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1、成果來源、成果被評價及認定（發明專利授權號）等情況 本項目來源于國家“十二五”科技支撐計劃項目“大宗糧食綠色加工技術與 產品”中課題“玉米淀粉加工關鍵技術研究與示范（2012BAD34B07，479 萬元， 研究起止時間：2012.01-2014.12）”和國家自然科學基金“酶法選擇性合成單一 類型環糊精的控制策略研究（31101228，25 萬元，研究起止時間：2012.01- 2014.12）”，屬于農產品深加工科學技術領域。本項目累計申請發明專利 7 項（1 項獲授權），發表論文 11 篇（8 篇被 SCI 收錄），于 2015 年 7 月通過中國糧油學 會鑒定，獲國際先進評價。 2、主要技術內容、作用、對行業的意義，獲獎情況 CGT 酶生產環糊精最不利的條件之一是產物特異性差，給產物的分離純化 帶來很大不便。同時，CGT 酶存在的另一大缺陷是其熱穩定性較差，由于在環糊 精工業化生產中，底物淀粉首先要經過高溫糊化、液化處理，然后降溫至適當溫 度進行環化反應，若 CGT 酶能夠適應更高的反應溫度，勢必有助于提高反應效率， 因此，有必要改善 CGT 酶的熱穩定性，提高其催化效率，進而有效降低環糊精生20 產成本。本項目主要是通過改善 CGT 酶產物特異性和熱穩定性，提高該酶的使用 性能，將其應用于環糊精的工業化生產中，能顯著降低環糊精的生產成本，促進 環糊精在各個領域的廣泛應用。因此，隨著環糊精在食品、醫藥等領域中的應用 越來越廣闊，開發改善 CGT 酶使用性能的關鍵技術顯得尤為重要，具有很好的推 廣應用前景。 3、成果的技術指標、創新性與先進性 本項目在長期從事淀粉生物轉化研究的基礎上，針對環糊精工業化生產過程 中 CGT 酶的產物特異性和熱穩定性較差問題，通過深入研究和不懈努力，逐步改 善了 CGT 酶的產物特異性和熱穩定性，突破了關鍵技術，并實現了具有理想產物 特異性和熱穩定性的β-CGT 酶突變體在酶法生產β-環糊精中的應用。該酶使用 性能改善易操作，具有很好的應用價值，技術位于國際領先水平。與國內外同類 技術相比，具有以下創新： ①針對 CGT 酶產物特異性較差的問題，確定了 CGT 酶的產物特異性與其一級 結構的相關性，獲得構建具有理想產物特異性的 CGT 酶突變體的簡單可行方法， 為從本質上改善 CGT 酶的產物特異性提供理論基礎； ②針對 CGT 酶熱穩定性較差的問題，采用定點突變技術闡明了重要氨基酸殘 基對 CGT 酶熱穩定性產生影響的規律，獲得了構建具有理想熱穩定性的 CGT 酶突 變體的簡單可行方法，為從根本上改善 CGT 酶的熱穩定性打下了基礎； ③ CGT 酶使用性能的改善方法簡單易行，所得到具有理想產物特異性和熱 穩定性的酶突變體可直接應用于β-環糊精的工業化生產，能提高β-環糊精的得 率，降低β-環糊精的生產成本。 

