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蘇氨酸工業(yè)生產(chǎn)菌代謝工程系統(tǒng)改造
本成果從一株高產(chǎn) L-異亮氨酸的 C. glutamicum 出發(fā)，運用反向代謝工程策略對其代謝通路進行理性重排，以期實現(xiàn) L-蘇氨酸高產(chǎn)，特別是近期，通過熱誘導丙酮酸羧化酶和蘇氨酸外排泵創(chuàng)蘇氨酸產(chǎn)率紀錄，開發(fā)了一種兩段式溫控發(fā)酵蘇氨酸的重組大腸桿菌和工藝，發(fā)酵罐蘇氨酸摩爾轉(zhuǎn)化率達 103.28%。這套復 雜中心代謝途徑的自我調(diào)控維持了生產(chǎn)和生長的平衡。論文用實驗室前期構(gòu)建的一株產(chǎn)蘇氨酸的重組大腸桿菌 TWF001 為宿主，首先編輯了涉及副產(chǎn)物有機酸合成、產(chǎn)物降解和轉(zhuǎn)運的基因，并證實這一系列菌種在 37 度升至 42 度情況下的生長情況等同正常 37 度發(fā)酵；然后用一套大腸桿菌熱敏啟動子去轉(zhuǎn)錄四環(huán)素啟動子阻遏蛋白，四環(huán)素啟動子后的報告基因 37 度表達，42 度不表達。
江南大學
2021-04-11
微生物轉(zhuǎn)化制造 L-瓜氨酸的方法
利用自主篩選、鑒定和保藏的一株產(chǎn)精氨酸脫亞氨基酶（ADI）的惡臭假單胞菌 CGMCC1347，通過發(fā)酵培養(yǎng)其微生物細胞，用于轉(zhuǎn)化精氨酸生成 L-瓜氨酸，用 5L 發(fā)酵罐發(fā)酵 20 小時產(chǎn)酶活力達到 2.17U/mL。采用卡拉膠等凝膠包埋固定化細胞反復分批轉(zhuǎn)化 10 次，酶活力不減。用固定化細胞固定床反應器進行連續(xù)轉(zhuǎn)化，連續(xù) 30 天以上，連續(xù) 30 天 mol 轉(zhuǎn)化率穩(wěn)定在 90-99％，30 天平均稀釋速率 D=0.0735 h-1，固定床反應器生產(chǎn)效率平均 6.34 g L-1 h-1，固定化細胞生產(chǎn)能力 0.0108 g h-1 g -1。本技術的特點是高產(chǎn)精氨酸脫亞氨基酶（ADI）的惡臭假單胞菌菌株能高效轉(zhuǎn)化精氨酸生成 L-瓜氨酸，對底物總摩爾轉(zhuǎn)化率高，轉(zhuǎn)化后的產(chǎn)物純度高，作為生物催化劑的微生物細胞易于培養(yǎng)且安全無毒，生物轉(zhuǎn)化反應條件溫和，環(huán)境友好。固定化細胞可反復利用多次，或裝柱連續(xù)轉(zhuǎn)化。
江南大學
2021-04-11
抗肝癌、黑素瘤藥物－重組精氨酸脫亞胺酶的制備
精氨酸脫亞胺酶（Arginine deiminase，EC 3.5.3.6，ADI）因其可以作為 精氨酸營養(yǎng)缺陷型腫瘤細胞（如：肝癌、黑素瘤）的靶向治療藥物而受到廣泛關注。目前，進入癌癥臨床研究的僅有支原體來源的 ADI，處于臨床三期試驗。本項目從自然界篩選到產(chǎn)精氨酸脫亞胺酶的變形假單胞菌，在大腸桿菌實現(xiàn) 了該酶的重組表達，采用該重組 ADI 進行體外和小鼠體內(nèi)抗癌活性研究，對肝癌細胞人肝癌細胞系 HepG2 和小鼠肝癌細胞系 H22 有顯著抑制作用。基于簡便靈敏的 96 孔板高通量篩選模型，篩選在體內(nèi)生理條件下具有較高酶活以及底物親和性的精氨酸脫亞胺酶突變株，采用隨機突變、定點突變等非理性和半理性的蛋白質(zhì)定向進化手段，獲得了最適 pH 由 6.0 提高至 7.0，在生理中性條件下（pH 7.4）酶活力較野生型 ADI 提高了 33 倍以上的 ADI 突變株，比活力為 15－17 U/mg。該改造后的 ADI 的 PEG 化和小鼠實驗正在進行中。
江南大學
