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活載體疫苗是指對細菌、病毒、真菌等微生物進行基因改造，保留其基本入侵宿主細胞引起免疫反應的能力，降低其對宿主造成危害毒力，之后通過外源插入疫苗靶點基因等方法建立起來的一種新型疫苗。近年來團隊在對常見腸道致病菌致病機理研究的基礎上，篩選了單增李斯特菌做為載體菌，對其關鍵毒力基因進行敲除構建穩定減毒突變株用來表達外源基因。目前團隊已構建了雙基因敲除株疫苗載體、半致死載體等活載體疫苗運載系統，并對其進行抗原遞呈、免疫機理等進行了初步研究發現，該類疫苗載體對免疫因子具有強烈的激活效應，更為重要的是該類活載體

胞內寄生性單增李斯特菌和綿羊李斯特菌能在吞噬細胞等抗原遞呈細胞內繁殖，引發高水平的抗原遞呈作用，分別通過MHCⅠ和Ⅱ類途徑引起宿主抗原特異性的CD8+和CD4+ T細胞免疫反應，建立長期有效的免疫保護記憶，因此可作為一種通用的疫苗載體。本項目以上述兩種李斯特菌為活菌載體搭建新型疫苗構建通用平臺，該平臺具有以下優勢：生物安全——敲除了菌株致病基因，降低了毒性；外源蛋白表達穩定——外源抗原基因整合至細菌基因組，永遠不會丟失；外源抗原具有分泌性——抗原基因融合有分泌信號肽，使蛋白能分泌到胞外，更有利于免疫刺激；對環境、公共健康安全——重組疫苗菌株不攜帶耐藥基因，不會給環境和公共健康帶來危害。本平臺技術目前已獲得授權專利，成果屬于國際先進水平，已在結核疫苗及豬繁殖與呼吸綜合癥病毒疫苗的研制上應用。該平臺還可應用于腫瘤治療性疫苗及其他預防病毒和慢性細菌感染的疫苗的研發，是一種通用的疫苗構建平臺。

本產品為增強黏膜免疫的口服活載體疫苗，是新一代預防和治療乳仔豬腹瀉的特異 性免疫微生態制劑。主要成分為活菌乳酸重組菌，活菌總數≥3.5×109cfu/g，同時也 含有死菌以及代謝產物。活菌進入機體后可定植在腸壁，通過生長繁殖，產生的乳酸和 乙酸，降低了腸道的PH及Eh值，改善內部微環境，能抑制有害菌的生長，其代謝產物對 機體有營養作用，促進免疫功能的作用。 該乳酸重組菌可促進腸道有益菌落生長繁殖，拮抗和抑制腸道內有害菌增殖，糾正 腸道菌群紊亂，產生特異性抗體，預防和治療豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉等病毒引起 的腹瀉、下痢、細菌性腸炎等疾病，增強免疫力和抗病力。

本產品為增強黏膜免疫的口服活載體疫苗，是新一代預防和治療乳仔豬腹瀉的特異性免疫微生態制劑。主要成分為活菌乳酸重組菌，活菌總數≥3.5×109cfu/g，同時也含有死菌以及代謝產物。活菌進入機體后可定植在腸壁，通過生長繁殖，產生的乳酸和乙酸，降低了腸道的PH及Eh值，改善內部微環境，能抑制有害菌的生長，其代謝產物對機體有營養作用，促進免疫功能的作用。 該乳酸重組菌可促進腸道有益菌落生長繁殖，拮抗和抑制腸道內有害菌增殖，糾正腸道菌群紊亂，產生特異性抗體，預防和治療豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉等病毒引起的腹瀉、下痢、細菌性腸炎等疾病，增強免疫力和抗病力。

研發階段/n該項目屬于動物基因工程技術領域，具體涉及一種H5N1亞型禽流感病毒與鴨腸炎病毒活載體疫苗。該疫苗株rDEV-HA5保藏在中國典型培養物保藏中心，保藏號為CCTCC?NO：V201404。本發明的構建方法是：在鴨腸炎病毒人工染色體質粒pBAC-C-KCE中插入了H5N1亞型禽流感病毒ha基因的片段得到重組質粒pBAC-C-KCE-HA5。所述的質粒pBAC-C-KCE的基因結構組成如圖7所示；所述質粒pBAC-C-KCE-HA5的基因結構組成如圖14所示。生物學功能驗證表明，本發明的疫苗有