隨著首個RNA修飾N6-甲基腺嘌呤（m6A）的去修飾酶FTO的發現，RNA表觀遺傳學/表觀轉錄組學開始興起并成為表觀遺傳學新的研究熱點。m6A作為首個被發現的可逆RNA修飾，廣泛存在于mRNA，依賴修飾酶、去修飾酶和結合蛋白發揮調控功能。已發現m6A具有調控mRNA剪接、出核、穩定性和蛋白翻譯等功能，可以參與發育、配子發生、細胞重編程、生物節律、疾病等多種生理和病理過程的功能調控。為了更好地研究m6A生物功能和臨床病理研究，開發m6A高通量測序技術一直是研究的熱點。 現有m6A測序技術主要依賴于m6A抗體富集技術，包括低分辨率的m6A-seq/MeRIP-seq和聯用iCLIP或PAR-CLIP技術的高分辨率m6A測序技術miCLIP 或PA-m6A-seq。抗體存在對特定RNA序列或結構的潛在非特異性結合，為了解決抗體方法的種種問題，研究者們做出了各種嘗試，近期開發了兩類無需抗體的m6A測序技術，一類為利用對特定甲基化序列（m6ACA）敏感的RNA核酸內切酶MazF輔助的測序方法（m6A-REF-seq or MAZTER-seq），此類方法只能檢測16~25%的m6A位點；另一種是在細胞內表達融合m6A-binding domain（YTH）與胞嘧啶脫氨酶（APOBEC1）的融合蛋白實現的m6A測序（DART-seq），但該方法依賴于細胞轉染效率且受限于體外樣品的使用。 賈桂芳課題組一直致力于開發和利用核酸化學生物學技術研究RNA化學修飾在動植物中的生物功能研究。在本課題中，賈桂芳課題組巧妙地利用m6A的去甲基酶FTO蛋白作為催化劑，將mRNA上化學惰性的m6A轉化為高反應活性的中間態產物N6-羥甲基腺嘌呤（hm6A），然后利用二硫蘇糖醇（DTT）的巰基與hm6A發生亞胺1,2加成反應，將不穩定的hm6A轉化為更穩定的巰基加成產物dm6A。dm6A上的自由巰基可以與甲烷硫代磺酸（methanethiosulfonate，MTSEA）快速反應，實現在mRNA上m6A的位置標記生物素Biotin，最終可被鏈霉親和素珠捕獲，從而富集含有m6A修飾的RNA片段供后續高通量測序使用。

本發明公開了一種鈣依賴型蛋白激酶CPK32及其編碼基因和應用。本發明的鈣依賴型蛋白激酶CPK32，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其編碼基因的CDS序列如SEQ ID NO.2所示。本發明發現CPK32基因導入目的植物中后能夠調節目的植物的開花時間、調節抽薹時的葉片數目或調節目的植物中FLC的表達量。本發明的鈣依賴型蛋白激酶CPK32對于改良作物的開花時間具有重要調節作用，在作物的種質資源改良中具有較大應用價值。

將β-環糊精和偶氮苯基團分別修飾于紫杉醇分子上，利用紫杉醇分子骨架與微管蛋白的特異性結合能力，以及在紫外和可見光照射下偶氮苯分子與β-環糊精空腔可逆鍵合的性質，來調控微管蛋白的聚集狀態，進而影響細胞活性。光譜實驗表明，含有紫杉醇的偶氮苯分子在溶液中具有優異的光致異構性質、掃描電鏡實驗發現，只有在反式偶氮苯修飾紫杉醇和β-環糊精修飾紫杉醇共同存在下，微管蛋白間才能發生明顯的聚合現象，同時微管蛋白的形貌由絲狀聚合物轉變成了粒徑較大的球狀納米粒子。通過對細胞染色進一步發現，聚集后的微管廣泛分布在細胞中，能夠強烈改變細胞的形態并最終導致細胞死亡。該工作為調控生物大分子的聚集行為提供了一種新的策略。

1.簡介 簡單介紹項目/成果背景，解決的行業瓶頸問題或行業共性關鍵問題。 目前核桃加工主要是通過冷榨法制取核桃油，同時獲得富含蛋白的核桃粕。由于核桃壓榨時，一般都不脫除核桃衣，導致了核桃粕的食用性能差，一般只用做飼料。本項目將核桃進行脫衣，再通過水提和分離，實現油脂體和蛋白的高效分離。在不使用有機溶劑和酶制劑的條件下，將油脂體加工成核桃油和蛋白-磷脂濃縮物，并同時制取高純度核桃蛋白。 2.創新要點 介紹本項目的主要創新點，總體水平（處于國內/國際先進/領先水平等）。 （1）除了制取核桃油，還可同步制取蛋白-磷脂濃縮物，可作為天然乳化劑； （2）除了制取上述兩種核桃油脂產品，還可同步制取貯藏性能佳的高純度核桃蛋白粉。 通過與現有核桃加工技術的對比，本項目處于國際領先水平。 3.關鍵指標 （1）每千克核桃仁，可制取580g左右的核桃油，30g左右的蛋白-磷脂濃縮物，100g左右的核桃蛋白粉（蛋白含量80%以上）； （2）蛋白-磷脂濃縮物成分含量：67%中性脂質、10%具有極佳乳化性能的膜蛋白、9%核桃蛋白、7%磷脂、7%其它成分（包含鞘氨醇等）； （3）核桃蛋白粉中的精氨酸含量高達13%，是精氨酸的良好來源。