2021-04-11
低水溶性結(jié)晶V型聚磷酸銨
低水溶性結(jié)晶Ⅴ型和結(jié)晶II型一樣，具有相當穩(wěn)定的熱力學區(qū)間，是一種帶有三嗪環(huán)支鏈的縮聚物，主要用于聚丙烯的阻燃，在聚丙烯中的添加量僅為5～15%時，可以達到結(jié)晶II型添加量達30%同樣的阻燃效果，由于添加量小、阻燃性能好，因而其力學與機械性能在達到同樣的阻燃效果的同時得到了極大的提升，是聚磷酸銨系列阻燃材料中最具前途的新品種，目前國內(nèi)還沒有這方面的研究與工業(yè)生產(chǎn)報道。本項目采用創(chuàng)新的聚磷酸銨的制備工藝，利用非五氧化二磷原料路線，制備的結(jié)晶V型聚磷酸銨具有低水溶性和優(yōu)異的阻燃效果，符合國家環(huán)境保護要求及磷化工行業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整方向。在所制備的低水溶性結(jié)晶V型聚磷酸銨中，創(chuàng)新性的原位聚合了具有高耐熱性的三嗪環(huán)，使本產(chǎn)品作為阻燃材料具有優(yōu)異的性能。
華東理工大學
2021-04-11
低聚木糖產(chǎn)業(yè)化關鍵技術
本項目獲國家科技進步二等獎、中國專利獎優(yōu)秀獎，江蘇省專利獎金獎等； 十一五國家科技支撐立項。 項目簡介 以玉米芯為原料，采用蒸汽爆破、酶解、集成膜分離（微濾除雜、納濾脫鹽、 超濾脫色、納濾濃縮）技術制備低聚木糖，得到低聚木糖含量（對總糖）為>70% 和>90%的兩種型號的糖漿和糖粉產(chǎn)品，其中木二糖~木四糖含量≥70%。生產(chǎn)成本 為 60000 元/噸，顯著低于國內(nèi)外同類產(chǎn)品。項目技術具有節(jié)能、高效、環(huán)保的 優(yōu)點，生產(chǎn)線居國內(nèi)外領先水平。已先后在新疆、山東等地實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，最 大規(guī)模為年產(chǎn) 2000 噸低聚木糖
江南大學
2021-04-11
海洋活性功能糖（低聚木糖）研究
本項目技術通過生物煉制技術對大米草等多種海洋源生物質(zhì)進行組分分離，獲取纖維素、半纖維素與木質(zhì)素，并通過木聚糖酶將半纖維素轉(zhuǎn)化為低聚木糖。項目科學意義如下：（1）通過大米草中纖維素、半纖維素與木質(zhì)素組分分離，闡明大米草等海洋源生物質(zhì)纖維素、半纖維素與木質(zhì)素組成與結(jié)構(gòu)特點（2）通過木聚糖酶及半纖維素側(cè)鏈酶（如阿拉伯糖苷酶、阿魏酸酯酶、乙酰酯酶、葡萄糖醛酸酶等）對大米草半纖維素特異性酶解，解構(gòu)海洋源生物質(zhì)半纖維素素的分子結(jié)構(gòu)特征。
廈門大學
2021-04-10
蛋白質(zhì)藥物聚氨基酸偶聯(lián)技術
自1984年首個重組胰島素獲得批準以來，重組蛋白質(zhì)藥物因其高特異性及高活性逐漸受到人們的青睞；近5年來蛋白質(zhì)藥物批準的量已經(jīng)隱隱趕超傳統(tǒng)小分子藥物。然而蛋白質(zhì)藥物往往藥代動力學較差，循環(huán)時間短，需要高頻次重復用藥，給患者帶來極大的生活不便及經(jīng)濟負擔。另一個更為嚴重的問題是蛋白藥物的高免疫源性。以各類重組抗體為例，即使完全人源化的抗體在多次注射后也會產(chǎn)生大量的抗藥物抗體（anti-drug antibody，簡稱ADA）；而ADA的產(chǎn)生輕則造成藥物失去本身的藥效，重則造成嚴重的過敏反應甚至威脅病人生命安全。因此，如何避免臨床用藥過程中（尤其是多頻次給藥過程中）ADA的產(chǎn)生成為蛋白質(zhì)藥物研發(fā)的必要前提。