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項目成果/簡介:本發明提供了一種單鏈片段抗體-多肽融合蛋白及其應用,該蛋白是一種具有結合 Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物雙向功能的融合蛋白,可以作為抗癌siRNA的藥物 載體。其中,單鏈片段抗體為Her2-ScFv,多肽為魚精蛋白片段多肽。該單鏈片段抗 體-多肽融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示的序列。本發明構建的Her2單鏈片段抗 體與魚精多肽的融合蛋白具有結合Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物的雙向功能。本 發明的融合蛋白能把抗癌siRNA藥物定向導入目標癌細胞中,開發了非病毒載體工 具,加速RNAi技術應用于臨床。項目階段:成果已轉化

本發明公開了一種谷朊蛋白膠體顆粒及其制備方法和用途，制備方法包括：谷朊蛋白在谷氨酰胺轉氨酶作用下發生交聯反應，形成谷朊蛋白膠體顆粒，反應體系中添加有帶伯胺基團的親水小分子，所述帶伯胺基團的親水小分子為L?賴氨酸、氨基葡萄糖和L?谷氨酸中的至少一種，所述帶伯胺基團的親水小分子與谷朊蛋白的質量比為1:10?100。本發明在反應體系中添加了帶伯胺基團的親水小分子，谷朊蛋白發生分子間和分子內交聯的同時，與帶伯胺基團的親水小分子發生交聯反應，一方面可以抑制谷氨酰胺轉氨酶催化谷朊蛋白中的谷氨酰胺或天冬酰胺進行去酰胺反應，另一方面由于帶伯胺基團的親水小分子含有帶電荷的基團，將賦予谷朊蛋白更高的表面電荷。

本發明屬于功能材料領域，提供了一種絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠及其制備方法。所述制備方法包括采用物理交聯劑將絲素蛋白和N?異丙基丙烯酰胺(NIPAM)在常溫下共交聯，并在交聯反應過程中嵌入三維光子晶體陣列。 一、項目分類 關鍵核心技術突破 二、技術分析 本發明屬于功能材料領域，提供了一種絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠及其制備方法。所述制備方法包括采用物理交聯劑將絲素蛋白和N?異丙基丙烯酰胺(NIPAM)在常溫下共交聯，并在交聯反應過程中嵌入三維光子晶體陣列。本發明提供的制備方法制備的光子晶體水凝膠具有良好的生物相容性、彈力性能、吸水性能，與皮膚之間具有良好的貼合性，緊貼皮膚表面不易脫落，還同時具有優良的壓力傳感性和溫敏性，可對溫度和壓力的變化產生顏色變化響應，實現壓力和溫度變化的裸眼觀測。 對溫度的響應：在35℃時觀察到的絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠由原來的藍色局部變為紫色和紅色，結構色發生明顯改變，是由于水凝膠急速收縮導致陣列從密堆積結構變為不均勻的其他晶型狀態，導致結構色出現反常變化。因此，本發明提供的絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠的LCST在35℃附近。當溫度低于31℃時，光子晶體水凝膠的反射峰幾乎不發生移動；而當溫度到達31℃時，反射峰逐漸紅移；之后隨著溫度的升高，在34?35度之間，產生大幅度紅移。由上述試驗結果可知，絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠在34?35℃之間出現了相轉變。現有技術已知純NIPAM凝膠的LCST約為33℃。由于本發明提供的制備方法制備的絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠的LCST接近人體溫度，并且光子晶體水凝膠的相轉變溫度可通過添加鹽離子等方法進行調節。再加上光子晶體水凝膠具有良好的彈性和皮膚貼合性。因此，本發明提供的制備方法制備的絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠可用作敷料裸眼檢測體溫，快速準確地判斷體溫是否正常。 對壓力的響應：將光子晶體水凝膠膜貼在物體表面，當物體表面有外加壓力存在時，光子晶體水凝膠膜會發生顏色的變化，可以用來裸眼識別外加壓力的大小。例如將光子晶體水凝膠膜貼在人體關節表面，當關節彎曲時，帶動水凝膠膜伸長，其中的光子晶體晶格間距變大，進而產生結構色的變化。光子晶體水凝膠膜的這一特性可應用于運動康復監測領域，監測關節的運動靈活性，裸眼觀察即可輕松獲取運動康復情況。 吸水性能評價：將制備的絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠的5mm膜放在干燥環境中失水，當其含水量降為最大含水量的50％時，光子晶體水凝膠的體積產生相應的縮小；將其放置于含水容器中浸泡30min后即可恢復到最大吸水量狀態。在經歷上述失水和吸水過程后，光子晶體水凝膠的各項性能保持穩定。由此可知，光子晶體水凝膠的吸水性能良好，且吸水、失水過程不會破壞其結構。又由于其與皮膚的貼合性很好，十分適合用作水溶性藥物載體材料。 酸堿穩定性評價：配制pH＝5 ,6 ,7 ,8 ,9的磷酸緩沖液，將實施例1制備的絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠的1mm膜分別置于上述緩沖溶液的培養皿中，10分鐘后用光纖光譜儀檢測其反射光譜。試驗結果顯示光子晶體水凝膠在上述緩沖液中反射峰均未發生移動。因此，光子晶體水凝膠在上述pH范圍內具有良好的酸堿穩定性和耐受性，不會隨外界pH變化產生收縮或溶脹，具有良好的環境適應性。 自修復性能評價：將實施例1制備的絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠的2mm膜用刻刀切開后，切口接觸放置在一起，放置24小時，觀察發現切口消失。因此，光子晶體水凝膠具有一定的自修復能力，利于增加使用壽命。檢驗自修復后的光子晶體水凝膠強度，將光子晶體水凝膠兩端固定并緩慢拉伸，拉伸30％時切口出現裂縫，50％時切口完全斷開。由此可知，光子晶體水凝膠具有一定程度的自修復性能，但是由于修復僅為物理相互作用力產生，因此不能承受較大的外力。

