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    sPR(表面等離子共振)生物傳感技術(shù)是近年來(lái)迅速發(fā)展起來(lái)的用于分析生物分子相互作用的一項(xiàng)技術(shù)。這種檢測(cè)手段與傳統(tǒng)方法比較,具有樣品不需要純化、標(biāo)記,并且可以實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)、高靈敏檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn),因此SPR傳感器在很多領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景,如疫苗研制、疾病診斷、疾病治療、藥物靶標(biāo)、藥物開發(fā)、基因測(cè)序、案件偵破、環(huán)境檢測(cè)、食品安檢以及興奮劑檢測(cè)等。本項(xiàng)目的目的是研制一種基于SPR技術(shù)的光機(jī)電一體化系統(tǒng)。    技術(shù)原理:    SPR生物傳感系統(tǒng)利用光在全反射時(shí)入射光與金屬表面的等離子發(fā)生共振的原理探測(cè)生物分子之間是否發(fā)生相互作用以及結(jié)合的動(dòng)力學(xué)參數(shù),是生物學(xué)、化學(xué)、物理學(xué)等多個(gè)學(xué)科有機(jī)結(jié)合的產(chǎn)物。    工藝流程    傳感器制作、敏感膜制備、光學(xué)子系統(tǒng)構(gòu)建、測(cè)試子系統(tǒng)構(gòu)建、分析軟件開發(fā)。    主要技術(shù)性能指標(biāo):    系統(tǒng)靈敏度為9681度/RIU,分辨率為3.59×104RIU,可檢測(cè)DNA分子相互作用引起的折射率變化范圍為1.00~143RIU    技術(shù)水平及用途    所開發(fā)的試驗(yàn)系統(tǒng)已經(jīng)達(dá)到了國(guó)際先進(jìn)水平,2004年通過(guò)省級(jí)技術(shù)鑒定。申請(qǐng)專利兩項(xiàng):1.專利(申請(qǐng))號(hào):2004100940901:2專利(授權(quán))號(hào):2L2004200562763產(chǎn)品化后,可以用于疫苗研制、疾病診斷、疾病治療、藥物靶標(biāo)、藥物開發(fā)、基因測(cè)序案件偵破、環(huán)境檢測(cè)、食品安檢以及興奮劑檢測(cè)等。

1.痛點(diǎn)問(wèn)題 細(xì)胞中蛋白和DNA相互作用對(duì)于細(xì)胞個(gè)體的生命活動(dòng)至關(guān)重要，但是目前在極小量細(xì)胞樣本中檢測(cè)DNA蛋白相互作用的方法手段尚不成熟；而相關(guān)方法的升級(jí)可以極大地推動(dòng)相關(guān)生命科學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的發(fā)展，諸如早期胚胎發(fā)育、腫瘤免疫、神經(jīng)生物學(xué)等。 2.解決方案 本項(xiàng)成果基于ChIC手段，通過(guò)改造后的可以識(shí)別抗體的融合轉(zhuǎn)座蛋白，特異性識(shí)別和標(biāo)記基因組上對(duì)應(yīng)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，并通過(guò)PCR擴(kuò)增和二代測(cè)序，繼而通過(guò)生物信息學(xué)分析，獲取相應(yīng)蛋白的DNA結(jié)合信息。 3.合作需求 尋找合適的應(yīng)用場(chǎng)景，重點(diǎn)包括基于進(jìn)一步樣品小量化，例如單細(xì)胞情況下應(yīng)用該方法。

脫堿基位點(diǎn)（abasic site）是最常見的一種DNA損傷。據(jù)估計(jì)，人體的每個(gè)細(xì)胞每天能產(chǎn)生5000到10000個(gè)脫堿基位點(diǎn)。沒(méi)有及時(shí)修復(fù)的脫堿基位點(diǎn)會(huì)阻礙RNA聚合酶的轉(zhuǎn)錄和DNA聚合酶的復(fù)制功能，從而可能導(dǎo)致進(jìn)一步的突變，造成基因組的不穩(wěn)定性，甚至癌癥的發(fā)生。 此前的研究主要針對(duì)雙鏈DNA上的脫堿基位點(diǎn)的損傷修復(fù)。最近，HMCES蛋白及其同源蛋白yedK被發(fā)現(xiàn)可以保護(hù)單鏈DNA上

