一種提高釀酒酵母合成蟲草素的方法、釀酒酵母工程菌
本發明涉及微生物基因工程技術領域,具體涉及一種提高釀酒酵母合成蟲草素的方法、釀酒酵母工程菌。本發明通過將來源于蛹蟲草的密碼子優化后的2’?羰基?3’?脫氧腺苷還原酶基因和3’?腺苷單磷酸磷酸水解酶基因使用質粒進行表達,然后將質粒轉化至宿主細胞中得到釀酒酵母工程菌,再將活化后的釀酒酵母工程菌經種子培養得到的種子液接種至含有代謝效應物的發酵培養基中進行發酵培養合成蟲草素。本發明通過在發酵培養基種添加代謝效應物(Cu<supgt;2+</supgt;、Fe<supgt;2+</supgt;、Mg<supgt;2+</supgt;、Zn<supgt;2+</supgt;、檸檬酸、半胱氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、VB<subgt;1</subgt;和茶多酚),并對代謝效應物的種類和濃度進行優化,顯著提高了蟲草素的產量和合成效率。通過使用本發明獲得的菌株和最優效應物組合,在發酵罐中蟲草素的產量達到2.9g/L。
南京工業大學
2021-01-12