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本發(fā)明目的是提供一種產(chǎn)低溫堿性蛋白酶的菌株，為芽孢桿菌(Bacillus sp.)WFWBac?1，于2015年4月9日保藏在位于北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號的中國科學(xué)院微生物研究所的中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號為CGMCC NO.10703。本發(fā)明篩選的菌株用于發(fā)酵生產(chǎn)堿性蛋白酶。本發(fā)明篩選的菌株性狀優(yōu)良、產(chǎn)蛋白酶活力高；該菌株在以蔗糖為碳源，蛋白胨為氮源，培養(yǎng)基初始pH 9.0，培養(yǎng)溫度25℃，接種量為10％的條件下150rpm振蕩培養(yǎng)48h時(shí)，所產(chǎn)蛋白酶活性最高能達(dá)到995U/mL。所制備的酶用于制備洗衣液或洗潔精。

活性物質(zhì)緩釋膠囊是近年來研究最多的藥物活性物質(zhì)制劑技術(shù), 它具有延長藥物作用時(shí)間、定向靶位給藥、減少藥物毒副作用等優(yōu)點(diǎn)，在現(xiàn)代 藥物制劑中受到了廣泛的應(yīng)用。納米壁材的研制是在微膠囊的基礎(chǔ)上，將壁材 的尺寸進(jìn)一步減小，增大比表面積，進(jìn)一步提高包埋率和運(yùn)載效果。但國內(nèi)外 對于納米包埋技術(shù)的研究多集中在以殼聚糖、海藻酸鈉、合成樹脂等材料作為 壁材的開發(fā)上，這類壁材價(jià)格相對較貴，不利于商業(yè)化推廣。國內(nèi)外未發(fā)現(xiàn)有 利用生物酶法制備活性物質(zhì)緩釋膠囊的相關(guān)報(bào)道。 該技術(shù)以淀粉納米顆粒為壁材對包埋活性物質(zhì)進(jìn)行包埋，制備納米緩釋膠 囊。淀粉納米顆粒利用生物酶法制備，生產(chǎn)成本低、周期短、不易造成環(huán)境污 染，并且納米顆粒集中在 50-120nm 左右，粒徑小、比表面積大，有利于活性物 質(zhì)的包埋，包封效果好。經(jīng)過中試研究，該技術(shù)制備的淀粉納米顆?；钚晕镔|(zhì) 緩釋膠囊在胃部的降解率極低，大部分活性物質(zhì)在腸道內(nèi)消化吸收，有效的提 高了活性物質(zhì)的生物利用率。 生產(chǎn)條件及經(jīng)濟(jì)效益預(yù)測：納米顆粒緩釋膠囊的初步市場估價(jià)為 10-100 萬 元/噸。項(xiàng)目投產(chǎn)后，年加工量 100 噸的生產(chǎn)線，估算投資額為 3000 萬，可產(chǎn) 生經(jīng)濟(jì)效益 4250 萬元，實(shí)現(xiàn)利稅 2000 萬元。年加工量 200 噸的納米顆粒緩釋 膠囊生產(chǎn)線，估算投資額為 5000 萬，可產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益 8500 萬元，實(shí)現(xiàn)利稅 4000 萬元。年加工量 400 噸的納米顆粒緩釋膠囊生產(chǎn)線，估算投資額為 7000 萬，可青島農(nóng)業(yè)大學(xué)科技成果介紹 2017 －54－ 產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益 1.5 億元，實(shí)現(xiàn)利稅 8000 萬元。因此，該項(xiàng)目盈利性強(qiáng)、投資回 報(bào)率高、貸款償還期短，經(jīng)濟(jì)效益上可行。

扁桃酸作為一種手性羥基酸，是重要的合成中間體。而光學(xué)活性的扁桃酸不僅是重要的醫(yī)藥中間體，也是化學(xué)手性拆分中常用的拆分劑。 本項(xiàng)目中，我們使用固定化的含重組腈水解酶的大腸桿菌整細(xì)胞催化消旋扁桃腈的立體選擇性水解，（R）-扁桃腈水解產(chǎn)生相應(yīng)的（R）-扁桃酸，而未水解的（S）-扁桃腈在偏堿性的反應(yīng)環(huán)境中會(huì)發(fā)生自發(fā)消旋化，從而可以接近 00%的轉(zhuǎn)化率直接得到（R）-扁桃酸，工藝簡單，收率高。 本項(xiàng)目已在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行了公斤級規(guī)模的小試制備，固定化酶可以重復(fù)使用幾十次，底物濃度達(dá)到0.5 M，產(chǎn)品光學(xué)純度高于98%。

