)脈硬化、冠心病等。