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重組大腸桿菌生產磷脂酶D及轉酯化產品開發
"磷脂酶 D （PLD）是一類具有水解作用和磷酰基轉移作用的酶, 在磷脂改性方面發揮著重要作用。它可以將大量磷脂酰膽堿(PC) 催化合成為自然界稀有的磷脂質，如磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰絲氨酸(PS)和磷脂酰甘油(PG)等，合成的磷脂質在醫藥和食品工業具有很大的應用前景。但由于來源不足和價格高，PLD的工業應用一直受到限制。本項目通過基因工程和微生物發酵技術，解決了PLD工業化應用中難表達和表達量不足的難題，利用重組大腸桿菌發酵實現了PLD的高水平表達，其酶活為106 U?L-1，產量為748 mg?L-1，分別比目前報道的最高水平提高了100倍和20倍；同時，本項目還建立了一種簡單有效提取重組PLD的方法，可望大大降低PLD的生產成本。本技術先進，應用前景看好，如按106 U?L-1的發酵水平生產，成本約100元人民幣/1000 U，目前市場售價在3000-6000元/1000 U，利潤空間很大。 "
廈門大學
2021-04-10
一種α-半乳糖苷酶軟膠囊飼料添加劑
其他成果/n本發明屬于飼料添加劑技術領域，具體涉及一種α-半乳糖苷酶軟膠囊飼料添加劑及其制備方法。該方法包括以下步驟：1)向磷酸鹽緩沖溶液中加入α-Gal，然后加入β-CD，再經過均質后靜置反應，至反應終點，得到α-Gal—β-CD添加液；2)將B型明膠加入水中，充分溶脹后加入甘油、防腐劑和二氧化鈦，混合均勻進行膠化，得到膠料；3)灌裝。通過本發明得到的軟膠囊添加劑利用環糊精抑制劑對α-Gal的抑制作用，使動物飼料中的α-Gal酶活，經歷一個先低后高的過程，從而使飼料中的α-Gal在更合適的消化時期發揮催化作用。
武漢輕工大學
2021-04-11
生物酶法制備納米級功能性膳食纖維技術
本技術采用花生殼、小麥麩皮、大豆皮等農副產物為原料制備 納米纖維素。首次采用生物酶結合超聲波技術以農副產品為原材料制備納米級 膳食纖維，克服了目前酸法制備納米級膳食纖維污染重、周期長等缺點，建立 了一種高效、綠色、環保制備納米級膳食纖維的新方法；首次開發出納米級膳 食纖維及高纖維食品：包括面制品、淀粉制品、肉制品及功能性飲料制品等， 拓展了納米級膳食纖維的應用范圍。本項目所開發的納米級膳食纖維功能性食 品，兼具優良口感與保健功效，具有良好的市場前景，對建設資源節約型和環 境友好型社會具有重要的促進作用。 生產條件及經濟效益預測：納米膳食纖維素的初步市場估價為 15 萬元/噸。 項目投產后，年加工量 2000 噸的農副產物生產線，估算投資額為 8000 萬，可 產生經濟效益 2.55 億元，實現利稅 1.2 萬元。年加工量 1000 噸的農副產物生 產線，估算投資額為 4000 萬，可產生經濟效益 1.275 億元，實現利稅 8400 萬 元；年加工量 500 噸的農副產物生產線，估算投資額為 2000 萬，可產生經濟效 益 6375 萬元，實現利稅 3200 萬元。
青島農業大學
2021-04-11
速生闊葉材制漿造紙過程酶催化關鍵技術及應用
我國是世界上第一造紙大國，紙和紙板產量已超過全球總產量的25%。但我國木材資源匱乏，充分利用速生闊葉材資源、采用高效清潔制漿造紙技術是從根本上解決我國造紙工業面臨的資源與環境問題的有效途徑。陳嘉川教授領銜的科研團隊在973計劃和國家科技支撐計劃等資助下，歷經10余年，自主研究開發了酶促磨漿技術、酶促消潛技術、酶助漂白技術、酶精制紙漿技術等一系列制漿造紙酶催化綠色新技術，在降低磨漿能耗、消除有毒物污染、提升紙漿品質、改善抄造性能和研發高檔紙基新材料等方面取得了突破，實現了國產木材資源的高效高值化利用。
先后在世界造紙十強企業山東晨鳴紙業集團和國內龍頭企業山東太陽紙業股份有限公司等20余家骨干企業推廣應用，用生物酶催化技術生產出了優質木漿，并用于高級紙基材料的生產，實現了速生闊葉材的高效高值化利用，并產生了重大的經濟效益和社會效益。過2012-2014三年時間累計實現新增銷售額130.1億元，利潤25.6億元。
齊魯工業大學
2021-04-22
茶樹咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP及其應用
本發明提供茶樹咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP及其在制備轉基因植物中的應用.本發明以茶樹DNA為模板,用GenomeWalking方法克隆得到茶樹TCS基因啟動子序列,然后利用Gateway技術構建重組植物表達載體pKGWFS7TCSP,采用農桿菌介導的煙草遺傳轉化,以表達GUS基因的方式進行啟動子活性功能驗證.本發明首次從茶樹中克隆出特異性咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP,并驗證了其活性,對于揭示茶樹咖啡堿合成的機理,生物調控茶樹咖啡堿的含量具有重要意義.
