基于核酸適配體的抗生素快速檢測試紙
抗生素能有效防治動物疾病并促進生長,在畜牧業(yè)、養(yǎng)蜂業(yè)等領(lǐng)域被大量使用。而超過規(guī)定的濫用會造成抗生素在動物源性食品及環(huán)境中積累,對人體健康和環(huán)境安全產(chǎn)生危害。抗生素傳統(tǒng)檢測方法比如微生物檢測、HPLC 等理化分析不僅靈敏度低,而且不能滿足對食品和水源等抗生素含量的現(xiàn)場檢測。目前市場上有一些基于抗體的抗生素檢測試劑,但抗體種類有限,質(zhì)量良莠不齊。核酸適配體本質(zhì)上以單鏈 DNA 為主,不僅能特異性識別抗生素,而且具有親和力高、溫度穩(wěn)定性好、成本低、質(zhì)量高度穩(wěn)定等特性,有望取代抗體在抗生素快檢試劑中充當靶分子識別元件。 本實驗室長期以來致力于抗生素特異性適配體的篩選和優(yōu)化,已獲得一批能高特異性高親和力結(jié)合抗生素的適配體序列。利用這些適配體研制了抗生素 快速檢測試紙。以卡那霉素為例,利用卡那霉素特異性適配體修飾的金納米粒子(AuNPs-apt)作為探針,與適配體互補的寡核苷酸 DNA1 修飾的銀納米粒子(AgNPs-DNA1)作為信號放大元件,設(shè)計制備的試紙能夠在 10 min 之內(nèi)完成檢測,利用肉眼辨別的檢測限可達到 35 nmol/L,遠低于歐盟規(guī)定乳制品中卡那 霉素含量不得超過 150 μg/kg (約 265 nmol/L)。若采用膠體金讀數(shù)儀,不僅可實現(xiàn)定量測定,檢測限更可達到 80 pmol/L。對于蜂蜜等成分相對簡單的樣品,可直接用試紙進行測定。對于牛奶、奶粉、肉類等成分較復雜或非液態(tài)樣品,須經(jīng)簡單樣品處理后測定。樣品處理過程可采用標準化流程,時間小于 30 min。
江南大學
2021-04-11