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中國海洋大學服務器、圖形工作站、相機等設備采購項目競爭性磋商

活載體疫苗是指對細菌、病毒、真菌等微生物進行基因改造，保留其基本入侵宿主細胞引起免疫反應的能力，降低其對宿主造成危害毒力，之后通過外源插入疫苗靶點基因等方法建立起來的一種新型疫苗。近年來團隊在對常見腸道致病菌致病機理研究的基礎上，篩選了單增李斯特菌做為載體菌，對其關鍵毒力基因進行敲除構建穩定減毒突變株用來表達外源基因。目前團隊已構建了雙基因敲除株疫苗載體、半致死載體等活載體疫苗運載系統，并對其進行抗原遞呈、免疫機理等進行了初步研究發現，該類疫苗載體對免疫因子具有強烈的激活效應，更為重要的是該類活載體

中國海洋大學服務器、圖形工作站、相機等設備采購項目（二次）競爭性磋商

目前，沙門菌的檢測主要還是采用傳統的細菌學方法，通過前增菌、選擇性增菌、分離培養、生化試驗以及血清學鑒定的步驟一步一步進行檢測，工作量大且耗時長。PCR及Real Time PCR等分子生物學技術雖然具有快速、簡便等大量優點，卻較少應用，主要原因是以DNA為模版的PCR及Real Time PCR技術并不能區分細菌的死活細胞，樣品中存在的死細胞可能導致假陽性結果。本課題將EMA對死活細胞的鑒別作用與Real Time PCR的靈敏度、特異性相結合，有效克服了DNA分子檢測手段不能鑒別死活細胞的弊端，在實現檢測的快速、簡便的同時大大提高了結果的準確性。確證了EMA-Real Time PCR可實現實際樣品中沙門菌活細胞的快速測定，可將EMA-Real Time PCR推廣到實際檢測工作中，如此便可大大縮短檢測所需的時間，節省大量的人力、物力。研究成果具有重大的應用前景。 社會效益：EMA-Real Time PCR可用于實際樣品中沙門菌活細胞的快速檢測，建立一種快速檢測病原菌的新方法體系，用于實際的檢測工作中，如此不僅可以減少食品安全日常監測的工作量，更重要的是，在突發性食物中毒事件中，大大縮短了病原菌檢測所需時間，提高了反應效率，為突發性公共衛生事件的解決提供更好的技術平臺。

于生物制藥生產廢水中通常含有病原性微生物，殺死病原體后才能排放到污水處理系統中，沃恩專門研制出一套生物滅活處理系統，該系統通過持續穩定的高溫使細菌的菌體變性或凝固酶失去活性而使細菌死亡，病菌在高溫下DNA、RN的化學吸收熱量導致鍵斷裂，從而滅活。本系統采用序批次處理方式，配有一個收集罐和兩個或兩個以上的滅活罐，通過間歇式方式運行，確保使用過程中的節能環保，系統可靠性高；另外整個系統采用智能化控制，能夠實現無人值守，全自動運行，并已在實際項目中取得顯著效果。

真核細胞具有復雜而高度有序的空間結構，研究生物大分子的亞細胞定位，對于闡明其生物學功能有著重要意義。核酸分子在細胞中的特異性分布直接影響基因表達的效率，在蛋白質翻譯調控、學習與記憶形成等一系列生物學過程中扮演了重要角色。針對亞細胞區域中RNA組份的研究，傳統手段依賴于化學交聯、免疫沉淀、離心分離等技術，不但需要預先破壞細胞的天然結構，而且還局限于少數能夠被機械分離的亞細胞區域，缺乏普適性。 本研究提出“鄰近核酸標記”的策略。該策略的核心是在活細胞中利用酶促反應形成大量高活性的自由基，與酶鄰近的核酸分子發生共價加成反應，從而實現空間特異性標記。從工程改造的過氧化物酶APEX2出發，鄒鵬課題組首先設計并合成了十余種與生物素偶聯的酶底物，并從中發現生物素-苯胺探針的核酸標記活性最高。他們進一步以線粒體、核纖層和核仁等亞細胞結構為例，建立了在活細胞中開展鄰近核酸標記的方法，并通過定量PCR與高通量測序分析證實了標記方法具有良好的空間特異性。鄰近核酸標記技術操作簡單、具有普適性，為日后研究核酸的亞細胞定位與功能關系提供了必要的工具。