探索天然產(chǎn)物生源合成途徑對(duì)于天然產(chǎn)物合成以及化學(xué)生物學(xué)研究具有重要意義。例如生源合成途徑中的“環(huán)化/后期氧化”（cyclization/late-stage P450-mediated oxidation）策略被運(yùn)用于一系列具有抗癌活性二萜的全合成中。生源合成上，從共同的生源前體香葉基香葉基焦磷酸（GGPP）出發(fā)，通過(guò)萜類環(huán)化酶（terpenoid cyclase）催化的多步碳正離子環(huán)化和重排反應(yīng)可產(chǎn)生各種二萜類天然產(chǎn)物，例如抗癌藥物紫杉醇 （Taxol）、巨大戟醇（ingenol）和抗生素截短側(cè)耳素 (pleuromutilin)。因此，人們對(duì)二萜類天然產(chǎn)物的生物合成和仿生合成進(jìn)行了廣泛的研究。 香茶菜屬（Isodon）二萜是一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜的多環(huán)活性天然產(chǎn)物，迄今為止已分離鑒定出1000多種該家族天然產(chǎn)物。與諸多其他二萜天然產(chǎn)物一樣，其生源合成是從GGPP出發(fā)，通過(guò)一些列酶促環(huán)化反應(yīng)得到共同的生源前體隨后通過(guò)碳正離子重排得到已知的香茶菜屬（Isodon）二萜結(jié)構(gòu)，包括ent-kaurane型，jumgermannenone型和ent-beyerene型。生源推測(cè)不同類型香茶菜屬二萜的骨架之間的轉(zhuǎn)化也是通過(guò)碳正離子重排實(shí)現(xiàn)的。例如最初的生源途徑認(rèn)為，jungermannenone 型是從ent-kaurane 型通過(guò)兩種可能的碳正離子重排而來(lái)。

鄭州水熱合成反應(yīng)釜（HZ-100ML） 1.用   途     水熱合成反應(yīng)釜是為在一定溫度、一定壓力條件下合成化學(xué)物質(zhì)提供的反應(yīng)器。它廣泛應(yīng)用于新材料、能源、環(huán)境工程等領(lǐng)域的科研試驗(yàn)中，是高校教學(xué)、科研單位、化工實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行科學(xué)研究的常用小型反應(yīng)器。   2．特    點(diǎn)       水熱合成反應(yīng)釜采用優(yōu)質(zhì)不銹鋼加工而成。內(nèi)膽為聚四氟乙烯材質(zhì)。外形美觀、使用方便。釜體與釜蓋擰緊即可起到密封作用、密封效果長(zhǎng)期穩(wěn)定無(wú)泄漏。       水熱合成反應(yīng)釜采用外加熱方式，以縮小體積，并有利多反應(yīng)釜處于同一反應(yīng)操作溫度（如將多個(gè)反應(yīng)釜置于烘箱中加熱）。   3．主要技術(shù)指標(biāo)   （1）．工作溫度：≤220℃   （2）．工作壓力：≤3MPa   （3）．升溫、降溫速率：≤5℃/min   （4）.規(guī)格25ml，50ml，100ml，200ml、500ml、800ml、1000ml、2000ml、5000ml另可根據(jù)用戶需求（溫度、外形）定做。   4.  操作方法       將反應(yīng)物系指與釜體內(nèi)，并保證加料系數(shù)小于0.8。當(dāng)反應(yīng)物系有腐蝕性時(shí)要將其置于四氟襯套內(nèi)，方可保證釜體不受腐蝕。   水熱合成反應(yīng)釜置于加熱器內(nèi)，按照規(guī)定的升溫速率升溫至所需反應(yīng)溫度（小于規(guī)定的安全使用溫度）。待反應(yīng)結(jié)束將其降溫時(shí)，也要嚴(yán)格按照規(guī)定的降溫速率操作，以利安全和反應(yīng)釜的使用壽命。當(dāng)確認(rèn)腹內(nèi)溫度低于反應(yīng)物系種溶劑沸點(diǎn)后方能打開釜蓋進(jìn)行后續(xù)操作。  

谷胱甘肽（glutathione, GSH）是由谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）和甘氨酸（Gly）通過(guò)肽鍵形的三肽化合物，為生物體中含量最豐富的小分子巰基醇類化合物，具有重要生理功能，可用于抗輻射、腫瘤、癌癥、氧中毒、衰老和協(xié)調(diào)內(nèi)分泌的治療，并是臨床上大規(guī)模使用的保肝類藥物，還廣泛用于食品、運(yùn)動(dòng)營(yíng)養(yǎng)學(xué)、保健品和化妝品，市場(chǎng)前景廣闊。國(guó)內(nèi)的GSH生產(chǎn)工藝開發(fā)多沿用國(guó)外公司的發(fā)酵方法，但發(fā)酵法到目前為止未能取得突破，因此沒(méi)有成功產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，目前國(guó)內(nèi)制藥企業(yè)所用的GSH制藥原料全部依賴進(jìn)口。本項(xiàng)目為華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研制，通過(guò)構(gòu)建反應(yīng)速率快、轉(zhuǎn)化率和生產(chǎn)水平高的重組菌株，開發(fā)優(yōu)化培養(yǎng)工藝，可以實(shí)現(xiàn)谷胱甘肽發(fā)酵水平達(dá)到3500 mg/L，生產(chǎn)強(qiáng)度超過(guò)250mg/L/H，達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模效果良好，小試工藝成熟，相關(guān)技術(shù)已申請(qǐng)中國(guó)專利，具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。