蛋白質之間的相互作用對生命活動至關重要。盡管已有不少體內研究蛋白互作的方法，但由于許多蛋白互作是高度動態的，因此用傳統的方法難以捕獲。本研究基于“招募”和“聚集”的原理，即將“誘餌”蛋白A錨定在線粒體的外膜上，如B蛋白能與A蛋白互作，則將被“捕獲”到線粒體外膜，發生富集；如C蛋白不與A蛋互作，則不會發生定位變化（圖1）。文章首先用線粒體錨定（Mito-docking）的方法有效驗證了G蛋白亞基γ2和β1間的互作，并進一步運用該方法研究了核轉運受體（importinαisoforms）與貨物蛋白（經典的核定位信號cNLS）之間的互作，揭示了核轉運受體-貨物蛋白的識別特異性

一種類轉錄激活因子(TranscriptionActivatorLikeEffectors，TALE)，其特征在于所述類轉錄激活因子(TALE)能夠與人類CCR5基因活性區域或者CXCR4基因活性區域中的DNA片段識別并結合，所述人類CCR5基因活性區域一共有3個，所述CXCR4基因活性區域一共有2個。TALE與核酸內切酶連接形成融合蛋白TALEN，利用該TALEN對CCR5基因或者CXCR4基因的特定位點進行剪切，可以使得進行基因調控后的細胞具備抵御HIV病毒的能力。

已有樣品/n一種從雞蛋黃中提取分離免疫球蛋白IgY的方法?！　〕晒喗椋罕景l明屬于蛋白質分離純化技術領域，具體涉及一種從雞蛋黃中提取分離免疫球蛋白IgY的方法。現有技術中通常采用水稀釋法、有機溶劑抽提沉淀法、超濾、超臨界萃取、鹽析、層析等方法提取分離IgY，然而這些方法普遍存在著步驟多、批量小、試劑耗量大和回收率低等問題。本發明的目的是克服現有技術的缺陷，提供一種分離效果好，產品純度高的雞蛋黃免疫球蛋白IgY的提取分離方法。該方法包括先用水稀釋法獲得水溶性組分，再用聚乙二醇沉淀法粗提免疫球蛋白IgY

研發階段/n一種牛奶中人乳鐵蛋白篩查試紙條及制備方法，該專利技術可在30分鐘內檢測牛奶中是否有轉入的外源人乳鐵蛋白。

本發明公開了一種魚類NKEF-A重組蛋白對適應性體液免疫的活化效應及其應用，所述的應用為用于制備能夠促進魚類體液免疫能力的免疫增強劑，所述魚類NKEF-A重組蛋白的氨基酸序列為SEQID?NO:1所示；本發明提供的NKEF-A重組蛋白作為適應性體液免疫增強劑，其優點在于：(1)使用劑量小，效率高；以1:100(NKEF-A蛋白:抗原)的NKEF-A重組蛋白劑量即可發揮顯著的免疫促進作用；(2)易于制備免疫混合液：NKEF-A重組蛋白是可溶性蛋白，容易與抗原混合，克服了傳統礦物油乳劑類制劑不易乳化抗原的缺點；(3)安全性高；與細菌毒素或化合物制劑不同，NKEF-A是宿主自身的蛋白，不存在外源物質導入產生的潛在毒副作用。