一種構(gòu)建多位點突變重組表達質(zhì)粒的高效方法
本發(fā)明公開了一種構(gòu)建多位點突變重組表達質(zhì)粒的高效方法,包括如下步驟:將表達質(zhì)粒pHAT2用雙酶切方法采用兩種限制性內(nèi)切酶NcoI和XhoI酶切產(chǎn)生帶有粘性末端5’?CATG?3’和5’?AGCT?3’線性片段,回收線性化質(zhì)粒片段備用;PCR引物設計;進行三輪PCR反應得到突變表達載體;進行連接反應;構(gòu)建突變表達載體。本發(fā)明具有突變率高、簡單易行的特點。
青島農(nóng)業(yè)大學
2021-04-13