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重組大腸桿菌生產(chǎn)磷脂酶D及轉(zhuǎn)酯化產(chǎn)品開發(fā)
"磷脂酶 D （PLD）是一類具有水解作用和磷酰基轉(zhuǎn)移作用的酶, 在磷脂改性方面發(fā)揮著重要作用。它可以將大量磷脂酰膽堿(PC) 催化合成為自然界稀有的磷脂質(zhì)，如磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰絲氨酸(PS)和磷脂酰甘油(PG)等，合成的磷脂質(zhì)在醫(yī)藥和食品工業(yè)具有很大的應用前景。但由于來源不足和價格高，PLD的工業(yè)應用一直受到限制。本項目通過基因工程和微生物發(fā)酵技術(shù)，解決了PLD工業(yè)化應用中難表達和表達量不足的難題，利用重組大腸桿菌發(fā)酵實現(xiàn)了PLD的高水平表達，其酶活為106 U?L-1，產(chǎn)量為748 mg?L-1，分別比目前報道的最高水平提高了100倍和20倍；同時，本項目還建立了一種簡單有效提取重組PLD的方法，可望大大降低PLD的生產(chǎn)成本。本技術(shù)先進，應用前景看好，如按106 U?L-1的發(fā)酵水平生產(chǎn)，成本約100元人民幣/1000 U，目前市場售價在3000-6000元/1000 U，利潤空間很大。 "
廈門大學
2021-04-10
一種α-半乳糖苷酶軟膠囊飼料添加劑
其他成果/n本發(fā)明屬于飼料添加劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種α-半乳糖苷酶軟膠囊飼料添加劑及其制備方法。該方法包括以下步驟：1)向磷酸鹽緩沖溶液中加入α-Gal，然后加入β-CD，再經(jīng)過均質(zhì)后靜置反應，至反應終點，得到α-Gal—β-CD添加液；2)將B型明膠加入水中，充分溶脹后加入甘油、防腐劑和二氧化鈦，混合均勻進行膠化，得到膠料；3)灌裝。通過本發(fā)明得到的軟膠囊添加劑利用環(huán)糊精抑制劑對α-Gal的抑制作用，使動物飼料中的α-Gal酶活，經(jīng)歷一個先低后高的過程，從而使飼料中的α-Gal在更合適的消化時期發(fā)揮催化作用。
武漢輕工大學
2021-04-11
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生物酶法制備納米級功能性膳食纖維技術(shù)
本技術(shù)采用花生殼、小麥麩皮、大豆皮等農(nóng)副產(chǎn)物為原料制備 納米纖維素。首次采用生物酶結(jié)合超聲波技術(shù)以農(nóng)副產(chǎn)品為原材料制備納米級 膳食纖維，克服了目前酸法制備納米級膳食纖維污染重、周期長等缺點，建立 了一種高效、綠色、環(huán)保制備納米級膳食纖維的新方法；首次開發(fā)出納米級膳 食纖維及高纖維食品：包括面制品、淀粉制品、肉制品及功能性飲料制品等， 拓展了納米級膳食纖維的應用范圍。本項目所開發(fā)的納米級膳食纖維功能性食 品，兼具優(yōu)良口感與保健功效，具有良好的市場前景，對建設(shè)資源節(jié)約型和環(huán) 境友好型社會具有重要的促進作用。 生產(chǎn)條件及經(jīng)濟效益預測：納米膳食纖維素的初步市場估價為 15 萬元/噸。 項目投產(chǎn)后，年加工量 2000 噸的農(nóng)副產(chǎn)物生產(chǎn)線，估算投資額為 8000 萬，可 產(chǎn)生經(jīng)濟效益 2.55 億元，實現(xiàn)利稅 1.2 萬元。年加工量 1000 噸的農(nóng)副產(chǎn)物生 產(chǎn)線，估算投資額為 4000 萬，可產(chǎn)生經(jīng)濟效益 1.275 億元，實現(xiàn)利稅 8400 萬 元；年加工量 500 噸的農(nóng)副產(chǎn)物生產(chǎn)線，估算投資額為 2000 萬，可產(chǎn)生經(jīng)濟效 益 6375 萬元，實現(xiàn)利稅 3200 萬元。
青島農(nóng)業(yè)大學
2021-04-11
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速生闊葉材制漿造紙過程酶催化關(guān)鍵技術(shù)及應用
