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CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因編輯工具酶，在科研領域被廣泛應用，而在臨床方面的應用因為其脫靶活性一度停滯不前。它通過guide RNA（gRNA）與靶向DNA序列的配對，從而將Cas9錨定在靶向基因并誘導產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂（DSB）。在基因編輯誘發(fā)的DSB的修復過程中，一定幾率會產(chǎn)生基因突變或者外源DNA片段的插入，從而達到基因編輯的目的。在實際應用過程中，一個好的基因編輯酶Cas9需要同時滿足高效切割靶位點、低脫靶活性和低染色體異常三個特點。目前在這三個方面，有一部分基于PCR的方法用于估算基因編輯效率，但其結果可靠性有待提高；有一些基于高通量測序的方法可以在體內(nèi)或者體外檢測基因編輯酶的脫靶活性；尚無系統(tǒng)的可定量的測量基因組異常結構的方法。本項目開發(fā)了一種新的方法，可以用來同時定量檢測Cas9編輯效率和脫靶活性以及編輯引起的染色體異常結構，即primer-extension-mediated sequencing（PEM-seq）。這是對基因編輯和DNA損傷修復等領域都有巨大促進作用的新技術。與此同時，該項目包括了該團隊利用PEM-seq篩選出的一個相比于現(xiàn)有Cas9變體具有更低脫靶活性且與野生型Cas9切割效率相當?shù)腃as9變體further enhanced Cas9 (FeCas9)。

已有樣品/n針對酶在工程化應用中的缺陷，如易失活、不具回收性、抗逆性差 等，采用新型固定化技術，制備出具有高活性、高耐逆和工程化回用性 良好的固定化脂肪酶，提高酶活力 10-46 倍。如：以碳納米管為載體整 合其它方法固定化 BCL，固定化酶最大蛋白比活達 50,200 U/min/g protein，酶活回收率達 3,740%，為游離酶的 54 倍，是 MPR-NKA 固定化 酶的 1.5 倍，且大幅縮短了酶促反應時間，10 分鐘就能使手性拆分反應 達到平衡，較國際報道的最高水平提高 200 倍，

α-淀粉酶抑制劑是一種純天然生物活性物質(zhì)，屬于糖水解酶抑制劑的一種。 α-淀粉酶抑制劑通過對淀粉酶的抑制作用而發(fā)揮減肥效應，并經(jīng)胃腸道排出體外，因此不必進入血液循環(huán)系統(tǒng)，不作用于大腦中樞，減肥的同時不抑制食欲，使用劑量很高時也無副作用，符合世界衛(wèi)生組織的減肥原則。對于肥胖患者，可減少糖向脂肪轉(zhuǎn)化，延緩腸道的排空，增加脂肪消耗以減少體重。因此，能用α-淀粉酶抑制劑來防止和治療肥胖癥、脂肪過多癥、動脈硬化癥、高血脂及糖尿病等。另外，純化的α-淀粉酶抑制肽的另一重要作用是作為糖尿病的輔助治療（中藥一類），可以阻礙或延緩其對食物中主要的碳水化合物淀粉的消化作用，阻止血糖的升高，從而能使糖尿病人吃飽飯，消除饑餓感。本成果利用固液萃取技術、膜技術、雙水相萃取技術和層析技術等現(xiàn)代生物分離技術從小麥中分離純化了 -淀粉酶抑制劑（ -淀粉酶抑制劑的活性大于2500U/mg.protein），達到了日本國應用的要求。新工藝較原工藝相比具有操作方便，收率高，成本低，產(chǎn)品質(zhì)量好，易于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點。據(jù)悉，歐美已將 -淀粉酶抑制劑開發(fā)成保健食品,如starch blocker。每年的用量在100噸以上，且近年來每年以30％的速度在遞增。預計到2010年我國將有2億人口加入肥胖者行列，而糖尿病早已成為我國中老年人的常見病、多發(fā)病，因此將本成果應用于治療上述疾病方面是極有市場潛力的。

