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7月4日，著名期刊《SignalTransductionandTargetedTherapy》（IF:38.104）在線發(fā)表我校基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床藥學(xué)學(xué)院疫苗中心林昂、唐昕瑩團(tuán)隊(duì)在新冠疫苗領(lǐng)域的最新研究成果“UnravellingtheenhancedvaccineimmunitybyheterologousKCONVAC/Ad5-nCoVCOVID-19vaccination”。

研發(fā)階段/n該項(xiàng)目屬于動(dòng)物基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種H5N1亞型禽流感病毒與鴨腸炎病毒活載體疫苗。該疫苗株rDEV-HA5保藏在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCC?NO：V201404。本發(fā)明的構(gòu)建方法是：在鴨腸炎病毒人工染色體質(zhì)粒pBAC-C-KCE中插入了H5N1亞型禽流感病毒ha基因的片段得到重組質(zhì)粒pBAC-C-KCE-HA5。所述的質(zhì)粒pBAC-C-KCE的基因結(jié)構(gòu)組成如圖7所示；所述質(zhì)粒pBAC-C-KCE-HA5的基因結(jié)構(gòu)組成如圖14所示。生物學(xué)功能驗(yàn)證表明，本發(fā)明的疫苗有

本發(fā)明涉及一種具有安神補(bǔ)腦和提高免疫力作用的保健品。由猴頭菌粉、蝙蜉蛾擬青霉菌粉、蜜環(huán)菌粉、香菇菌粉、人參粉、安絡(luò)小皮傘菌粉以及枸杞、紅棗、甘草、生姜、茯苓等構(gòu)成，具有安神補(bǔ)腦、提高免疫力等功效，并且安全無(wú)副作用，適合長(zhǎng)期食用。?本發(fā)明旨在提供一種不僅具有明顯的安神補(bǔ)腦的功效還可以明顯提高人體免疫力的保健品制劑，該制劑以多種保健真菌為原料，給藥方便、療效穩(wěn)定、毒副作用小、可長(zhǎng)期食用。投資主要用于產(chǎn)品原材料的制備、加工費(fèi)用和產(chǎn)品包裝和市場(chǎng)開(kāi)發(fā)，預(yù)期效果較好。

本發(fā)明涉及一種具有安神補(bǔ)腦和提高免疫力作用的保健品。由猴頭菌粉、蝙蜉蛾擬青霉菌粉、蜜環(huán)菌粉、香菇菌粉、人參粉、安絡(luò)小皮傘菌粉以及枸杞、紅棗、甘草、生姜、茯苓等構(gòu)成，具有安神補(bǔ)腦、提高免疫力等功效，并且安全無(wú)副作用，適合長(zhǎng)期食用。

1 成果簡(jiǎn)介本項(xiàng)成果針對(duì)目前全球共同關(guān)心的腫瘤、傳染病、內(nèi)分泌等重大疾病快速檢測(cè)問(wèn)題，建立相關(guān)疾病診斷所需的高靈敏度化學(xué)發(fā)光免疫分析新方法，研制了一系列可用于臨床分析的化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒。 所建立的方法操作簡(jiǎn)單，線性范圍寬，成本低，可以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的樣品調(diào)查和篩選。本項(xiàng)成果包括基于磁顆粒的多種標(biāo)志物的快速聯(lián)合檢測(cè)技術(shù)，研制高通量、 快速臨床診斷試劑盒和全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的關(guān)鍵裝置。可以實(shí)現(xiàn)腫瘤、傳染病、內(nèi)分泌等系列化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑的產(chǎn)業(yè)化。研究成果已部分應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)。2 應(yīng)用說(shuō)明微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析（ MMCLEIA）方法。以磁性微粒子為載體，采用磁性微粒子表面包被技術(shù)和免疫反應(yīng)的特點(diǎn)，以磁性酶免疫測(cè)量分析為模型，建立了微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法。能夠較好地應(yīng)用于血清以及尿液中不同生物標(biāo)記物成分的分析。 用改良的戊二醛交聯(lián)法完成堿性磷酸酶（ ALP） 對(duì)抗體的標(biāo)記，所得酶結(jié)合物保持了單克隆抗體的免疫反應(yīng)性和酶的催化活性。 采用 4-甲氧基-4-（ 3"-磷酰氧基苯） -螺旋-（ 1， 2-二氧雜環(huán)丁烷-3， 2'-金剛烷（ AMPPD） -堿性磷酸酶（ ALP） 化學(xué)發(fā)光體系，并以異硫氰酸熒光素（ FITC） 和 ALP 分別標(biāo)記疾病標(biāo)記物的單克隆抗體。在溶液中形成 FITC 標(biāo)記抗體-抗原-ALP 標(biāo)記抗體的免疫夾心復(fù)合物后，引入偶聯(lián) FITC 抗體的微米級(jí)磁性微粒子作為反應(yīng)體系的分散固相，并最終形成雙夾心免疫復(fù)合物。在反復(fù)施加磁場(chǎng)的作用下，通過(guò)洗滌將沒(méi)有結(jié)合的游離蛋白與免疫復(fù)合物分離，實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)抗原的測(cè)定。 這一技術(shù)可以應(yīng)用于腫瘤標(biāo)記物的檢測(cè)。3 效益分析化學(xué)發(fā)光免疫分析由于其高靈敏度、快速、高通量等特點(diǎn)，可以應(yīng)用于生物樣品的快速檢測(cè)，在臨床檢測(cè)、環(huán)境分析以及食品安全分析等領(lǐng)域一直受到人們的重視。本研究成果及專(zhuān)利技術(shù)均從實(shí)際需要出發(fā)，不需要繁雜的樣品前處理，就可以更方便地檢測(cè)出人體或者環(huán)境生物樣品中相關(guān)物質(zhì)的含量，這種技術(shù)可以用于日常生產(chǎn)和生活中，對(duì)人類(lèi)和動(dòng)物的身體健康、維持全球生態(tài)平衡等方面具有很大的意義。微板式磁性微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析新技術(shù)的開(kāi)發(fā)不僅為腫瘤、傳染病等重大疾病診斷與預(yù)防提供強(qiáng)有力的檢測(cè)工具，對(duì)于發(fā)展其他疾病診斷技術(shù)和環(huán)境雌激素類(lèi)化合物的檢測(cè)也將起到重要作用。因此化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)的發(fā)展拓寬了免疫分析的應(yīng)用領(lǐng)域，具有廣闊的市場(chǎng)前景和非常可觀的經(jīng)濟(jì)效益。4 合作方式技術(shù)轉(zhuǎn)讓或合作開(kāi)發(fā)， 商談。5 所屬行業(yè)領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生。