蛋白質(zhì)PEG化不僅能夠延長蛋白質(zhì)循環(huán)時間，也能通過其自身的位阻效應一定程度上降低蛋白質(zhì)的免疫源性。然而PEG本身會誘發(fā)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生anti-PEG抗體（本質(zhì)上也是一種ADA），進而導致其加速血液清除（簡稱ABC效應）。綜上所述，尋找新的低免疫源性聚合物用于蛋白質(zhì)修飾以同時實現(xiàn)長循環(huán)與抑制ADA產(chǎn)生迫在眉睫。 聚氨基酸（也稱合成聚多肽）是一種模擬蛋白質(zhì)多肽結(jié)構(gòu)的合成高分子，可生物降解，生物毒性低，是理想的蛋白質(zhì)藥物修飾高分子。
北京大學
2021-02-01
一種新型聚磁式盤式電機
本發(fā)明公開了一種新型聚磁式盤式電機，包括定子和轉(zhuǎn)子；定子包括定子鐵芯和電樞繞組；轉(zhuǎn)子包括三層結(jié)構(gòu)，外層包括多塊交替設置的外層永磁體和外層轉(zhuǎn)子鐵芯，中間層中對應外層轉(zhuǎn)子鐵芯的位置設有中間層永磁體，內(nèi)層包括內(nèi)層轉(zhuǎn)子鐵芯，外層永磁體為切向充磁，中間層永磁體為徑向充磁，相鄰外層永磁體充磁方向相反，相鄰中間層永磁體充磁方向也相反，外層轉(zhuǎn)子鐵芯相鄰的兩塊外層永磁體以及中間層永磁體的充磁方向均相對于外層轉(zhuǎn)子鐵芯向外或者向內(nèi)，外層永磁體所占外層周長的比例為0.1～0.55。本發(fā)明有效提高了電機的空間利用率和功率密度。
東南大學
2021-04-11
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聚羧酸鹽超分散劑的制備技術
傳統(tǒng)的分散劑在結(jié)構(gòu)上為普通的表面活性劑結(jié)構(gòu)，在分散介質(zhì)中對固體顆粒有一定的分散穩(wěn)定作用。但由于它們在固體粒子表而的吸附不十分牢固，容易從粒子表面上解吸而使被分散的粒子又重新聚集或沉淀。為克服傳統(tǒng)分散劑的局限性，近年來分散性能優(yōu)異的超分散劑己開發(fā)成功并得到了很好應用。這種分散劑主要用于農(nóng)藥、油墨與涂料等固體顆粒的分散，分子量一般在1000-10000之間。與傳統(tǒng)分散劑相比，超分散劑主要有以下特點:（1）可以和顆粒表面形成多點錨固，提高吸附牢度，不易解吸;（2）
南京工業(yè)大學
2021-01-12
三聚氰胺檢測試劑盒
三聚氰胺(Mel)是一種用途廣泛的具有氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)的有機化工原料，因其結(jié)構(gòu)中不僅有氮雜環(huán)且含有多個氨基氮，使其含氮量高達66％以上，因此Mel被一些不法商販添加到商品中以虛高商品蛋白含量。2007年美國發(fā)生的貓狗寵物非正常死亡事件以及2008年國內(nèi)的奶粉事件都由此造成。目前，檢測Mel的主要方法是高壓液相色譜法、液質(zhì)聯(lián)用和氣質(zhì)聯(lián)用等，不僅對儀器、操作人員素質(zhì)及實驗室要求都很高，檢測費時且運行費用高，難以滿足現(xiàn)代食品安全現(xiàn)場監(jiān)測對檢測方法簡單、快速、便攜的要求。 自從2008年國家征集Mel快速監(jiān)測方法以來，有數(shù)十個Mel檢測專利技術問世，其中大部分是采用免疫學原理而研發(fā)的ELISA試劑盒，檢測特異性強，敏感度相對高，但試劑盒制備中涉及Mel完全抗原的制備、動物免疫、Mel與酶的交聯(lián)等復雜程序，試劑成本價格高。 本項目提供適合于三聚氰胺初篩檢測的簡便、快速、便攜的檢測方法和其試劑盒制備技術。
西安交通大學
2021-04-11