植物紅細胞凝集素單體的純化工藝
植物紅細胞凝集素,學名Phytohemagglutinin-E (PHA-E),參考產品為Sigma公司產品,貨號為L8629。 凝集素是從豆科植物種子中提取的一種含糖蛋白質,植物凝集素具有刺激外周血淋巴細胞RNA合成和有絲分裂,促進免疫反應,使細胞凝聚,腫瘤細胞失活,以及誘發人外周血淋巴細胞產生抗癌淋巴因子等生物學活性。PHA是由E、L兩種亞基組成的四聚體蛋白質的混合物,按其亞基組成可分為L4、L3E、L2E2、LE3、E4具有相同物化性質和不同生物學活性的同工凝集素。其中紅細胞凝集素(Erythrohemagglutinin ,PHA-E)含有4個相同的E亞基,具有最強的紅血球凝集功能,沒有白細胞凝集能力。 產品-紅細胞凝集素是由英國紅蕓豆(俗稱紅腰豆,屬于常見雜糧)為原料,采用親和純化技術制備得到,屬于植物提取蛋白質,產品為白色粉末,安全無毒。目前,紅細胞凝集素主要作為體外診斷試劑的重要組成部分,應用于去除臨床血液樣本中的紅細胞。使得最終檢驗結果快速準確,有效避免了傳統采用離心方法分離血漿和紅血球中出現的細胞破裂等問題,因此近年來廣泛用于臨床和科研上凝集去除血液中的紅細胞。 我們建立了一套低成本快速的分離純化工藝,能特異性純化得到PHA-E,同時生產成本能下降至進口同類商品售價的5%以下。該工藝不需要太多設備,普通實驗室即可完成200mg-1000mg規模生產。產品質量已經得到國外公司的肯定。目前國內尚無該產品銷售。
成都醫學院
2015-01-08