我國是世界上第一造紙大國，紙和紙板產(chǎn)量已超過全球總產(chǎn)量的25%。但我國木材資源匱乏，充分利用速生闊葉材資源、采用高效清潔制漿造紙技術(shù)是從根本上解決我國造紙工業(yè)面臨的資源與環(huán)境問題的有效途徑。陳嘉川教授領(lǐng)銜的科研團隊在973計劃和國家科技支撐計劃等資助下，歷經(jīng)10余年，自主研究開發(fā)了酶促磨漿技術(shù)、酶促消潛技術(shù)、酶助漂白技術(shù)、酶精制紙漿技術(shù)等一系列制漿造紙酶催化綠色新技術(shù)，在降低磨漿能耗、消除有毒物污染、提升紙漿品質(zhì)、改善抄造性能和研發(fā)高檔紙基新材料等方面取得了突破，實現(xiàn)了國產(chǎn)木材資源的高效高值化利用。
先后在世界造紙十強企業(yè)山東晨鳴紙業(yè)集團和國內(nèi)龍頭企業(yè)山東太陽紙業(yè)股份有限公司等20余家骨干企業(yè)推廣應用，用生物酶催化技術(shù)生產(chǎn)出了優(yōu)質(zhì)木漿，并用于高級紙基材料的生產(chǎn)，實現(xiàn)了速生闊葉材的高效高值化利用，并產(chǎn)生了重大的經(jīng)濟效益和社會效益。過2012-2014三年時間累計實現(xiàn)新增銷售額130.1億元，利潤25.6億元。
齊魯工業(yè)大學
2021-04-22
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茶樹咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP及其應用
本發(fā)明提供茶樹咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP及其在制備轉(zhuǎn)基因植物中的應用.本發(fā)明以茶樹DNA為模板,用GenomeWalking方法克隆得到茶樹TCS基因啟動子序列,然后利用Gateway技術(shù)構(gòu)建重組植物表達載體pKGWFS7TCSP,采用農(nóng)桿菌介導的煙草遺傳轉(zhuǎn)化,以表達GUS基因的方式進行啟動子活性功能驗證.本發(fā)明首次從茶樹中克隆出特異性咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP,并驗證了其活性,對于揭示茶樹咖啡堿合成的機理,生物調(diào)控茶樹咖啡堿的含量具有重要意義.
安徽農(nóng)業(yè)大學
2021-04-29
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一種抑制蘋果汁酶促褐變的加工方法
已有樣品/n一種抑制蘋果汁酶促褐變的加工方法。 成果簡介：本成果克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種超聲波協(xié)同護色劑抑制蘋果汁酶促褐變的方法。本成果篩選出抑制酶促褐變的重要技術(shù)參數(shù)，對蘋果汁加工過程進行優(yōu)化，以期為蘋果汁的褐變抑制提供新的方法。附帶地，本成果利用圓二色譜、熒光光譜、粒徑分析、電泳分析等分析技術(shù)對蘋果汁中引起褐變的關(guān)鍵酶——多酚氧化酶進行結(jié)構(gòu)鑒定，并且對經(jīng)過超聲波協(xié)同護色劑處理后，多酚氧化酶的催化能力及結(jié)構(gòu)變化進行研究，為蘋果汁加工中因酶促褐變引起色澤劣變，以及酶促褐變的抑制機理提供一定的理
華中農(nóng)業(yè)大學
2021-01-12
關(guān)于蛋白質(zhì)訂書機酶實現(xiàn)高效多肽-多肽偶聯(lián)反應
高效的 多肽 - 多肽偶聯(lián)反應對于 制備蛋白 - 藥物綴合物、調(diào)控蛋白質(zhì)拓撲結(jié)構(gòu)、生物成像 、化學生物學 等 領(lǐng)域 具有重要的意義 ，并因其可基因編碼的特性 而 備受關(guān)注 。目前， 研究 報道 此類連接方法 并不太多 見 ，其中 分選酶（ sortase ） 或 蝶豆粘酶 -1 （ butelase 1 ） 介導的偶聯(lián)反應具有較好的底物 序列特異性 ， 內(nèi)含肽 （ intein ） 介導的蛋白質(zhì)連接方法 可實現(xiàn) 可基因編碼的高效主鏈連接， 而 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶 （ transglutaminase ） 則 可以 介導 非特異性的 側(cè)鏈異肽鍵 偶聯(lián) 。