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【發(fā) 明 人】范欣生；俞晶華；唐于平；周玲；段金廒【技術(shù)領(lǐng)域】本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方的抗呼吸道病毒的有效部位及其制備方法，以及在制備治療抗呼吸道病毒中的應(yīng)用，屬于中醫(yī)藥領(lǐng)域中中藥復(fù)方有效部位提取與應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。【摘要】一種中藥復(fù)方抗呼吸道病毒的有效部位及制備方法。它是以甘草、麻黃、苦杏仁、半夏、生石膏、細茶、五味子按一定重量份配比的原料藥用水蒸氣蒸餾法提取的中藥復(fù)方揮發(fā)油部位、萃取法提取的乙酸乙酯部位。本發(fā)明具有制備工藝簡單、重現(xiàn)性好、成本低的優(yōu)點，同時較大限度地提高復(fù)方中有效成分的提取率。經(jīng)體外試驗證明本發(fā)明提供的中藥復(fù)方揮發(fā)油部位、乙酸乙酯部位具有較強的抗甲型流感病毒作用；乙酸乙酯部位具有較強的抗合胞病毒作用；揮發(fā)油部位具有抗乙型流感病毒作用。本發(fā)明的中藥復(fù)方揮發(fā)油部位、乙酸乙酯部位可用于制備防治上呼吸道相關(guān)病毒感染的中藥新藥，為利用具有傳統(tǒng)治療優(yōu)勢的中藥復(fù)方制備抗呼吸道病毒藥物提供了新的選擇。

本專利（專利號：ZL200910103653.1 ,發(fā)明人系榮昌校區(qū)教師，長期從事新中獸藥的研發(fā)），在于提供 一種抗腸炎型犬細小病毒病的中藥組合物，配伍獨特，原料來源廣泛，成本低廉,具有清熱解毒、涼血止 痢、止嘔的功效,可以高效防治腸炎型犬細小病毒病。 犬細小病毒分為腸炎型和心肌炎型，目前，犬細小病毒病尚無特效治療藥物和方法。西醫(yī)主要采用免疫 療法（接種疫苗、高免血清等）,同時聯(lián)合對癥療法（給予止吐藥、止瀉藥、解熱抗炎藥等）、補液療法 （補充生理鹽水、葡萄糖溶液等）和控制繼發(fā)感染（給予抗生素等）等進行綜合治療,但由于犬細小病毒基 因組的變異性很強，免疫療法效果不理想，其它輔助方法也只能治標，不能治本,且副作用較大，易引起耐 藥性,治愈衲氐。本專利擬以獨占許可方式轉(zhuǎn)讓給相關(guān)獸藥企業(yè),因此,如果本專利能被采用成功上市,將會提高犬細小 病毒病的治療效果，加之中藥殘留低,毒副作用小，應(yīng)用前景非常可觀。

本發(fā)明公開了一種小麥赤霉病抗病育種方法，該育種方法的步驟包括：（1）篩選小麥赤霉病高抗資源和育種主干親本；（2）鑒定赤霉病粗毒素篩選壓；（3）將赤霉病高抗資源和育種主干親本雜交，獲得F1雜交種；（4）F1雜交種花培獲得單倍體植株；（5）單倍體植株繼代壯根；（6）單倍體植株浸根加倍；（7）花培苗單株收種獲得花培家系，進一步農(nóng)藝性狀、赤霉病抗性篩選獲得小麥赤霉病抗性品系。本發(fā)明的小麥赤霉病抗病育種方法大大加快了小麥赤霉病抗病育種速度，顯著縮短赤霉病抗病育種周期，3年即可實現(xiàn)赤霉病抗性育種，具有重要的產(chǎn)業(yè)價值。