目前，沙門菌的檢測主要還是采用傳統的細菌學方法，通過前增菌、選擇性增菌、分離培養、生化試驗以及血清學鑒定的步驟一步一步進行檢測，工作量大且耗時長。PCR及Real Time PCR等分子生物學技術雖然具有快速、簡便等大量優點，卻較少應用，主要原因是以DNA為模版的PCR及Real Time PCR技術并不能區分細菌的死活細胞，樣品中存在的死細胞可能導致假陽性結果。本課題將EMA對死活細胞的鑒別作用與Real Time PCR的靈敏度、特異性相結合，有效克服了DNA分子檢測手段不能鑒別死活細胞的弊端，在實現檢測的快速、簡便的同時大大提高了結果的準確性。確證了EMA-Real Time PCR可實現實際樣品中沙門菌活細胞的快速測定，可將EMA-Real Time PCR推廣到實際檢測工作中，如此便可大大縮短檢測所需的時間，節省大量的人力、物力。研究成果具有重大的應用前景。 社會效益：EMA-Real Time PCR可用于實際樣品中沙門菌活細胞的快速檢測，建立一種快速檢測病原菌的新方法體系，用于實際的檢測工作中，如此不僅可以減少食品安全日常監測的工作量，更重要的是，在突發性食物中毒事件中，大大縮短了病原菌檢測所需時間，提高了反應效率，為突發性公共衛生事件的解決提供更好的技術平臺。

??????? 非損傷微測技術（Non-invasive Micro-test Technology，NMT）源于美國MBL實驗室（54位諾貝爾獎得主的搖籃），由神經學家Lionel F. Jaffe（美國揚格公司創始人之一）于1974年發明，2001年，美國揚格公司正式推出現代NMT。NMT是一種研究活體材料的底層核心技術，研究人員基于NMT能夠建立自己獨有的Me-Only 研究平臺，從而獲得極具創新的研究成果。 ??????? NMT可在不接觸、不損傷樣品的情況下，檢測分子/離子進出生物活體的流速（流動速率和方向），可測樣品種類繁多，小到菌、單細胞、液泡，大到組織、器官、整體都可檢測。基于NMT商業化的設備統稱為非損傷微測系統。 ??????? 揚格/旭月的非損傷微測系統包含BIO系列、CONFLUX系列（共聚焦/熒光NMT）、NMT100系列、NMT200系列、NMT100S系列、NMT200S系列、NMT150系列、NMT活體工作站系列、NMT Physiolyzer?系列等，已發展至第七代自動化智能產品。揚格/旭月的NMT系統全部采用從美國揚格（旭月北京）研發中心自主研發的imFluxes智能操作軟件，將十余年的NMT應用大數據與設備實現完美結合，并且在產品一體化、自動化、智能化、擴展升級等諸多方面都有大幅提升。 ??????? 揚格/旭月已取得基于NMT的數十項專利及軟件著作權，擁有完善的專利保護體系，所有產品全部通過中關村NMT聯盟認證和ISO9001質量體系認證。揚格/旭月所銷售的NMT專用耗材，已通過中關村NMT聯盟認證，所有耗材是揚格/旭月研發中心結合十余年的經驗、摸索并自主研發生產的。NMT專用耗材較傳統的通用型耗材保質期更長，性能更穩定、可靠，所有對外銷售的耗材全部經過嚴格的生產、檢驗流程。 ??????? 揚格/旭月的NMT研究平臺已經幫助國內外科研單位取得近百項各類專利，以及包含Nature、Cell在內的500多篇論文。同時，已銷往歐洲的瑞士蘇黎世大學（擁有包括愛因斯坦在內10余位諾貝爾獎得主），以及中國科學院、中國林科院、中國農科院、農業部下屬的眾多科研院所與高校，以及北大、上海交大等知名高校。 名稱：NMT活細胞工作站 代數：第七代 品牌：旭月 產地：中國 已獲得認證：中關村NMT聯盟認證，ISO9001國際質量體系認證 簡介：NMT活細胞工作站是一款針對活細胞生理功能研究而特別設計的活體生理功能檢測平臺，可在細胞的正常培養/生長環境中，檢測進出細胞內外的分子、離子的流速，反映細胞的實時生理狀態，分辨率高達10-12 mol級別。能滿足質膜生理功能、神經傳導、細胞凋亡等方向的臨床與基礎研究需求。 1 活體、原位、非損傷測量 對整體或分離后的樣品不造成損傷，獲取正常生理狀態下的信息。 2 無需標記 預先知道測定的是何種指標，無需用放射性、化學或藥理學等標記方法，安全且環保。 3 不用提取樣品 可直接檢測，不需要研磨等傳統的提取方法。 4 實時、動態檢測 動態實時（最短在6秒左右）檢測和獲取數據。 5 長時間持續檢測 可進行長達8個小時以上的實時和動態監測。 6 可測指標 采購相對應耗材后可單獨檢測Ca2+、Cl-濃度和流速。 預留指標檢測升級端口，可升級指標包含：IAA、O2、H2O2、Cd2+、Pb2+、Cu2+、Ca2+、H+、K+、Na+、NH4+、NO3-、Mg2+的濃度和流速檢測。 預留雙指標檢測升級端口，升級后可單獨檢測一種離子或分子，也可同時檢測兩種離子或一種離子與一種分子的濃度和流速，用于離子/分子相關性研究及更前沿的科研探索。 7 可測樣品種類繁多 整體、器官、組織等都可以檢測（理論值：5μm-10cm均可）。 8 自動化操作 X、Y、Z方向自動/手動操控傳感器移動。 9 數據采集方式 X方向一維數據采集。 型號 功能 可升級功能 NMT-LCP 1.標配兩種指標：Ca2+、Cl-。 2.操作方式：三維自動。 3.檢測樣品：可檢測樣品尺寸為5μm-10cm。 4.數據：1D。可直接檢測、輸出流速和濃度數據。 5.檢測方式：單傳感器檢測 6.異常報警：有 1.可升級指標：膜電勢、IAA、O2、H2O2、Cd2+、Pb2+、Cu2+、H+、K+、Na+、NH4+、NO3-、Mg2+。 2.可擴展：未來新研發指標可擴展升級。 3.可升級檢測方式：單/雙傳感器檢測可選。 4.數據：1D/3D可選。可直接檢測、輸出流速和濃度數據。 ? ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ? ??