近年來 ， 多肽 - 蛋白質(zhì)反應對 的 蓬勃發(fā)展 為此類工具 的 發(fā)展 提供了新的契機 。 已 有 諜連接酶（ SpyLigase ）和探連接酶（ SnoopLigase ） 介導 的多肽 - 多肽偶聯(lián)體系 見諸報道 ，但其效率仍 有 待提高， 而 其 細 胞內(nèi)的應用前景仍有待探索。 最近 ， 張文彬課題組發(fā)展了 獨特的具有無序結(jié)構(gòu)的 諜訂書機 酶 （ SpyStapler ），可實現(xiàn) 諜標簽 （ SpyTag ）和北大 標簽 （ BDTag ）在 細 胞內(nèi)和 細 胞外的高效偶聯(lián) （圖 1 ） 。
北京大學
2021-04-11
重組大腸桿菌生產(chǎn)磷脂酶D及轉(zhuǎn)酯化產(chǎn)品開發(fā)
磷脂酶D（PLD, EC 3.1.4.4）是一類廣泛存在于各種生物體的酶，具有水解作用和磷酰基轉(zhuǎn)移作用（見圖1）。作為一種酶制劑，PLD的轉(zhuǎn)磷脂酰活性尤為重要，被用于制備具有生物活性的稀有磷脂。其中，以大豆磷脂酰膽堿（PC）為底物，PLD酶法制備磷脂酰絲氨酸（PS），受到廣泛關(guān)注。PS作為腦健康營養(yǎng)補充劑，相繼被美國FDA、日本HBM和中國國家衛(wèi)生計生委所認證，列為新資源食品。相較于提取自牛腦和植物的PS，生物酶法制備的PS，避免了食品安全和植物源含量低的問題。進一步，一些新的結(jié)構(gòu)和功能磷脂，通過P
廈門大學
2021-01-12
基于固定化酶生產(chǎn)低分子量肝素的新工藝
低分子量肝素(LMWH)是臨床上最主要的天然抗凝劑，目前主要是通過動物來源的肝素進行酶降解制得。歐洲藥典要求 LMWH 的分子量為 6000~8000，質(zhì)量控制是生產(chǎn) LMWH 的重要環(huán)節(jié)。而肝素酶的活性和利用率直接影響 LMWH 生產(chǎn)成本和產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟。 本項目組利用融合肝素酶 I (Hep I)與甲殼素之間的親和作用，實現(xiàn)酶的循環(huán)利用，同時融合酶活性和穩(wěn)定性提高。利用綠色溶劑體系制備形態(tài)完好、尺寸均一的甲殼素微球。用固定化酶制備的 LMWH 產(chǎn)品達到歐洲藥典要求，實現(xiàn)了分子量可控，生產(chǎn)過程可實時監(jiān)測。該項目將對 LMWH 產(chǎn)業(yè)的綠色和經(jīng)濟生產(chǎn)提供技術(shù)支持。目前已發(fā)表 SCI 論文 2 篇，并與相關(guān)企業(yè)開展了合作。
江南大學
2021-04-13
自然界中首例 [6+4] 環(huán)加成反應的酶
鑒定首個高階環(huán)加成酶，拓展了環(huán)加成酶的認知
一、項目分類
重大科學前沿創(chuàng)新
二、成果簡介
南京大學化學化工學院梁勇教授，生命科學學院譚仁祥教授和戈惠明教授的科研團隊，發(fā)現(xiàn)了抗幽門螺旋桿菌的潛在藥物-漢城霉素并對其生物合成途徑進行深入研究。通過多菌株基因組序列比對，對漢城霉素類生物合成基因簇進行了鑒定，利用微生物學，分子生物學、底物化學衍生化、體外酶促反應等手段從該基因簇中鑒定出一個新穎、可催化高階環(huán)加成反應的酶。團隊基于蛋白質(zhì)晶體數(shù)據(jù)，量子化學計算和蛋白質(zhì)定點突變技術(shù)，對該酶促動力學過程進行了深入解析，最終確定該酶通過“雙過渡態(tài)”來同時催化產(chǎn)生6+4和4+2環(huán)加成產(chǎn)物。該特殊高階環(huán)加成酶的發(fā)現(xiàn)，解答了“自然界中是否存在酶催化的高階環(huán)加成反應”，這一持續(xù)五十余年的謎題。這類酶的發(fā)現(xiàn)將進一步拓展人們對周環(huán)反應酶的認識，啟發(fā)科學家們將來利用和改造周環(huán)反應酶來實現(xiàn)有價值的分子轉(zhuǎn)化。
成果于2019年4月以Letter形式發(fā)表于Nature。F1000評述該研究“鑒定首個高階環(huán)加成酶，拓展了環(huán)加成酶的認知”，諾貝獎得主霍夫曼評述“這是在酶促反應中直接觀察到的[6+4]環(huán)加成產(chǎn)物的首個例子……，該研究對酶促高階環(huán)加成研究具有深遠影響”。
南京大學
2022-08-12