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本發明公開了一對轉錄激活子樣效應因子核酸酶及其編碼基因與應用。這對轉錄激活子樣效應因子核酸酶(TALEN)由一對DNA識別蛋白分別與Fok1？DNA內切酶的兩個異源亞基融合得到，可以特異性地識別山羊或綿羊朊蛋白基因(PRNP)exon2上的兩個相鄰位點。將這對轉錄激活子樣效應因子核酸酶同時轉入宿主細胞時，其能對宿主細胞PRNP基因的exon2位點打靶，并使打靶位點發生基因突變，從而實現對山羊或綿羊PRNP基因的靶向修飾，具有特異性強、打靶效率高、準確度高等優點。

本發明涉及一組用于同時檢測腐爛病菌、黃化病植原體和叢簇病菌的三種病原的核酸、試劑盒和檢測方法，其中，用于多重PCR同時檢測三種病原的核酸包括腐爛病菌、黃化病植原體和叢簇病菌的上、下游引物；用于熒光定量PCR同時檢測三種病原的核酸還包括有各病原對應的探針。本發明還建立了一種比較高效、靈敏的，可同時檢測腐爛病菌、黃化病植原體和叢簇病菌這三種病原的檢測方法。該方法能有效提高檢測的靈敏度，避免假陰性結果的

常溫保存性能穩定 防止理化特性的改變，凍干試劑水份含量非常低，使其穩定性提高，避免酶等粘稠度高的組分損耗。 快速活化 遇水即化并恢復原有試劑的理化特性和活性。 無需冷鏈運輸 常溫下可運輸，解決了冷鏈運輸中因溫度失控導致產品質量下降的不足，降低了運輸過程中的風險和損耗。 操作更簡單，零損耗 凍干試劑預分裝到八聯管，避免反復凍融導致的實驗結果誤差?？s短了整個PCR檢測過程的時長，極大地提高臨床檢驗效率。 高便捷性 八聯管一物兩用（既作為凍干試劑裝載容器，又作為PCR實驗反應容器），無需體系配制，簡化實驗操作。 固態試劑真空包裝 試劑成分緊貼八聯管底部，避免了運輸過程中由于顆粒的不固定性而導致顆粒破損變成粉末造成一定的損耗，增加產品實用性。

1.痛點問題 盡管目前已有一系列臨床治療手段，但癌癥仍然是人類健康與生命安全的最主要威脅之一，大多數癌癥仍然有巨大的未滿足醫療需求?？鼓[瘤藥物的研發依賴于靶點分子的鑒定。因此，依托于新的抑癌靶點，開發全新的抗腫瘤靶向藥，是當前創新藥研發的前沿?，F有藥物靶點主要是蛋白編碼基因，所開發藥物以靶向蛋白質的抗體藥、小分子化合物藥為主。 長非編碼RNA（lncRNA）是近年來發現的一類不編碼蛋白質的RNA分子，具有組織特異性強，功能復雜，種類數量大等特征。研究發現多個lncRNA與各種生物學過程相關，但是大多數lncRNA的生物學功能仍然未知。學術界已發現多個與腫瘤發生發展相關的lncRNA，但目前尚沒有靶向lncRNA的抗腫瘤藥物上市或在臨床試驗中。鑒于lncRNA復雜、多樣化、特異性的生物學功能特征，這一大類分子有望成為新的疾病治療靶點庫。與已知的蛋白靶點相比，lncRNA研究少，易于獲得原創、高價值的靶點專利。這要求基礎研發工作在特定生理或疾病狀態下，從成千上萬的lncRNA中準確鑒定具有核心、基礎生物學意義的lncRNA，并詳細解析其細胞功能與分子機制，確定其作為疾病治療靶點的可行性與科學基礎。 2.解決方案 在此前的研究中，本項目組以腫瘤體系為研究對象，開發了基于信息論的多組學數據挖掘與lncRNA功能預測方法流程。在多種癌癥中鑒定了具有核心生物學功能的lncRNA。例如，首次發現一個此前從未被研究過的lncRNA對于肝癌腫瘤細胞等高增殖率細胞的核仁結構及功能至關重要。研究證明該lncRNA在腫瘤中特異性地高表達，并且對于腫瘤細胞的快速增殖不可或缺，因此項目提出以該lncRNA作為腫瘤治療靶點，開發抗腫瘤小核酸藥或小分子化學藥，控制肝癌發展。 項目技術核心是在腫瘤體系中鑒定重要lncRNA的技術流程，預期產品是針對一系列lncRNA新靶點的靶向藥物。 3.合作需求 1)資金需求：針對新靶點lncRNA的小核酸藥臨床前研發需要的資金投入，在IND申報前需約2500-5000萬元人民幣； 2)孵化資源：公司研發所需辦公及研發場地、實驗室、計算服務器、分析與測試公共實驗室等； 3)團隊：生物醫藥科技公司管理團隊、核酸藥臨床前研發團隊、商務開發與合作團隊、財務、法務等支持團隊； 4)CRO公司合作：小核酸序列大規模合成、敲低效率驗證、動物模型、藥物毒理、藥代動力學、免疫原性等指標測試； 5)大型醫藥公司合作：商討未來技術轉讓方案，利用大型醫藥公司臨床開發資源，開展臨床研發合作； 6)藥物遞送平臺合作：針對小核酸藥靶向遞送需求，開展不同遞送工具的合作開發； 7)臨床醫院合作：針對臨床治療需求，開展小規模IIT臨床試驗，準備IND申報； 8)基礎研究合作：與lncRNA研究領域內國內外基礎研究團隊合作，開發新的lncRNA靶點。