了肝臟特異性的小分子非編碼核糖核酸microRNA-122在肝細(xì)胞抗病毒天然免疫中的重要作用，并揭示microRNA-122通過(guò)抑制RTK/STAT3信號(hào)通路賦予肝細(xì)胞強(qiáng)有力天然免疫功能的核心機(jī)制。 在肝癌細(xì)胞HepG2中導(dǎo)入microRNA-122可以極其顯著地增強(qiáng)細(xì)胞應(yīng)對(duì)各種病毒核酸（包括HCV和HBV）的天然免疫反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)microRNA-122可以直接靶向多種受體酪氨酸激酶（RTK），從而降低了HepG2細(xì)胞中STAT3的酪氨酸磷酸化水平。更有趣的是，他們發(fā)現(xiàn)STAT3可以直接抑制干擾素調(diào)節(jié)因子IRF1的表達(dá)，STAT3酸磷酸化水平的下調(diào)解除了STAT3對(duì)干擾素轉(zhuǎn)錄激活的抑制，從而使得干擾素信號(hào)通路在病原體入侵時(shí)能迅猛激活。該研究揭示了在肝細(xì)胞中miR-122–RTKs/STAT3–IRF1–IFNs通路調(diào)控干擾素表達(dá)的重要途徑，闡明了微RNA對(duì)肝細(xì)胞等非免疫細(xì)胞天然免疫能力調(diào)控的新機(jī)制。       成熟肝細(xì)胞中microRNA-122表達(dá)量極其豐富，因此在遇到病毒侵害時(shí)可迅速啟動(dòng)天然免疫應(yīng)答，這種強(qiáng)健的天然免疫能力對(duì)于肝細(xì)胞是必不可少的，一旦肝細(xì)胞中microRNA-122含量不足（比如，病毒感染引起的炎癥可導(dǎo)致microRNA-122表達(dá)下調(diào)），就會(huì)導(dǎo)致肝細(xì)胞天然免疫能力大幅下降，更容易被病毒入侵。以上這些發(fā)現(xiàn)對(duì)于病毒慢性感染引起的肝臟疾病，特別是癌癥的治療具有重要指導(dǎo)意義。

