核酸基因藥物的體內遞送載體
項目簡介 基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來核酸及基因藥物得到快速發展,已有多個核酸藥物經FDA批準應用于臨床治療。基因治療相對其它治療方法有著若干優勢,但在實際應用過程中也面臨著一些挑戰。其中,基因輸送載體對于基因治療來說是十分關鍵。目前開發基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導的輸送系統。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長期表達,因此是目前臨床上應用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過程中也暴露出了許多缺陷,這些缺陷大大限制了病毒載體的應用。為了克服病毒載體的諸多不足,近些年來非病毒載體得到了迅速發展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉染試劑之一并且已經被一些研究工作者當成聚合物類基因轉染試劑的“金標準”。 PEI的轉染效率和細胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢和粒徑的影響。隨著分子量的升高,支鏈PEI轉染效率升高;然而,細胞毒性也同時升高。為了消除或降低與PEI有關的細胞毒性,目前已經發展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI,用多糖、親水性聚合物(如PEG)、二硫鍵連接臂、脂質基團等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場上銷售的PEI分子量范圍非常廣泛,從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物,它包括生育酚和生育三烯酚,其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外,還涉及酶活性的調節、基因表達調控以及神經生物學功能等。通過消化道吸收進入血漿的維生素E經受體介導進入肝細胞,進入肝細胞的維生素E又在維生素E結合蛋白的運輸下進入肝外組織。維生素E本身的疏水性質、豐富的生物調節功能以及其受體介導的肝細胞攝取方式都預示著用它來修飾PEI有助于實現基因的器官靶向的遞送。 因此,我們開發了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應用。維生素E的修飾有利于基因質粒的包載、遞送和釋放,其毒性隨著PEI上的維生素E飾數目的增加而降低,維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質粒的細胞攝取后基因編碼蛋白的表達。動物體內實驗表明PEI衍生物可成功將pDNA質粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中,該復合物(PEI/pDNA)能進入肝臟和肺臟細胞并進一步釋放質粒DNA和基因表達。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉染效率高和基因藥物已釋放等優點。項目團隊 項目團隊包括北京大學藥學院湯新景教授,以及課題博士后和研究生組成。湯新景教授為天然藥物及仿生藥物國家實驗室PI,國家自然科學基金委優青、教育部青年長江學者和新世紀人才。應用范圍 該項目可用于核酸基因藥物的包載和遞送材料,實驗研究中的基因遞送試劑盒等。項目階段 目前該項目處于臨床前研究(動物研究階段)。知識產權 已申請專利(201610802130.6),北京大學為唯一專利權人。合作方式 技術轉讓、技術許可、技術入股、共同開發等。
北京大學
2021-04-11