于生物制藥生產廢水中通常含有病原性微生物，殺死病原體后才能排放到污水處理系統中，沃恩專門研制出一套生物滅活處理系統，該系統通過持續穩定的高溫使細菌的菌體變性或凝固酶失去活性而使細菌死亡，病菌在高溫下DNA、RN的化學吸收熱量導致鍵斷裂，從而滅活。本系統采用序批次處理方式，配有一個收集罐和兩個或兩個以上的滅活罐，通過間歇式方式運行，確保使用過程中的節能環保，系統可靠性高；另外整個系統采用智能化控制，能夠實現無人值守，全自動運行，并已在實際項目中取得顯著效果。

真核細胞具有復雜而高度有序的空間結構，研究生物大分子的亞細胞定位，對于闡明其生物學功能有著重要意義。核酸分子在細胞中的特異性分布直接影響基因表達的效率，在蛋白質翻譯調控、學習與記憶形成等一系列生物學過程中扮演了重要角色。針對亞細胞區域中RNA組份的研究，傳統手段依賴于化學交聯、免疫沉淀、離心分離等技術，不但需要預先破壞細胞的天然結構，而且還局限于少數能夠被機械分離的亞細胞區域，缺乏普適性。 本研究提出“鄰近核酸標記”的策略。該策略的核心是在活細胞中利用酶促反應形成大量高活性的自由基，與酶鄰近的核酸分子發生共價加成反應，從而實現空間特異性標記。從工程改造的過氧化物酶APEX2出發，鄒鵬課題組首先設計并合成了十余種與生物素偶聯的酶底物，并從中發現生物素-苯胺探針的核酸標記活性最高。他們進一步以線粒體、核纖層和核仁等亞細胞結構為例，建立了在活細胞中開展鄰近核酸標記的方法，并通過定量PCR與高通量測序分析證實了標記方法具有良好的空間特異性。鄰近核酸標記技術操作簡單、具有普適性，為日后研究核酸的亞細胞定位與功能關系提供了必要的工具。