利用現(xiàn)代分子生物學(xué)方法對(duì)傳統(tǒng)抗血清制備技術(shù)進(jìn)行改造，突破 了過(guò)去抗血清生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)為主造成的不確定性和不系統(tǒng)性，提高了抗血 清制備的技術(shù)含量和生產(chǎn)效率。有效去除抗血清中的非特異性抗體， 從而實(shí)現(xiàn)抗體制備的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)模化生產(chǎn)，同時(shí)也降低了生產(chǎn)成本。 免疫磁珠分離技術(shù)的最突出的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，可以明顯提高檢 測(cè)的靈敏性，縮短病原體的檢測(cè)時(shí)間一至數(shù)天，并且可從復(fù)雜的樣品 中直接分離病原體，降低標(biāo)本中抑制物的干擾，提高靈敏度。 已生產(chǎn)出 3 種診斷血清產(chǎn)品，包括“致病性大腸桿菌 O 抗原診 斷血清試劑盒”、“大腸桿菌 H 抗原全套診斷血清試劑盒”和“志賀氏菌 O 抗原全套診斷血清試劑盒”，共計(jì) 147 種高特異性抗體。 經(jīng)中 國(guó) CDC 使用證實(shí)，該血清具有反應(yīng)速度快、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，與日 本生研同類(lèi)血清質(zhì)量相當(dāng)，遠(yuǎn)優(yōu)于國(guó)內(nèi)同類(lèi)產(chǎn)品。 繼續(xù)在市場(chǎng)調(diào)研的基礎(chǔ)上，再進(jìn)行 11 種改類(lèi)試劑盒的研發(fā)和生 產(chǎn)，填補(bǔ)國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)空白。 本項(xiàng)目完成后，實(shí)施單位將可生產(chǎn) 12 種診斷血清試劑盒（包括 前期已完成開(kāi)發(fā)的 3 種），按每個(gè)疾控中心每年需求每種試劑盒一套 計(jì)算，總需求量約 1200 套。此外，進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫單位對(duì)某些種類(lèi) 的血清亦有一定需求，約為 300 套。按每套試劑盒平均 1 萬(wàn)元的售價(jià) 計(jì)算，每年的市場(chǎng)可達(dá) 1500 萬(wàn)元。 免疫磁珠分離試劑盒可廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)，食品檢驗(yàn)，水質(zhì)／ 環(huán)境檢驗(yàn)，獸藥檢驗(yàn)等，市場(chǎng)非常之大，現(xiàn)主要的生產(chǎn)商為國(guó)外的 Dynal 和 Matrix 公司，以 Dynal 公司為例，其每年可創(chuàng)造數(shù)十億美元 的銷(xiāo)售額。由于依賴進(jìn)口，國(guó)內(nèi)多家疾病預(yù)防控制和出入境檢驗(yàn)檢疫 單位已經(jīng)向項(xiàng)目實(shí)施單位提出了產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)意向。該產(chǎn)品研發(fā)成本約 為每毫升 600 元，銷(xiāo)售價(jià)格在每毫升 2000 元左右，顯示了良好的市 場(chǎng)前景。

已有樣品/n目前在臨床上，兩種PD-1單抗的使用劑量為2-3mg/kg，每2-3周靜脈輸入，歷時(shí)30-60分鐘。使用劑量大且頻繁。同時(shí)，單克隆抗體的制備、純化過(guò)程繁瑣，要求嚴(yán)格，導(dǎo)致單抗的價(jià)格昂貴，使受益于該單抗的病人在接受治療時(shí)受到極大限制。由于腺病毒制備、純化簡(jiǎn)單、產(chǎn)量高、安全性好、外源表達(dá)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，因此我們研發(fā)的腺病毒表達(dá)PD-1單抗制備簡(jiǎn)單、成本低、療效好、使用方便，可充分滿足臨床病人的需求。我們研發(fā)的重組腺病毒載體表達(dá)PD-1單抗為臨床相關(guān)腫瘤的治療與研究提供了一種有效的新手段，并具有

該成果 2011 年、 2013 年先后獲連云港市科學(xué)技術(shù)進(jìn)步二等獎(jiǎng)、一等獎(jiǎng)。項(xiàng)目實(shí)施的核心技術(shù)為水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物細(xì)菌病診斷技術(shù)與免疫技術(shù)，形成了較為完善的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物疾病診斷和防控的技術(shù)體系。 包括（1） 環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（LAMP），（2） 黃芪佐劑水劑型滅活疫苗及卵黃抗體疫苗。

利用現(xiàn)代分子生物學(xué)方法對(duì)傳統(tǒng)抗血清制備技術(shù)進(jìn)行改造，突破了過(guò)去抗血清生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)為主造成的不確定性和不系統(tǒng)性，提高了抗血清制備的技術(shù)含量和生產(chǎn)效率。有效去除抗血清中的非特異性抗體，從而實(shí)現(xiàn)抗體制備的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)模化生產(chǎn)，同時(shí)也降低了生產(chǎn)成本。 免疫磁珠分離技術(shù)的最突出的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)，可以明顯提高檢測(cè)的靈敏性，縮短病原體的檢測(cè)時(shí)間一至數(shù)天，并且可從復(fù)雜的樣品中直接分離病原體，降低標(biāo)本中抑制物的干擾，提高靈敏度。 已生產(chǎn)出3種診斷血清產(chǎn)品，包括“致病性大腸桿菌O抗原診斷血清試劑