成果描述：牛蹄油是屬于較低碘值的天然油脂，長期以來國內(nèi)外均是以硫酸化加工制備加脂劑，工藝相對落后，產(chǎn)生的廢水對環(huán)境污染大，生產(chǎn)的效率低，制備的產(chǎn)品綜合性能不突出。 該技術創(chuàng)新性突出，徹底突破傳統(tǒng)的氧化亞硫酸化的制備技術，擺脫必須依賴天然魚油為主要原料制備氧化亞硫酸化加脂劑的技術限制；并且從根本上解決了低碘值天然牛蹄油深度氧化的加工困難，可以制備加酯性能突出的產(chǎn)品；生產(chǎn)過程具有突出的環(huán)境友好的特點，基本沒有廢水產(chǎn)生使環(huán)境污染大大改觀，生產(chǎn)的效率高（是原來3-4倍），能耗低僅為原來工藝的1/3；而且，與其他加脂劑具有優(yōu)良的復合性能，可以賦予皮革良好的加酯性能。市場前景分析：在國內(nèi)皮革企業(yè)得到普遍使用，生產(chǎn)技術在皮革化工行業(yè)得到極好的評價。皮革行業(yè)，平均用量藍濕革的質(zhì)量的8%-12%。與同類成果相比的優(yōu)勢分析：？ 成分： 氧化-亞硫酸化產(chǎn)物，以天然牛蹄油、合成原料為主 ？ 外觀： 棕或棕紅色油狀液體 ？ pH（1：9）： 6.5~7.5 ？ 有效成份（%）： 65～75（以需要定） ？ 離子型： 陰離子 ？ 乳液穩(wěn)定性： 油：水＝1：9，常溫存放24h不分層破乳， ？ 或者開發(fā)耐酸、耐電解質(zhì)系列產(chǎn)品。 產(chǎn)品穩(wěn)定性： 產(chǎn)品5～40℃放置穩(wěn)定性≥12個月。

已有樣品/n該項目提供了電-分子除油“永動機”最新專利技術及裝置。在裝置 中通過一種“中間介質(zhì)”，通過分子吸附把工件上的油污脫下來，而該 “中間介質(zhì)”又可以采用電還原的方式，還原為原來的介質(zhì)，最終達到 不斷循環(huán)使用。整個過程不需要任何脫脂劑和其它除油劑，零排放，完 全環(huán)保。成本約 0.0001 元/平米。工件在不斷除油的同時，脫下來的油 污可以不斷收集，銷售給上游廠家。整個過程就仿佛一臺“永動機”： 帶油污的工件進入裝置=除油后的工件+油污分別出來。 市場前景：各類電鍍廠、熱鍍廠、小五金廠、機械廠、

一、 項目簡介石墨是典型的層狀結構材料，具有良好的導電性，潤滑性，化學穩(wěn)定性。被廣泛用于冶金、電氣、機械等工業(yè)領域。直接使用卻具有密度大，分散度差等缺點。 石墨烯是碳原子緊密堆積成的單層蜂窩狀晶格結構的一種碳質(zhì)新材料，是一種二維晶體，是構建其他維數(shù)碳質(zhì)材料（如零維富勒烯、一維碳納米管、三維石墨）的基本單元。其性能遠遠高于石墨材料。石墨烯的理論研究已有 60 多年的歷史，但一直以來，人們普遍認為這種嚴格的二維晶體結構由于熱力學不穩(wěn)定性而難以獨立穩(wěn)定存在。直到 2004 年，英國曼徹斯特大學的研究組利用膠帶剝離高定向石墨的方法獲得了獨立存在的二維石墨烯晶體，為二維體系的實驗研究提供了廣闊的空間。目前石墨烯的制備方法有微機械剝離法、化學氣相沉積法（CVD）、外延生長法、電化學法、氧化石墨還原法等，其中機械剝離法得到的石墨烯片量少，隨機性大；CVD方法和外延生長法大多以SiC作為基底，成本高，可控性差；電化學方法的得到的石墨烯量較少，不易控制。氧化石墨還原法是通過在石墨表面引入含氧官能團，增大層間距，從而減小層之間的范德華力，然后通過超聲等方法改變其雜化狀態(tài)，再通過還原得到石墨烯。氧化石墨還原法以其低成本的優(yōu)點成為目前使用最廣泛的方法之一，本發(fā)明涉及一種采用溶劑熱法在低溫下制備氧化石墨烯的方法，屬于功能材料制備技術領域。二、 項目技術成熟程度目前氧化石墨烯的制備方法主要是Hummers方法。該方法在敞開體系中，需要在制備氧化石墨烯的過程中采用先降溫，再分兩步升溫的三步法, 以及冷凝回流等輔助設備，過程中需要精確控制反應溫度且溫度高達98 °C，制備出來的氧化石墨烯還需要長時間超聲，步驟繁瑣，產(chǎn)物的濃度較低，不適合大量生產(chǎn)。本項目采用溶劑熱法在低溫下制備氧化石墨烯，減少了氧化劑的用量和生產(chǎn)時間。氧化石墨可以通過處理得到具有不同分散特性的母液。也可以直接進行還原,得到石墨烯。而且樣品在不干燥的條件下極易溶于水等溶劑，產(chǎn)量較大，大大減少了超聲的時間。三、 技術指標（包括鑒定、知識產(chǎn)權專利、獲獎等情況）該項目已經(jīng)申請中國專利并于2013年獲得授權 （ZL201110414315.7），與該項目相關的工作也在國際期刊上進行了發(fā)表，但是仍有很多問題一直困擾商業(yè)化進程。我們實驗室也一直在圍繞各種問題開展工作。四、 市場前景（應用領域、市場分析等）石墨烯的水熱前驅(qū)體為氧化石墨，具有完全拉伸的層間距和外層表面富氧官能團，因此可以根據(jù)需求進行各種定向修飾，從而實現(xiàn)其親水、親油、高分散度、高電導率等特性，作為添加劑可以有效改善化工、冶金、電氣工業(yè)材料的性能，從而實現(xiàn)高回報率。五、 規(guī)模與投資需求（資金需求、場地規(guī)模、人員等需求）以石墨為原料，首先需要制備石墨烯的前驅(qū)體氧化石墨，再經(jīng)后處理過程獲得各種性能石墨烯材料。由于后處理過程相對繁瑣， 耗時耗力，其資金投入完全取決于后處理工藝的優(yōu)化情況。前期投入100萬元，其中包括設備費40萬， 原料費10萬， 占地100平米，人員5-10人，完全可以達到每天生產(chǎn)1公斤石墨烯產(chǎn)品。六、 生產(chǎn)設備玻璃器皿，反應釜， 超純水裝置，烘箱，超聲波設備，電動攪拌器，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，離心機等基本設施。七、 效益分析功能化石墨烯是高附加值產(chǎn)品，目前市場上以克為單價銷售，價格在500元左右。以每日1公斤生產(chǎn)量計算，每天銷售額會達到50萬元。八、 合作方式多種方式可以選擇，主要是河北工業(yè)大學負責產(chǎn)品研發(fā)升級，企業(yè)一方負責生產(chǎn)與銷售。九、 項目具體聯(lián)系人及聯(lián)系方式（包括電子郵箱）項目聯(lián)系人： 任鐵真電話： 022 60204909郵箱： [email protected]

