一種殺鞘翅目害蟲(chóng)的蘇云金芽孢桿菌工程菌及制備方法和應(yīng)用
本發(fā)明公開(kāi)了一種殺鞘翅目害蟲(chóng)的蘇云金芽孢桿菌工程菌及制備方法和應(yīng)用,CCTCC M2013259。其步驟:A、從殺鞘翅目害蟲(chóng)的Bt菌株YC-03中克隆殺蟲(chóng)晶體蛋白基因cry3Aa8,將該基因插入解離載體pHT304/res中,獲得重組質(zhì)粒pHT3Aa8/res,將pHT3Aa8/res的DNA電轉(zhuǎn)Bt無(wú)晶體突變株BMB171,篩選獲得轉(zhuǎn)化子,將輔助質(zhì)粒pBMB1200轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)化子中,挑取在Amp/Erm平板上不生長(zhǎng)在LB平板上生長(zhǎng)的陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子,在LB液體培養(yǎng)基中傳代,挑取在LB平板上生長(zhǎng)在四環(huán)素平板上不生長(zhǎng)的單菌落;B、以柳藍(lán)葉甲和猿葉蟲(chóng)幼蟲(chóng)為試蟲(chóng),進(jìn)行毒力生測(cè),比較毒力致死中量LC50,篩選到高毒力工程菌菌株Ace-38。方法易行,操作簡(jiǎn)便,對(duì)鞘翅目的柳蘭葉甲、馬鈴薯甲蟲(chóng)、蔬菜猿葉蟲(chóng)、黃守瓜等多種害蟲(chóng)具有高效毒殺作用,該菌發(fā)酵性能優(yōu)良,具有開(kāi)發(fā)、應(yīng)用前景。
中國(guó)科學(xué)院大學(xué)
2021-01-12