1 成果簡介現代社會人們生活節奏加快、缺乏鍛煉、工作學習壓力加大，使人們不自覺地進入“亞健康”狀態，特別是隨著步入老年社會，人們越來越關注身體的健康，推行健康概念服務可以滿足大多數人群的需求。 飛活網（ fihuo.com） 通過結合便攜的傳感器腕帶、智能手機和后臺海量數據處理平臺，可以給人們展示長期的基本健康數據和環境數據，并用于比較和分析。關注家人和朋友的健康不再是一個夢想，可以實現在線的健康數據瀏覽和監控。 飛活網具備社交網絡的基本交互功能， 可以輕松獲得最新和最熱的健康資訊；可以邀請和加入朋友的健康生活圈子，開始健康的生活方式； 可以定制和發布個人的健康計劃，并記錄健康日記；可以長期保存，瀏覽和分析個人健康數據； 可以發布和參與健康測試，提高對健康生活的認識； 可以提交和回答健康問題，獲得貼心的健康問題答案。 飛活網還研制了計步器和健康腕帶智能設備，以及相關的智能手機應用和微博應用，可以實現隨時隨地的健康數據采集、分析與共享，比如步數、距離、路線、卡路里、 脈率、血氧和營養等數據。基于健康傳感器網絡和數據處理平臺， 可以實現具有特色的健康主題服務。 下圖展示了傳感器設備、智能手機應用和飛活網服務的連接關系。 2013_18_12 應用說明2012 年 8 月，飛活網服務網站開始上線試運行，同時發布了 Android 平臺的手機健康應用供用戶免費下載，用戶可以使用手機健康應用不斷收集日常的運動和健康數據，并定時上傳到飛活網服務器上進行保存和處理，從而實現長期的健康數據瀏覽、管理和分析，不僅可以幫助用戶建立個人健康檔案，還可以進行健康指導。此外， 飛活網研制的計步器和健康腕帶智能設備非常方便攜帶和使用，不僅能耗較低，而且可以緩存多天的數據并能通過藍牙上傳到手機，然后通過無線上傳至服務器。3 效益分析目前移動健康領域發展迅速，國內外都涌現出一些優秀的初創公司，各個投資機構都密切關注健康醫療領域。 飛活網的核心競爭力是為用戶提供長期的健康數據采集、管理、分析和指導等服務。 而且， 面向不同人群開發的擴展傳感器設備還可以擴展到家庭和社區等更廣泛的領域。飛活網通過初步建立從個人健康數據產生、收集、存儲到分析和指導的路徑，具有明顯的社會和經濟效益。通過結合智能設備的制造和營銷，以及增值的飛活網服務可以吸引越來越多的人群參與其中，并享受健康生活帶來的幸福感和成就感。

南方科技大學與深圳國家感染性疾病臨床醫學研究中心/南方科技大學第二附屬醫院（深圳市第三人民醫院）等聯合，從臨床新冠肺炎病例獲取生物樣本，首次使用冷凍電子顯微鏡觀察到了新冠病毒經滅活后的真實形貌，為新冠病毒的識別、鑒定和臨床相關研究提供重要的超微影像基礎。該成果于當地時間2020年3月5日發布在生物領域最大的預印本發行服務BioRxiv上。自從2019年底新冠肺炎疫情爆發以來，南方科技大學冷凍電鏡中心與深圳國家感染性疾病臨床醫學研究中心/南方科技大學第二附屬醫院（深圳市第三人民醫院）等成立聯合研究團隊，啟動對新冠病毒感染肺炎以及新冠病毒分離、培養、鑒定及結構解析等系統性研究分析。聯合研究團隊依托南方科技大學第二附屬醫院（深圳市第三人民醫院）生物安全III級實驗室條件，在2020年1月27日從1名新冠肺炎患者肺泡灌洗液中分離出病毒株，并迅速完成基因組測序和鑒定，及時向全球流感信息共享平臺（GISAID注冊編號：EPI_ISL_406594）注冊共享信息，把其命名為“BetaCoV/Shenzhen/SZTH-003/2020”的新冠毒株。隨后進一步完善了實驗室病毒擴增、純化及滅活技術，并綜合應用間接免疫熒光法（IFA）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、和基因組序列與譜系分析多種方案核實和確認滅活的新冠病毒。隨后南方科技大學冷凍電子顯微鏡中心專家，利用冷凍電子顯微鏡分析技術，不僅首次觀察到了真實的新冠病毒經滅活后的形貌，并且捕捉到了該病毒侵染宿主細胞中的一個重要中間狀態。此時病毒正處于識別和附著宿主細胞后，準備與細胞發生融合的時期。經國內外文獻檢索，這是新冠肺炎疫情爆發以來，科研工作者首次在冷凍電子顯微鏡下觀察到新冠病毒全病毒的真實形貌。冷凍電子顯微鏡避免了常溫電子顯微鏡對生物樣品的脫水、染色等破壞作用，最大限度地保持了生物樣品生理狀態下的真實形貌。聯合研究團隊現正在進一步揭示新冠病毒超微結構、病毒侵染人類宿主細胞的特性、與新冠肺炎臨床預后關系。在深圳市的大力支持下，聯合研究團隊正在打造高等級生物安全臨床冷凍電子顯微鏡研究平臺，全力推進新冠病毒以及其他致命性病毒的超微結構生物學研究，為傳染病病原鑒定、公共衛生突發事件防控和潛在的抗體、疫苗和新藥研發提供堅實的科學基礎。

