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一種制備甲殼素脫乙酰酶的方法
研發(fā)階段/n本發(fā)明涉及一種制備甲殼素脫乙酰酶的方法，該方法用短柄梨孢帚霉（Scopulariopsisbrevicaulis）作甲殼素脫乙酰酶產(chǎn)生菌，經(jīng)活化后將其接入到含有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵容器中，使其在pH值為6.5-7.0之間，溫度在27-29oC、轉(zhuǎn)速200-240rpm的搖床上發(fā)酵90-100小時，發(fā)酵液經(jīng)分離、鹽析、純化得甲殼素脫乙酰酶產(chǎn)品。利用本發(fā)明的方法制備的甲殼素脫乙酰酶每ml發(fā)酵液的活力單位最高可達36U。
湖北工業(yè)大學(xué)
2021-01-12
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固定化重組頭孢菌素脫乙酰酶生產(chǎn)
本項目利用重組大腸桿菌異源表達來自枯草芽孢桿菌中的CAH基因，發(fā)酵生產(chǎn)頭孢菌素脫乙酰酶蛋白。由于重組蛋白表達量高，采用簡單的硫酸銨分級沉淀方法即可達到很好的純化效果，極大程度地縮減了蛋白純化的成本。在工業(yè)應(yīng)用中，將游離酶固定在載體上可以實現(xiàn)多次重復(fù)利用，產(chǎn)物分離容易，可以連續(xù)操作。在眾多固定化酶方法中，由于制備的固定化酶穩(wěn)定性好，共價結(jié)合的方法在工業(yè)中最為常用。本項目采用共價結(jié)合的固定化方法，在溫和條件下將游離酶連接在親水性環(huán)氧基載體上，得到的固定化酶活力回收高，穩(wěn)定性好，重復(fù)使用次數(shù)高。已完成整條工藝流程。重組大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)CAH蛋白進入中試階段，通過優(yōu)化培養(yǎng)條件，發(fā)酵培養(yǎng)基等工作，降低生產(chǎn)成本，提高產(chǎn)酶量。目前完成的蛋白純化及固定化酶制備工藝，對產(chǎn)品的性能已通過相關(guān)的實驗得到很好的評價結(jié)果。在不斷完善發(fā)酵和固定化酶制備工藝后，即可以進一步擴大生產(chǎn)試驗規(guī)模，從而應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)。
華東理工大學(xué)
2021-04-13
組蛋白去乙酰化酶抑制劑新藥研發(fā)
傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物，如烷化劑、鉑類試劑、作用于核酸合成的藥物、作用于微管蛋白合成 的藥物等，一般存在毒性較大、選擇性較低等問題，因此，研究尋找安全有效、選擇性較好的 靶向性抗腫瘤藥物具有重大的科學(xué)意義和巨大的社會價值。 組蛋白去乙酰化酶 (Histone Deacetylase，HDAC) 是治療腫瘤的新靶標(biāo)，其抑制劑 Vorinostat (SAHA) 和Romidepsin (FK228) 已分別于2006年和2009年經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)上市用于治 療表皮T細(xì)胞淋巴瘤；該類抑制劑顯示出良好的腫瘤治療效果及較小的毒副作用，是目前最具 前景的抗腫瘤藥物之一。 本項目綜合運用分子動力學(xué)模擬、計算機輔助藥物設(shè)計、化學(xué)合成、藥理學(xué)活性測試等 方法，通過“設(shè)計－合成/修飾－測試”的多次循環(huán)，開發(fā)了一系列結(jié)構(gòu)新穎的四氫-γ-咔啉骨 架的HDAC抑制劑。該類抑制劑可以有效抑制HDAC總酶及HDAC1的活性，多個化合物的酶 活性都低于50 nM；并且，該系列多數(shù)化合物對Hela、A549、HCT116、K562、MCF-7等腫瘤細(xì) 胞株表現(xiàn)出比陽性對照藥物SAHA更高的活性，多個化合物對所測腫瘤細(xì)胞株的抑制活性低于 1 μM，而對于人類正常細(xì)胞無抑制活性；在動物模型試驗中，代表性化合物對接種Lewis肺癌 荷瘤小鼠模型表現(xiàn)出良好的治療效果，且沒有觀察到明顯的體重變化和毒性反應(yīng)。因此，該類 HDAC抑制劑可以作為藥物先導(dǎo)化合物用于制備抗腫瘤藥物，為廣大腫瘤病患者帶來福音，也 向開發(fā)我國具有自主知識產(chǎn)權(quán)的抗腫瘤藥物邁進一步。
華東理工大學(xué)
2021-04-11
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去甲斑蝥素緩釋微球及其制備方法
去甲斑蝥素是我國首先合成的抗腫瘤藥物，具有提高白細(xì)胞、保護肝細(xì)胞、調(diào)節(jié)免 疫功能等作用，其抗癌機制正逐步得到闡明。但由于其仍具有一定的臟器毒性，限制了 其臨床使用的劑量，影響了抗癌效果；目前國內(nèi)已經(jīng)上市的去甲斑蝥素不具備生物降解 性，也沒有良好的緩釋性能，仍然存在毒性高，需要頻繁服藥等缺點。國外對于去甲斑 蝥素的研究主要在藥理方面，劑型研究仍為空白。 本發(fā)明提出一種去甲斑蝥素緩釋微球及其制備方法。微球包裹的藥物為去甲斑蝥素， 藥物載體為可生物降解的聚合物，其重均分子量為 5000-50000，可穩(wěn)定釋放 60 小時以 上。 在制備方面，以聚合物二氯乙烷或乙酸乙酯溶液作為油相，加入表面活性劑的去甲 斑蝥素水溶液作為水相，兩相均勻混合，形成初乳；將初乳加入含有聚乙烯醇的水溶液 中，攪拌或蒸發(fā)，得到復(fù)乳；將復(fù)乳進行透析，出去游離藥物；最后冷凍干燥成粉，密 封保存即可。 功能特點： 1、聚合物具有生物可降解性，提高了親水性，可調(diào)節(jié)降解速度和相對分子量。 2、微球能夠降低巨噬細(xì)胞的作用，提高在血液中循環(huán)時間，提高其靶向性。 3、制備操作簡單，對水溶液藥物包封率高，藥物釋放穩(wěn)定，緩釋性能可調(diào)。 4、可在其它藥物中進行推廣，滿足更多的使用要求。