中性粒細(xì)胞是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分，在腫瘤的遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移中起著重要作用。既往多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，中性粒細(xì)胞在各種細(xì)胞因子、病原微生物或PMA、LPS等化合物刺激下，會(huì)將自身的核酸以及蛋白等物質(zhì)釋放出來(lái)，形成以DNA為骨架，鑲嵌著彈性蛋白酶、髓過(guò)氧化物酶等顆粒蛋白的網(wǎng)狀樣結(jié)構(gòu)，稱為中性粒細(xì)胞胞外捕獲網(wǎng)（Neutrophil Extracellular Traps, NETs）。最初的研究發(fā)現(xiàn)，NETs可以捕獲病原體，并通過(guò)局部高濃度的抗菌蛋白消滅病原體。近年來(lái)人們也發(fā)現(xiàn)，NETs里面的DNA成分即NET-DNA也參與了腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。但之前的研究更多的是集中在動(dòng)物模型，NET-DNA在腫瘤患者遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移的作用以及臨床意義仍不明確。此外，NET-DNA促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制也未得到詳細(xì)的闡述。       該課題組從臨床標(biāo)本出發(fā)，發(fā)現(xiàn)NETs主要浸潤(rùn)在乳腺癌、結(jié)腸癌患者的肝轉(zhuǎn)移組織，且血清NETs可以預(yù)測(cè)早期乳腺癌患者肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生，提示在腫瘤發(fā)生肝轉(zhuǎn)移前，NETs可能浸潤(rùn)于肝組織并促進(jìn)腫瘤肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生。 在機(jī)制方面，該課題組發(fā)現(xiàn)NET-DNA可以充當(dāng)趨化腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的趨化因子，在不同小鼠模型中，發(fā)現(xiàn)肝臟或者肺組織中的NETs可吸引腫瘤細(xì)胞導(dǎo)致遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)生。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞膜上存在NET-DNA受體CCDC25，CCDC25通過(guò)識(shí)別胞外的NET-DNA，激活I(lǐng)LK-β-parvin細(xì)胞骨架信號(hào)通路，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)。既往研究認(rèn)為DNA感受器主要位于胞內(nèi)，該研究首次發(fā)現(xiàn)存在細(xì)胞膜上的DNA感受器。       尚未有研究深入探討CCDC25在腫瘤細(xì)胞中的作用，該蛋白是否可以成為治療靶點(diǎn)更是不為人知。該課題組通過(guò)多種模型進(jìn)行驗(yàn)證：1.在乳腺癌自發(fā)成瘤鼠（MMTV-PyMT）中敲除CCDC25； 2.乳腺癌細(xì)胞株以及原代乳腺癌細(xì)胞敲除CCDC25后接種于小鼠；3.在接種乳腺癌細(xì)胞株的小鼠腹腔注射中和抗體。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：靶向CCDC25可以減少乳腺癌遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移的發(fā)生。因此，該研究為乳腺癌患者遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移提供新的靶點(diǎn)及治療策略。

胃癌在世界范圍內(nèi)和我國(guó)均是最常見的惡性腫瘤之一，根據(jù)世界 衛(wèi)生組織公布的全球統(tǒng)計(jì)報(bào)告[1]，全球新發(fā)胃癌 98,9000 例，發(fā)病率 為 17.6/10 萬(wàn)人，僅次于肺癌居第二位。早期胃癌是病灶局限于胃黏 膜和黏膜下層，不考慮是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因無(wú)明顯癥狀和局部體征， 常不足以引起患者和醫(yī)師的足夠重視而發(fā)生誤診或漏診。 目前，制備腫瘤細(xì)胞單鏈 DNA 適配子的方法主要涉及到隨機(jī)單 鏈 DNA 文庫(kù)和引物的構(gòu)建、聚合酶

該項(xiàng)目為1998年武漢市科委科技攻關(guān)項(xiàng)目，2000年通過(guò)專家鑒定,達(dá)國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平。安賽蜜甜度為蔗糖的200倍，易溶于水，協(xié)同性好，熔點(diǎn)為225 oC（分解）。尤其是在酸性飲料中也有很好的穩(wěn)定性和甜度，而且安賽蜜在人體內(nèi)不代謝、不吸收、不蓄集，24小時(shí)內(nèi)可完全排出體外，具有很高的安全性，是世界公認(rèn)的最具有發(fā)展?jié)摿Φ奶鹞秳┬缕贩N之一。