可以量產(chǎn)/n中農(nóng)油2008由不育系19514A和恢復系7－5選育而成，屬甘藍型半冬性溫敏型波里馬細胞質(zhì)不育兩系雜交種，全生育期長江上游平均222天，長江中游平均220.5天。2005-2006年度參加長江上游區(qū)域試驗，平均畝產(chǎn)171.54公斤，比對照油研10號增產(chǎn)5.96%。2006-2007年度續(xù)試，平均畝產(chǎn)193.59公斤，比對照油研10號增產(chǎn)24.7%。兩年區(qū)試24個試點，22個點增產(chǎn)，2個點減產(chǎn)，平均畝產(chǎn)182.57公斤，比對照油研10號增產(chǎn)15.33%。2006-2007年度生產(chǎn)試驗，平均

可以量產(chǎn)/n成果簡介：華油雜16號由不育系8086A和恢復系L-6275選育而成，屬半冬性甘藍型油菜細胞質(zhì)雄性不育三系雜種，全生育期225天左右。2005-2007年在河南省正式區(qū)試中，兩年平均畝產(chǎn)量196.59kg，比對照雜98009增產(chǎn)7.54％。在2006－2007年河南省生產(chǎn)試驗中，平均畝產(chǎn)量198.13kg，比對照雜98009增產(chǎn)3.32％。經(jīng)農(nóng)業(yè)部油料及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心分析，華油雜16號芥酸含量0.1％，硫苷含量17.38μmol/g，含油量44.84％。于2007年、2009年分別

可以量產(chǎn)/n成果簡介：華油雜6號是利用不育系8086A和恢復系7-5配制的高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗倒伏、早熟、適應性廣的雜交油菜新品種。在2000-2002年國家長江下游區(qū)試中，兩年平均畝產(chǎn)145.05kg，比對照“中油821”增產(chǎn)15.52％， 居參試雙低品種首位，芥酸含量0.4％， 硫苷含量27.78μmol/g，含油量40.4％。2002年通過湖北省和安徽省品種審定，2003年通過湖南省和全國品種審定，2004年通過河南省品種審定和四川省品種認定，2005年通過湖北省品種審定，2008年通過貴州省品種審