同濟大學(xué)
2021-04-13
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西貝素氮氧化物和異浙貝甲素氮氧化物的新用途
本發(fā)明公開了通式I所示的川貝母生物堿類化合物在制備鎮(zhèn)咳、祛痰和/或抗炎藥物中的用途,其中,R1為:=O或R2為:H;R3為:H;R4為H或OH;R5為:O或無。其中,西貝堿、川貝酮、西貝堿氮氧化物、異浙貝甲素、異浙貝甲素氮氧化物和10倍量的磷酸可待因具有相近的鎮(zhèn)咳效果,并且該5種單體的鎮(zhèn)咳、抗炎作用也優(yōu)于貝母甲素、貝母乙素;其中,貝母甲素、貝母乙素、西貝堿、西貝堿氮氧化物、異浙貝甲素氮氧化物具有良好的祛痰作用。本發(fā)明還公開了瓦布貝母總生物堿提取物及其制備方法和用途。
四川大學(xué)
2017-12-28
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一種均相制備低脫乙酰度羧基甲殼素的方法及其應(yīng)用
本發(fā)明公開了一種均相制備低脫乙酰度羧基甲殼素的方法及其應(yīng)用。首先將甲殼素加入到氫氧化鈉 和尿素的混合水溶液中制得均相甲殼素水溶液，再加入含羧基化試劑的水溶液在均相甲殼素水溶液里攪 拌反應(yīng)，經(jīng)后處理得到低脫乙酰度羧基甲殼素。本發(fā)明方法制備工藝簡單，產(chǎn)品取代度均勻易控，產(chǎn)率 高，且反應(yīng)條件溫和，為環(huán)境友好的綠色工藝，利于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn);甲殼素基本上未降解，制得的 一些低脫乙酰度羧基甲殼素具有 pH 敏感性和溫度敏感性，可作為藥物載體材料使用。本發(fā)明制得的水 溶性高粘度產(chǎn)品為天然原材
武漢大學(xué)
2021-04-14
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一種綠盲蝽唾液酶中蛋白酶與纖維素酶的體外提取測定方法
本發(fā)明涉及一種綠盲蝽唾液酶中蛋白酶與纖維素酶的體外提取測定方法，利用Paraflim膜，采取膜夾營養(yǎng)法提取綠盲蝽唾液酶，并測定綠盲蝽中蛋白酶與纖維素酶的活性，Paraflim膜法提取綠盲蝽唾液酶利用Paraflim膜、膠卷盒、紗布、橡皮筋、位于兩層Paraflim膜間的液體營養(yǎng)介質(zhì)，利用酶與底物反應(yīng)的原理，測定綠盲蝽唾液中蛋白酶、纖維素酶的活性。本方法材料易得，操作簡單方便，制作成本低，占空間小，可實現(xiàn)綠盲蝽唾液酶的大量、批量提取，并且綠盲蝽可繼續(xù)回收利用。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
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四乙酰乙二胺、五乙酰葡萄糖
在染整和造紙廢水中,含氯(chlorine)漂白廢水對環(huán)境的危害最強,其產(chǎn)生的二惡英和呋喃有很強的毒性和致癌性,這已引起人們的極度重視。故染整和造紙工業(yè)的漂白加工朝著全無氯(TCF—Totally Chlorine Free)和無氯元素(ECF—Elemental Chlorine Free)的漂白方向發(fā)展。而雙氧水H2O2是ECF和TCF漂白中最常用的漂白劑。但由于在H2O2漂白過程中,H2
南京工業(yè)大學(xué)
2021-01-12
四乙酰乙二胺、五乙酰葡萄糖
在染整和造紙廢水中,含氯(chlorine)漂白廢水對環(huán)境的危害最強,其產(chǎn)生的二惡英和呋喃有很強的毒性和致癌性,這已引起人們的極度重視。故染整和造紙工業(yè)的漂白加工朝著全無氯(TCF—Totally Chlorine Free)和無氯元素(ECF—Elemental Chlorine Free)的漂白方向發(fā)展。而雙氧水H2O2是ECF和TCF漂白中最常
南京工業(yè)大學(xué)
2021-04-14
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血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽及其制備方法和應(yīng)用
【發(fā) 明 人】劉睿;吳皓;朱蘊菡;程建;卞慧敏;王令充;王欣之【技術(shù)領(lǐng)域】本發(fā)明涉及一種活性多肽，具體涉及一種從四角蛤蜊軟體酶解物中分離得到的具有抑制ACE活性的多肽，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。【摘要】本發(fā)明公開了一種血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽及其制備方法和應(yīng)用，該抑制肽的氨基酸序列為：Leu-Ala-Ser-Pro-Thr-Met。本發(fā)明采用現(xiàn)代生化技術(shù)手段，對四角蛤蜊中的抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性成分進行跟蹤篩選和評價，通過酶解、超濾、反相高效液相色譜法等純化方法制備得到，實驗結(jié)果表明，該抑制肽具有很好的抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的作用，具有很好的抗高血壓的功效，并且安全性能好，具有很好的應(yīng)用前景。
南京中醫(yī)藥大學(xué)
2021-04-13