本項目屬于功能材料領域，提供了一種絲素蛋白?NIPAM光子晶體水凝膠及其制備方法。所述制備方法包括采用物理交聯劑將絲素蛋白和N?異丙基丙烯酰胺(NIPAM)在常溫下共交聯，并在交聯反應過程中嵌入三維光子晶體陣列。本發明提供的制備方法制備的光子晶體水凝膠具有良好的生物相容性、彈力性能、吸水性能，與皮膚之間具有良好的貼合性，緊貼皮膚表面不易脫落，還同時具有優良的壓力傳感性和溫敏性，可對溫度和壓力的變化產生顏色變化響應，實現壓力和溫度變化的裸眼觀測。

【發 明 人】陳志鵬；王建；劉丹；陳軍；蔡寶昌 【摘要】 本發明提供了一種注射用載納米粒的微球系統，藥物包裹于納米粒中，再將納米粒包裹在微球中，納米粒材料選自白蛋白、殼聚糖和聚乳酸-羥基乙酸聚合物中的一種，微球材料選自殼聚糖或聚乳酸-羥基乙酸聚合物。本發明還提供了上述微球系統的制備方法，納米粒采用去溶劑化-乳化交聯法、交聯法或雙乳化法制備，將制得的納米粒進一步采用雙乳化法或噴霧干燥法制備得到微球。本發明所述載納米粒的微球系統不會引起排異反應，可以用于注射給藥，可適應不同藥物的性質，進一步的增強了緩釋作用及其可控性，還可以通過對內外兩層材料的修飾，實現分級逐次靶向的作用。

已有樣品/n本發明涉及蛋白-蛋白及RNA-蛋白質相互作用成像領域，基于激發波長在600nm以上的紅色熒光蛋白mNeptune熒光片段互補技術，建立了位于活體成像“光學窗口”的雙分子和三分子熒光互補系統。其中雙分子熒光互補系統可以用于活細胞及活體內蛋白-蛋白相互作用成像，三分子熒光互補系統可以用于活細胞及活體內RNA-蛋白質之間的相互作用成像。該成果為首次建立活體內RNA-蛋白質相互作用熒光成像技術，該技術也將有助于開發活細胞及活體內藥物評價體系和藥物篩選平臺。

2020年3月8日，福建師范大學在bioRxiv上上傳了一篇題為 Cryo-electron microscopy structure of the SADS-CoV spike glycoprotein provides insights into an evolution of unique coronavirus spike proteins 的研究，識別了SARS-CoV-2的S蛋白的低溫-EM的融合前結構，分辨率為3.55埃。

抗感染功能蛋白質的發現與應用由山東大學微生物技術國家重點實驗室谷立川教授團隊研發，主要成果為：1. 抗銅綠假單胞菌功能蛋白質PslG，納摩爾濃度可以降解>80%生物被膜并使其耐藥性降低一個數量級。2. 抗齲齒功能蛋白，齲齒發病率>40%，全球累計20億人收到影響。化學殺菌藥物副作用太大，甚至會火上澆油。抗齲齒蛋白質第一次可以實現精準破壞壓菌斑而不影響人體正常菌群。3. 抗生殖道感染功能蛋白質，與抗生素治療相比，特異性攻擊病原菌，對人體正常菌群沒有任何不良影響。