（一）蠟樣芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌NJYH63305是團隊自行篩選的有益芽孢桿菌，廣泛應用于農業、醫藥、食品保健、飼料等領域。在農業領域，是一種集抑菌、殺蟲、促生于一體的環境友好型高效生防制劑，對茶輪斑病菌、黃瓜枯萎病菌、立枯絲核菌、煙草赤星病菌、茶云紋葉枯病菌、小麥全蝕病菌、小麥紋枯病、尖鐮孢菌、鐮刀菌、終極腐霉菌等植物病害及小菜蛾具有較強抑制作用。在醫藥領域，可調節人體腸道微生態平衡，適于治療急慢性痢疾、腸炎、腹瀉、嬰幼兒腹瀉引起的腸功能紊亂等；在食品保健領域，可作為食品添加劑，長期服用能促進營養物質的消化吸收，減少腸道疾病的發生，提高免疫能力、增強抗病能力。 1、蠟樣芽孢桿菌國內外研究進展目前，國內外蠟狀芽孢桿菌研究大多處于實驗室內研究階段，其商品化并應用于農業防治的實例較少。國內市場上蠟樣芽孢桿菌農用制劑大部分為復配試劑，同時其大規模培養過程中也存在不少問題，如發酵放大過程信息采集困難、制劑有效期不長、產品貨架期短等，這些問題的深入研究對解決蠟樣芽孢桿菌高密度培養瓶頸、降低蠟樣芽孢桿菌生產成本、促進細胞大規模培養領域重大突破具有重要意義。2、本課題組技術優勢（1）團隊以項目為紐帶，建立了蠟樣芽孢桿菌在線監控的高密度培養與多階段發酵集成技術，在1000L發酵罐上蠟樣芽孢桿菌活菌數高達800億個/g, 比初始培養提高了230%，達國際領先水平；（2）篩選的芽孢保護劑，可提高蠟樣芽孢桿菌活性，延長半衰期40％以上；（3）協同江蘇省農科院及南京農業技術推廣站進行綠色防控技術推廣，于江蘇浦口林大蔬菜基地、江寧區湖熟街道設施蔬菜基地、溧水傅家邊茶廠等地建立2800畝示范區，重點試驗核心區460畝。推廣示范區內，蠟樣芽孢桿菌對水稻紋枯病、灰霉病、晚疫病等真菌病害抑制率達51.8％～85.9％，與蘇云金芽孢桿菌（Bt）進行增效試驗，小菜蛾殺滅率提高29%，降低化學農藥使用量50％以上，農藥殘留量低于國家無公害農產品標準；（4）目前已在國內外重要期刊發表學術論文10余篇，出版專著《高效有益微生態制劑開發與利用——蠟樣芽孢桿菌》，申請國家發明專利4項，授權3項，其中3項（ZL200910028025.1、ZL201010579133.0、ZL200910028320.7）在南京新百藥業有限公司成功實現轉化。（二）凝結芽孢桿菌團隊自行篩選獲得一株益生凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005，除具有和乳酸菌及雙歧桿菌同樣的保健功效外，還具有耐酸、耐熱、耐鹽、容易培養和保存的特點。凝結芽孢桿菌為兼性厭氧菌，進入腸道后會消耗游離氧，有利于厭氧微生物乳酸菌和雙歧桿菌的生長，多用于調節腸道內微生態菌群平衡，團隊自主知識產權的凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005對甜瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、西瓜炭疽病菌等有很強的防治效果，可進行新型高效生物農藥的開發。