本發明公開了一種可以同時檢測奶牛是否具有脊椎畸形綜合癥(CVM)、白細胞粘附缺陷癥(BLAD)、尿苷酸合酶缺乏癥(DUMPS)、瓜氨酸血癥(CN)四種遺傳病的引物系統。基于該引物系統所制備的產品，能實現同時對奶牛CVM、BLAD、DUMPS、CN四種遺傳病基因相關的4處多態性位點進行檢測。此外，本發明還公開了能夠同時聯合檢測以上遺傳病和奶牛A2基因型的檢測方法及其檢測產品，該聯合檢測的結果可用于指導健康奶牛的篩選、育種等。

本發明屬于分子生物學技術領域，具體涉及幾丁質特異誘導表達啟動子Ptchi2的序列、順式作用元件的序列“ACTTGTTCA”及其應用。從棘孢木霉TD3104(CGMCC No.13161)中克隆得到內切幾丁質酶基因Tachi2的啟動子Ptchi2，其核苷酸序列如SEQ ID No:1所示，該啟動子包括啟動子核心序列和響應幾丁質誘導的順式作用元件；具有被幾丁質特異誘導、不受葡萄糖抑制的特性。本發明利用啟動子Ptchi2構建不同的重組載體或重組菌或表達盒，分析了Ptchi2的啟動子活性，利用缺失突變研究了啟動子核心序列和響應幾丁質誘導的順式作用元件，為其在真菌和植物基因的表達調控、植物抗病、蟲基因工程中的應用提供理論依據。

本發明涉及潛在指紋顯現技術領域，具體的說是一種運用核酸適配體與溶菌酶識別，形成G四鏈體扦插熒光分子進行熒光檢測潛指紋的方法。所述包括以下步驟：①按捺指紋：在樣品表面獲得汗潛指紋；②配制熒光顯色溶液：將DNA溶解于包含NaCl、MgCl2和KCl的Tris?HCl緩沖溶液中，然后加入NMM溶液充分混合；③熒光顯現潛指紋：將步驟②得到的溶液滴涂到步驟①的潛指紋樣品表面反應后，用去離子水快速清洗干燥后的

發現在軸突中特異性抑制FTO或敲低FTO均顯著地降低了GAP-43 mRNA 的局部翻譯。進一步的抗m 6 A免疫沉淀實驗證實FTO通過調節GAP-43 mRNA的m 6 A水平從而影響GAP-43的局部翻譯。在過表達野生型GAP-43的神經元中，抑制FTO可以顯著地降低GAP-43的局部翻譯水平，同時顯著地抑制了軸突的生長。而在過表達m 6 A 位點突變的GAP-43的神經元中，抑制FTO對GAP-43的蛋白水平及軸突的生長均沒有影響。因此，該研究證實FTO可以通過調控軸突中GAP-43 mRNA的m 6 A水平從而影響其局部翻譯，進而調節軸突的生長。