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豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展，PCV2廣泛分布于世界各地。迄今，世界范圍內(nèi)只有滅活疫苗可資利用，尚無活疫苗面市。研究團(tuán)隊(duì)?wèi)?yīng)用基因工程技術(shù)，研制成功嵌合型豬圓環(huán)病毒活疫苗（C1-233株），該疫苗病毒的滴度、安全性、免疫效力等關(guān)鍵指標(biāo)優(yōu)于國外相應(yīng)的文獻(xiàn)報(bào)道（國內(nèi)外無相應(yīng)產(chǎn)品面市，無法與其產(chǎn)品對(duì)照）。該疫苗的制苗毒株應(yīng)用自主建立的毒株構(gòu)建方法制備，制苗毒株由研究團(tuán)隊(duì)自行分離鑒定，具有完全的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。基于實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果，研制的嵌合型豬圓環(huán)病毒活疫苗（C1-233株）免疫效

圓環(huán)病毒 2 型（PCV2）嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展， PCV2 廣泛分布于世界各地。迄今，世界范圍內(nèi)只有滅活疫苗可資利用，尚無活疫苗面市。研究團(tuán)隊(duì)?wèi)?yīng)用基因工程技術(shù)，研制成功嵌合型豬圓環(huán)病毒活疫苗（C1-233 株），該疫苗病毒的滴度、安全性、免疫效力等關(guān)鍵指標(biāo)優(yōu)于國外相應(yīng)的文獻(xiàn)報(bào)道（國內(nèi)外無相應(yīng)產(chǎn)品面市，無法與其產(chǎn)品對(duì)照）。該疫苗的制苗毒株應(yīng)用自主建立的毒株構(gòu)建方法制備，制苗毒株由研究團(tuán)隊(duì)自行分離鑒定，具有完全的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。基于實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果，研制的嵌合型豬圓環(huán)病毒活疫苗（C1-233

細(xì)菌脂多糖可刺激宿主免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，可利用這一性質(zhì)開發(fā)既無毒性又能刺激免疫系統(tǒng)的類脂 A 分子疫苗佐劑。近年美國 Corixa 公司已開發(fā)出可用于乙肝病毒疫苗和過敏治療的單磷酸類脂 A（MPL）疫苗佐劑。目前 MPL 生產(chǎn)方法是從沙門氏菌的突變株中提取類脂 A 并加以化學(xué)處理。本項(xiàng)目根據(jù)類脂 A 分 子的合成機(jī)理，通過基因工程技術(shù)將 pagL、lpxE 和 pagP 單啟動(dòng)子串聯(lián)共表達(dá)，將大腸桿菌中類脂 A 的結(jié)構(gòu)改造成為 MPL，菌株穩(wěn)定性好，生產(chǎn)方法簡單高效。

類脂 A 是脂多糖分子的疏水基團(tuán)，大量存在于革蘭氏陰性細(xì)菌的外膜外層，能通過結(jié)合免疫細(xì)胞表面的受體 TLR4 來刺激人體免疫系統(tǒng)[50, 51]，因而也是一種很好的免疫系統(tǒng)激活因子。美國 Corexa 公司已經(jīng)開發(fā)出了可用于乙肝病毒疫苗和過敏治療的疫苗佐劑 MPL。研究表明 MPL 刺激的免疫細(xì)胞中 IL-1β 的分泌量 顯著降低，使得 MPL 的毒性降低但免疫活性還在。MPL 目前是通過從沙門氏菌的 突變株 Salmonella minnesota RC595 中提取類脂 A，然后用化學(xué)方法去除其多余的附加基團(tuán)而得到。本項(xiàng)目擬利用這些類脂 A 修飾酶，根據(jù)類脂 A 分子的合成機(jī)理，通過基因工程技術(shù)將大腸桿菌中類脂 A 的結(jié)構(gòu)改造成為 MPL，構(gòu)建能合成 MPL 的大腸桿菌。這種新型的能合成 MPL 的大腸桿菌不僅可以作為宿主菌安全使用于食品和藥物的發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中，而且可以作為實(shí)驗(yàn)室研究中更安全的基因表達(dá)載體，最重要的是它可以直接用來生產(chǎn)類脂 A 疫苗佐劑 MPL。

本發(fā)明公開了一種同軸送絲熔敷激光頭的光路分光單元，該分 光單元主要包括：準(zhǔn)直鏡，前四分光透鏡，后四分光透鏡，聚焦透鏡 和金屬斜平面反射鏡。該單元目的是將準(zhǔn)直后的激光束通過兩面相對(duì) 位置固定的四分光透鏡按照激光能量，平均分為水平面上中心對(duì)稱的 四束光路，分離后的光束通過聚焦透鏡聚焦，經(jīng)過金屬斜平面反射鏡 聚焦至焦點(diǎn)，光路中空部分嵌入送絲機(jī)構(gòu)，使光路焦點(diǎn)最終聚焦在焊 絲上，實(shí)現(xiàn)高精度、高質(zhì)量、全方向的同軸送絲。 