一、成果簡介 解決目前畜禽養(yǎng)殖業(yè)疫病復(fù)雜(病源復(fù)雜且具有抗藥性)、死亡率較高、各種疾病降低生產(chǎn)性能和藥物殘留等多種問題。本項目是國家“863”高技術(shù)研究發(fā)展計劃成果，含有授權(quán)國家發(fā)明專利用5項。生產(chǎn)出新型抗病肽蛋白功能性生物飼料，它是一種富含抗菌肽(如細菌素)以及多種功能肽、消化酶、有機酸、功能微生物和未知促生長因子(UGF)的新型抗病、助消化、促生長、環(huán)保的綠色功能性生物飼料系列產(chǎn)品。用于生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)、安全、綠色、營養(yǎng)、風(fēng)味獨特的各種畜禽和水產(chǎn)動物產(chǎn)

病毒的同源性包括基因組核苷酸序列的同源，也包括蛋白質(zhì)氨基酸序列的同源。在序列比對方面，穿山甲冠狀病毒與新冠病毒在氨基酸序列同源性方面超過90%的相似度。對于藥物篩選來說，蛋白質(zhì)氨基酸序列的同源性越高，意味著病毒生命活動的方式越相近，可以形象地理解為，兩個病毒的“行為方式”非常一致。這種“行為方式”與新冠病毒極為相似的病毒，能不能替代新冠病毒用于藥物篩選呢？童貽剛敏銳地意識到：如果可以，那么“篩藥”工作將在針對新冠病毒的同時，也保障了實驗的安全性，篩藥工作將走出高安全等級實驗室，走進普通P2實驗室。

南開大學(xué)學(xué)者：從病毒學(xué)基礎(chǔ)研究的角度討論此次新型冠狀病毒的一些特征 首先，冠狀病毒對人類來說并不陌生，早在1937年，科學(xué)家們就從病雞的組織樣本中分離得到了第一株冠狀病毒。在目前已鑒定的7種可感染人的冠狀病毒中，有3種會導(dǎo)致較為嚴重的人類疾病，其余4種引起普通感冒等輕微癥狀。從病毒分類上看，冠狀病毒隸屬于單節(jié)段正鏈RNA病毒，這個名字聽起來比較拗口，讓我們來做幾個名詞拆解吧：“RNA病毒”：說明冠狀病毒的遺傳信息由RNA（Ribonucleic acid，核糖核酸）來承載。以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，在復(fù)制子代病毒時發(fā)生突變的概率要顯著高于以DNA（Deoxyribonucleic acid，脫氧核糖核酸）為遺傳物質(zhì)的生命體；“單節(jié)段”，指的是冠狀病毒的基因組只由一條RNA鏈組成，在這條鏈上編碼了十余種功能各異的病毒蛋白所需的遺傳信息；而所謂的“正鏈”，意味著冠狀病毒在進入宿主細胞之后，無需經(jīng)過基因組的轉(zhuǎn)錄過程，就可以直接利用宿主的核糖體來生產(chǎn)病毒復(fù)制所需的蛋白質(zhì)。當(dāng)科學(xué)家第一次從電子顯微鏡下看到這類病毒的形狀時，發(fā)現(xiàn)它的直徑大約為120納米左右，在病毒的表面呈現(xiàn)出一種類似于中世紀歐洲帝王皇冠的突起結(jié)構(gòu)，于是根據(jù)形態(tài)給它起了個名字叫做冠狀病毒（coronavirus）。新型冠狀病毒可能的傳播循環(huán)途徑

