一種檢測靶核酸序列的方法
一、項目分類
關鍵核心技術突破
二、技術分析
(1)本技術能夠在僅使用一種標記探針(即,檢測探針)的情況下,實現對多種靶核酸序列的同時檢測(多重檢測)。
(2)本技術能夠實現對多種靶核酸序列的同時檢測(多重檢測),并且能夠同時檢測靶核酸序列的最大數目遠遠超出了所使用的標記探針(即,檢測探針)的數目。
因此,本技術提供了一種簡單、高效、低成本的多重檢測法。本技術能夠檢測的靶核酸序列的最大數目不受限于所使用的標記探針(即,檢測探針)的數目;能夠基于相對有限數目的標記探針(即,檢測探針)實現對顯著更多數量的靶核酸序列的同時檢測(多重檢測),這是特別有利的。
對比國內外同類技術,本技術的優勢包括:①標記過程極為方便且成本低。假設同樣需要識別15種高危型HPV,已商品化的實時PCR檢測試劑盒、已報道的多管實時PCR檢測體系、包括實時PCR熔解曲線技術均需要15條熒光探針進行檢測。而本技術只需要4條熒光探針就可以完成15種高危型HPV的識別。②熔點溫度不會受待檢DNA序列的多態性位點或二級結構的影響。傳統實時PCR技術和熔解曲線分析技術的檢測結果經常會受到熒光探針覆蓋區的SNP或二級結構的干擾。而本技術中熒光探針只與標簽序列雜交,因此檢測獲得的熔點溫度可以保持恒定。③具備優秀的兼容能力,一個熔點標簽庫可以適用于不同領域多個對象的檢測,而且針對不同的檢測對象可以采用相同的檢測流程,試劑組份只需要更換雜交探針,設計上只需改動雜交探針的特異雜交序列。這種體系兼容能力大幅度縮短了新體系的研發時間。④判讀統一規范,易于在臨床應用中推廣。目前大部分檢測技術針對不同的檢測對象需要建立不同的判讀標準。而本技術則可以像條形碼一樣標記不同的檢測對象,因此較容易實現自動化判讀。
廈門大學
2022-07-28