目的基因轉(zhuǎn)化甜櫻桃的方法及其在甜櫻桃原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用
本發(fā)明公開了目的基因轉(zhuǎn)化甜櫻桃的方法及其在甜櫻桃原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用。本發(fā)明公開的甜櫻桃轉(zhuǎn)化方法包括:將甜櫻桃果肉愈傷組織進(jìn)行懸浮繼代培養(yǎng),得到懸浮細(xì)胞;將懸浮細(xì)胞用CPW13M進(jìn)行處理,得到CPW13M處理的懸浮細(xì)胞,CPW13M為向細(xì)胞?原生質(zhì)體清洗液中加入甘露醇得到的甘露醇質(zhì)量百分比濃度為11%?15%的溶液;用纖維素酶和果膠酶酶解CPW13M處理的懸浮細(xì)胞得到甜櫻桃原生質(zhì)體;以甜櫻桃原生質(zhì)體為受體進(jìn)行甜櫻桃轉(zhuǎn)化。實(shí)驗(yàn)證明,本發(fā)明的甜櫻桃轉(zhuǎn)化方法可以將目的基因在甜櫻桃原生質(zhì)體中進(jìn)行瞬時表達(dá),可以用來進(jìn)行目的基因的功能驗(yàn)證及蛋白質(zhì)和細(xì)胞器的定位,還可用來檢測蛋白質(zhì)互作及細(xì)胞代謝。
中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11