01. 成果簡介 中東呼吸綜合征冠狀病毒（MERS-CoV）是2012年在中東地區(qū)首先發(fā)現(xiàn)的一種新型冠狀病毒，與嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒（SARS-CoV）同屬于β冠狀病毒，能夠引發(fā)嚴重的人類呼吸系統(tǒng)疾病。據(jù)世界衛(wèi)生組織的最新統(tǒng)計表明，MERS-CoV已造成全球27個國家2428例感染，致死率高達35%。 MERS-CoV表面刺突蛋白（Spike）蛋白是病毒顆粒與細胞受體二肽基肽酶4（DPP4）作用的關(guān)鍵蛋白，也是MERS-CoV疫苗與保護性單克隆抗體研究的熱門靶點。本項目團隊在靶向刺突蛋白的高活性中和抗體篩選、鑒定、分子結(jié)構(gòu)研究中取得了一系列突破。本團隊在國際上首批報道了兩株人源MERS-CoV中和抗體MERS-4與MERS-27，它們均能高效抑制假病毒與活病毒對體外培養(yǎng)細胞的侵染，在動物模型中也顯示了很好的保護作用。該團隊還綜合運用結(jié)構(gòu)生物學(xué)、生物化學(xué)以及病毒學(xué)研究方法闡明了這兩株抗體識別Spike受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域（RBD）的不同位點，并阻斷Spike與受體DPP4的結(jié)合。 本項目團隊還利用一種稀有黑猩猩腺病毒AdC68為載體，搭載MERS-CoV表面全長的Spike蛋白，在轉(zhuǎn)基因小鼠（hDPP4-KI）模型中，一次滴鼻免疫即可誘導(dǎo)產(chǎn)生長期保護性免疫反應(yīng)，并完全預(yù)防小鼠感染或降低感染后的疾病進展速度。解決了目前研發(fā)的MERS-CoV疫苗大多需要進行多次免疫注射的復(fù)雜程序問題。進一步的抗體分析表明，免疫動物血清中含有廣譜高滴度針對RBD的多克隆和單克隆中和抗體，能夠有效阻斷病毒與受體DPP4的結(jié)合，從而解析了其長期保護性免疫反應(yīng)的分子基礎(chǔ)和機制，為疫苗下一階段進入大動物模型和人體臨床試驗做好了準備。                        MERS-CoV及其相關(guān)中和抗體和疫苗研究時間軸AdC68-S重組疫苗在hDPP4-KI轉(zhuǎn)基因小鼠模型上的保護效果02. 應(yīng)用前景 本項成果可應(yīng)用于治療或預(yù)防中東呼吸綜合征冠狀病毒的抗體藥物及疫苗候選物。03. 知識產(chǎn)權(quán) 本項成果已申請4項發(fā)明專利，其中3項已授權(quán)。04. 團隊介紹 本項目團隊由生命學(xué)院實驗室與醫(yī)學(xué)院實驗室聯(lián)合組成，兩位實驗室負責(zé)人分別為清華大學(xué)生命學(xué)院和醫(yī)學(xué)院教授、博士生導(dǎo)師，主要研究方向分別為結(jié)構(gòu)生物學(xué)與病毒學(xué)，已發(fā)表國內(nèi)外高水平學(xué)術(shù)論文數(shù)十篇，聯(lián)合申請專利4項。05.合作方式 技術(shù)許可。06.聯(lián)系方式 郵箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn

斷奶前仔豬腹瀉是養(yǎng)豬生產(chǎn)中的常見疾病，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失，腸毒素大腸桿菌（ETEC）F4ac是引發(fā)斷奶前仔豬腹瀉的最主要致病菌。本項目在國家863、國家科技支撐計劃、江西省科技創(chuàng)新重大專項等項目支持下，通過6年多的研發(fā)，在國際上首次確定了MUC13為決定斷奶前仔豬腹瀉易感性的ETEC F4ac受體基因。發(fā)現(xiàn)了對ETEC F4ac易感和抗性個體鑒別準確率大于97%的關(guān)鍵突變位點。由此首次在國際上發(fā)明了高精準度的、具有完全自主知識產(chǎn)權(quán)且廣泛適用于杜洛克、長白和大白三個主要商業(yè)豬種的斷奶前仔豬腹瀉抗病育種新技術(shù)。本項目在動物遺傳育種領(lǐng)域有影響的國際性學(xué)術(shù)期刊發(fā)表本發(fā)明技術(shù)直接相關(guān)的SCI論文10篇，其中1篇為國際專業(yè)雜志封面文章。獲國家授權(quán)發(fā)明專利2項。培養(yǎng)博士3人，碩士15人，1篇博士論文獲全國優(yōu)秀百篇博士論文提名獎。 2008年以來，通過國家生豬現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系平臺，進行了大面積的專利技術(shù)推廣應(yīng)用，結(jié)合常規(guī)育種，系統(tǒng)地在我國20個生豬主產(chǎn)省（市）35家國家級重點種豬場的84個核心育種群（14396個體）中開展了抗F4ac仔豬腹瀉病的專門化新品系選育。經(jīng)過3年的選育改良，使受試種群中的杜洛克、大白、長白易感個體的比例分別下降20%，25.1%和25.4%，顯著提高了這些核心育種群的斷奶前仔豬腹瀉抗性。 本項目實現(xiàn)了我國種豬抗病育種技術(shù)的重大自主創(chuàng)新，有力地推動了我國種豬業(yè)的行業(yè)科技進步和健康可持續(xù)發(fā)展。

