犬細(xì)小病毒乳膠檢測試劑及檢測應(yīng)用
犬細(xì)小病毒病是由犬細(xì)小病毒引起犬科動(dòng)物的一種烈性傳染病。具有發(fā)病率高、死亡率高和傳染性強(qiáng)。目前檢測犬細(xì)小病原的方法HA/HI與PCR和ELISA方法自身所限,及目前寵物醫(yī)療的門診條件,都難以在寵物醫(yī)療門診推廣。乳膠凝集檢測迅速,不需要特殊的儀器和專門的技能,具有很大的優(yōu)勢。
該項(xiàng)目提供一種犬細(xì)小病毒乳膠檢測試劑,由犬細(xì)小病毒單克隆抗體和乳膠組成。該試劑具有特異性強(qiáng),靈敏度高,檢測時(shí)間短的特點(diǎn)。該項(xiàng)目提供了一種犬細(xì)小病毒乳膠凝集檢測方法,該方法簡單,易于操作,準(zhǔn)確率高。提供了一種雜交瘤細(xì)胞株,能夠分泌抗CPV的特異性的單克隆抗體。該細(xì)胞由骨髓瘤細(xì)胞SP2/0和犬細(xì)小病毒粒子免疫的小鼠脾細(xì)胞融合而得,該雜交瘤細(xì)胞株27D可以在含有20%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中以半貼壁方式生長,生長環(huán)境為37℃,5%CO2的培養(yǎng)箱。該雜交瘤細(xì)胞株為渾圓透亮,成簇生長,并能穩(wěn)定的分泌抗犬細(xì)小病毒的單克隆抗體。提供了一種抗CPV-2b的單克隆抗體,能夠特異性的識(shí)別CPV-2a 、CPV-2b 等CPV病毒。提供一種犬細(xì)小病毒乳膠在體外檢測犬細(xì)小病毒中的應(yīng)用。
該項(xiàng)目制備的抗是CPV-2b亞型的單克隆抗體。克服了普通乳膠致敏抗體時(shí),致敏量少,不穩(wěn)定,抗體容易脫落等缺點(diǎn),提高了抗體的結(jié)合效率,而且致敏上的抗體不容易從乳膠上脫落,進(jìn)而提高乳膠的敏感性和保質(zhì)期,適合了產(chǎn)品開發(fā)和大規(guī)模生產(chǎn)的要求。
轉(zhuǎn)化條件:具有GMP車間,實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn);寵物醫(yī)院
成果完成時(shí)間:2016年
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-01-12