針對(duì)病毒結(jié)構(gòu)多樣、快速變異的特征，周德敏課題組建立了病毒轉(zhuǎn)化為活疫苗的通用方法：在保留病毒感染情況下，突變其一個(gè)三聯(lián)碼為終止密碼，病毒就變?yōu)轭A(yù)防性疫苗，突變多個(gè)三聯(lián)碼病毒 就變?yōu)橹委熜运幬铮嵏膊《疽呙缪邪l(fā)理念。

研發(fā)階段/n口蹄疫（FMD）是引起的人及偶蹄動(dòng)物共患的一種烈急性、高度接觸性、發(fā)熱性傳染病。FMD在世界上許多國家流行，造成重大的經(jīng)濟(jì)損失和政治影響。口蹄疫病毒（FMDV）屬于小RNA病毒科（Picornaviridae），口蹄疫病毒屬（Aphthovirus），該病毒為單股正鏈小RNA病毒，基因組長約8500個(gè)核苷酸，主要由結(jié)構(gòu)基因（P1區(qū)）和非結(jié)構(gòu)基因（P2、P3區(qū)）等構(gòu)成。該發(fā)明具體涉及一種新的含有口蹄疫病毒主要免疫原性基因的重組偽狂犬病弱毒疫苗株，該毒株屬于豬偽狂犬病毒：Pseudorabi

多肽水凝膠具有生物相容性高、可降解、具有生物活性等特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)，它在生長因子和藥物的緩控釋、組織工程和再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域具有很高的應(yīng)用前景。目前有較高轉(zhuǎn)化前景的項(xiàng)目是多肽水凝膠在疫苗佐劑和抗體制備方面的應(yīng)用。癌癥、艾滋病、丙肝等重大疾病疫苗的研制具有重要的意義。在這些疾病的預(yù)防性和治療性疫苗研制中，關(guān)鍵的一環(huán)是可激活人體細(xì)胞免疫的佐劑的發(fā)現(xiàn)。 本項(xiàng)目開發(fā)出一種多肽水凝膠，具有極強(qiáng)地激發(fā)細(xì)胞免疫的功能。對(duì)比于現(xiàn)有的幾種可激活細(xì)胞免疫的佐劑（CpG，MPL 等），我們的水凝膠佐劑具有以下優(yōu)勢(shì)： 1）成本低，1mgCpG 價(jià)格為 5000-8000rmb，1mgMPL 價(jià)格為 2000-4000rmb，我們的短肽實(shí)驗(yàn)室合成成本 1g 低于 500rmb； 2）操作簡單，僅需物理混合就可實(shí)現(xiàn)與抗原復(fù)合； 3）適用于蛋白、短肽、DNA、滅活癌細(xì)胞等各類抗原，通用性高； 4）短肽結(jié)構(gòu)簡單，可大量制備，實(shí)驗(yàn)室一天內(nèi)一次性即可合成10g 以上該多肽，可用于制備 10000 瓶以上 1mL 的水凝膠（臨床用的疫苗每次注射量是 0.5-1mL），可以很容易的實(shí)現(xiàn)中試級(jí)別的化合物合成及疫苗制備。基于這些優(yōu)點(diǎn)，該佐劑具有極強(qiáng)的應(yīng)用前景，該研究獲得科技部重大國際合作項(xiàng)目資助。 由于本項(xiàng)目的水凝膠可制備短肽抗原的抗體，它在抗體定制中具有極高的應(yīng)用前景。目前抗體制備的技術(shù)為第一步將短肽連接到載體蛋白 BSA、KLH 等上，然后打動(dòng)物 6-10 周。現(xiàn)有技術(shù)操作復(fù)雜（需偶聯(lián)蛋白）、耗時(shí)長（6-10 周），而且很多時(shí)候還未能產(chǎn)生有效的抗體。 我們想發(fā)展的技術(shù)相比于現(xiàn)有技術(shù)來說具有明顯的優(yōu)勢(shì)：操作簡單，僅需物理混合短肽抗原；抗體產(chǎn)生迅速，4-6 周即能生成抗體；抗體滴度高，由于無需使用載體蛋白，短肽的特異性抗體滴度更高；對(duì)于磷酸化抗體來說，本項(xiàng)目的水凝膠能減少磷酸化短肽被體內(nèi)磷酸酶去磷酸化，從而提高磷酸化短肽抗體的比例。