2020年2月25日，天津大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院黃金海教授團隊成功研發(fā)出新型冠狀病毒口服疫苗，該疫苗以食品級安全釀酒酵母為載體，以新型冠狀病毒S蛋白為靶點產(chǎn)生抗體。黃金海教授本人已經(jīng)4倍量口服新冠疫苗樣品，無任何副反應(yīng)。目前科研團隊正在尋求合作方，希望能推動疫苗早日走向臨床，為疫情防控發(fā)揮作用。新型冠狀病毒S蛋白（Spike protein，刺突蛋白）可與宿主細胞的病毒受體結(jié)合，是決定病毒入侵易感細胞的關(guān)鍵蛋白，也是開發(fā)預(yù)防或治療用新型冠狀病毒疫苗與藥物的關(guān)鍵靶點。疫情爆發(fā)后，黃金海團隊日夜奮戰(zhàn)迅速設(shè)計制定了穩(wěn)定表達COVID-19病毒S蛋白保護性抗原RBD-FP域疫苗菌株的研發(fā)方案。該疫苗，應(yīng)用食品級安全酵母作為宿主研制生物防治制劑，通過口服途徑免疫，具有激發(fā)局部黏膜免疫、調(diào)節(jié)機體免疫穩(wěn)態(tài)，使用方便，安全性好、產(chǎn)能迅速等優(yōu)勢。目前，團隊已完成了重組菌株構(gòu)建、篩選，蛋白表達、發(fā)酵動力學(xué)等核心技術(shù)開發(fā)內(nèi)容，并制備了少量膠囊、奶片、顆粒劑口服防治制劑樣品。據(jù)黃教授介紹，該疫苗，除表達的病毒外源基因外，表達元件全部為釀酒酵母自身基因片段，不含外源抗性基因。新型冠狀病毒疫苗制劑通過高表達新冠病毒保護性抗原，一方面可作為病毒感染的競爭性治療制劑，也可通過激活黏膜免疫的疫苗機制，發(fā)揮預(yù)防性抗感染功能。其安全性、免疫方式、成本節(jié)約等優(yōu)勢突出，特別適用于應(yīng)急性、無常規(guī)疫苗的烈性病防控。

本研究將構(gòu)建重組溶瘤腺病毒，以期達到治療實體腫瘤（肝癌）的目的。在腫瘤局部，利用溶瘤腺病毒誘導(dǎo)的炎癥引起免疫細胞浸潤。同時病毒可以感染并裂解腫瘤細胞，導(dǎo)致腫瘤相關(guān)抗原釋放。而重組溶瘤腺病毒可以同時使被感染的細胞表達免調(diào)控融合蛋白PD1CD137L，在活化T 細胞的同時封閉腫瘤表面PD-L1 傳遞的負向信號。最終使得機體的免疫細胞能夠識別腫瘤抗原，并產(chǎn)生特異性抗腫瘤免疫應(yīng)答，最終達到清除腫瘤的目的。