安徽農業大學
2021-04-29
一種抑制蘋果汁酶促褐變的加工方法
已有樣品/n一種抑制蘋果汁酶促褐變的加工方法。 成果簡介：本成果克服現有技術的不足，提供一種超聲波協同護色劑抑制蘋果汁酶促褐變的方法。本成果篩選出抑制酶促褐變的重要技術參數，對蘋果汁加工過程進行優化，以期為蘋果汁的褐變抑制提供新的方法。附帶地，本成果利用圓二色譜、熒光光譜、粒徑分析、電泳分析等分析技術對蘋果汁中引起褐變的關鍵酶——多酚氧化酶進行結構鑒定，并且對經過超聲波協同護色劑處理后，多酚氧化酶的催化能力及結構變化進行研究，為蘋果汁加工中因酶促褐變引起色澤劣變，以及酶促褐變的抑制機理提供一定的理
華中農業大學
2021-01-12
關于蛋白質訂書機酶實現高效多肽-多肽偶聯反應
高效的 多肽 - 多肽偶聯反應對于 制備蛋白 - 藥物綴合物、調控蛋白質拓撲結構、生物成像 、化學生物學 等 領域 具有重要的意義 ，并因其可基因編碼的特性 而 備受關注 。目前， 研究 報道 此類連接方法 并不太多 見 ，其中 分選酶（ sortase ） 或 蝶豆粘酶 -1 （ butelase 1 ） 介導的偶聯反應具有較好的底物 序列特異性 ， 內含肽 （ intein ） 介導的蛋白質連接方法 可實現 可基因編碼的高效主鏈連接， 而 轉谷氨酰胺酶 （ transglutaminase ） 則 可以 介導 非特異性的 側鏈異肽鍵 偶聯 。近年來 ， 多肽 - 蛋白質反應對 的 蓬勃發展 為此類工具 的 發展 提供了新的契機 。 已 有 諜連接酶（ SpyLigase ）和探連接酶（ SnoopLigase ） 介導 的多肽 - 多肽偶聯體系 見諸報道 ，但其效率仍 有 待提高， 而 其 細 胞內的應用前景仍有待探索。 最近 ， 張文彬課題組發展了 獨特的具有無序結構的 諜訂書機 酶 （ SpyStapler ），可實現 諜標簽 （ SpyTag ）和北大 標簽 （ BDTag ）在 細 胞內和 細 胞外的高效偶聯 （圖 1 ） 。
北京大學
2021-04-11
重組大腸桿菌生產磷脂酶D及轉酯化產品開發
磷脂酶D（PLD, EC 3.1.4.4）是一類廣泛存在于各種生物體的酶，具有水解作用和磷酰基轉移作用（見圖1）。作為一種酶制劑，PLD的轉磷脂酰活性尤為重要，被用于制備具有生物活性的稀有磷脂。其中，以大豆磷脂酰膽堿（PC）為底物，PLD酶法制備磷脂酰絲氨酸（PS），受到廣泛關注。PS作為腦健康營養補充劑，相繼被美國FDA、日本HBM和中國國家衛生計生委所認證，列為新資源食品。相較于提取自牛腦和植物的PS，生物酶法制備的PS，避免了食品安全和植物源含量低的問題。進一步，一些新的結構和功能磷脂，通過P
廈門大學
2021-01-12
基于固定化酶生產低分子量肝素的新工藝
低分子量肝素(LMWH)是臨床上最主要的天然抗凝劑，目前主要是通過動物來源的肝素進行酶降解制得。歐洲藥典要求 LMWH 的分子量為 6000~8000，質量控制是生產 LMWH 的重要環節。而肝素酶的活性和利用率直接影響 LMWH 生產成本和產業經濟。 本項目組利用融合肝素酶 I (Hep I)與甲殼素之間的親和作用，實現酶的循環利用，同時融合酶活性和穩定性提高。利用綠色溶劑體系制備形態完好、尺寸均一的甲殼素微球。用固定化酶制備的 LMWH 產品達到歐洲藥典要求，實現了分子量可控，生產過程可實時監測。該項目將對 LMWH 產業的綠色和經濟生產提供技術支持。目前已發表 SCI 論文 2 篇，并與相關企業開展了合作。
江南大學
2021-04-13
一種具有增強的抑菌效果的噬菌體裂解酶
本發明將裂解酶Bp7e氨基酸的第99位亮氨酸和102位蛋氨酸分別進行突變為丙氨酸和谷氨酸，經原核表達技術得到了突變體蛋白并經Western-blot對其進行了鑒定，命名為Bp7c突變體蛋白。對Bp7e和Bp7e突變體蛋白進行了純化及濃度測定，通過體外裂解實驗及裂解譜檢測得知，純化的Bp7e和Bp7e突變體兩種蛋白具有廣譜的抑菌作用，對溶壁微球菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和多種血清型大腸桿菌均有裂解效果，且Bp7e突變體裂解效果整體優于天然裂解酶Bp7e。
青島農業大學
2021-04-13