微生物發(fā)酵生產(chǎn)低聚果糖
南開(kāi)大學(xué)環(huán)境微生物與微生物制造研究室從發(fā)酵食品中分離得到一株解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens LL3),它能夠利用蔗糖合成低聚果糖。
一、項(xiàng)目分類
關(guān)鍵核心技術(shù)突破
二、成果簡(jiǎn)介
南開(kāi)大學(xué)環(huán)境微生物與微生物制造研究室從發(fā)酵食品中分離得到一株解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens LL3),它能夠利用蔗糖合成低聚果糖。為了提高低聚果糖的產(chǎn)量和純度,項(xiàng)目組采用溫敏質(zhì)粒結(jié)合反向篩選標(biāo)記——無(wú)痕基因敲除法對(duì)菌株的其他胞外產(chǎn)物和六個(gè)胞外蛋白基因以及3個(gè)細(xì)菌胞外多糖基因(簇)進(jìn)行了敲除;5L罐分批發(fā)酵低聚果糖的產(chǎn)量(42 h)達(dá)到43.34g/L。為了進(jìn)一步提高蔗糖酶的分泌表達(dá),項(xiàng)目組整合強(qiáng)啟動(dòng)子和信號(hào)肽對(duì)菌種進(jìn)行改造,在5L發(fā)酵罐采用補(bǔ)料分批發(fā)酵工藝,菌株低聚果糖產(chǎn)量達(dá)101.7 g/L。分子量約5000Dal,純度95%以上。
項(xiàng)目?jī)?yōu)勢(shì):
(1)低聚果糖產(chǎn)品產(chǎn)量高:101.7g/L;產(chǎn)品純度高:95%以上;
(2)解淀粉芽孢桿菌屬農(nóng)業(yè)部規(guī)定可使用的微生物菌種;
(3)所構(gòu)建的重組菌株是采用無(wú)痕敲除法從解淀粉芽孢桿菌而來(lái),菌株不含抗性基因,具有安全性;
(4)采用國(guó)內(nèi)發(fā)酵企業(yè)通用的發(fā)酵設(shè)備即可實(shí)施生產(chǎn)。
南開(kāi)大學(xué)
2022-08-11