抗性淀粉具有淀粉特性，卻不易被人體小腸消化，可作為低血 糖生成指數(shù)的功能性食品，納米級抗性淀粉因其具有納米效應(yīng)，以及大的比表 面積，大量的表面電荷和活性羥基，且抗消化等優(yōu)勢，在作為藥物緩釋及靶向 釋放等方面具有重要的應(yīng)用潛力，可應(yīng)用于功能性食品、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域。 隨著納米技術(shù)在醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域的快速發(fā)展，人們對納米尺度材料的研 究應(yīng)運(yùn)而生，而功能性納米抗性淀粉更是研究的熱點(diǎn)。多糖大分子例如淀粉和 纖維素等是天然形成的在大自然中大量存在的化合物，具有天然、安全和生物 相容等特點(diǎn)。近年來，國外對抗性淀粉的制備研究非?；钴S，發(fā)展迅速，并申 報(bào)和發(fā)表了許多制備抗性淀粉的專利與文獻(xiàn)。根據(jù)發(fā)表在美國《糖尿病,營養(yǎng)與 代謝》Diabetes,Nutrition&Metabolism、《美國臨床營養(yǎng)學(xué)雜志》AmJClinNutr、 《中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志》等國內(nèi)外大量臨床實(shí)驗(yàn)報(bào)告表明，納米級抗性淀粉有助 于改善胰島素抵抗（即增加胰島素敏感性）、降低血糖、降低血脂、調(diào)節(jié)代謝 紊亂等。而我國對抗性淀粉的制備研究正處于起步階段，目前對于這種抗消化 納米淀粉的綠色制備，國內(nèi)外均未有報(bào)道。 技術(shù)優(yōu)點(diǎn)或者效益預(yù)測:生物酶法制備的納米抗性淀粉，具有更好地生物相 容性，加工容易，成本低，抗消化等優(yōu)勢，可廣泛應(yīng)用于功能性食品、藥物包 埋、緩釋、包衣填充等領(lǐng)域，且這種技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：1、原料來源廣、安全、 可再生；2、操作簡單，適合大規(guī)模生產(chǎn)；3、適用于普通儀器設(shè)備，對設(shè)備儀 器面沒有腐蝕性；4、原料利用率高，耗能低，得率高；5、綠色生產(chǎn)，產(chǎn)品可 放心食用。

可以量產(chǎn)/n針對當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶的大量需求與脂肪酶實(shí)際表達(dá)水平較低的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達(dá)技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高效表達(dá)技術(shù)平臺，構(gòu)建的解酯耶氏酵母脂肪酶Lip2基因工程菌10L發(fā)酵，酶活力可達(dá)6,5000 U/ml以上，比國際報(bào)道的最高值提高4倍以上，具有極強(qiáng)的國際競爭力。產(chǎn)品可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯、食品加工、烘焙、生物柴油制備、飼料添加劑、再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計(jì)需要800-1000萬元，經(jīng)濟(jì)效益可觀。解酯耶氏酵母脂肪酶Lip2可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯、食品加工、烘

中試階段/n人體血管總長約9.6萬千米，可繞赤道2.7圈。在人類所有的疾病中，因血液循環(huán)不暢造成的疾病占67%，我國每年約有700萬人死于心腦血管相關(guān)疾病，患病總?cè)藬?shù)超過3億，2015年全球心腦血管疾病相關(guān)市場超過1萬億美元。心腦血管疾病屬社會(huì)重大疾病，嚴(yán)重危害國民健康，QK纖溶酶的產(chǎn)業(yè)化對于心腦血管疾病的預(yù)防和治療具有重大的社會(huì)意義，同時(shí)具有巨大的市場應(yīng)用前景和價(jià)值。新一代溶栓蛋白酶枯草桿菌QK纖溶酶從上千株菌株中篩選得到枯草芽孢桿菌Subtilisin-QK，發(fā)酵產(chǎn)生

異麥芽酮糖是一種蔗糖的異構(gòu)體，它具有與蔗糖類似的物理性質(zhì)，但是甜度只有蔗糖的一半。它具有不致齲齒性、食后在血液中釋放單糖的速度比蔗糖慢、食后不刺激胰島素分泌、糖尿病人可食用等特性，因此頗受食品界制取無糖甜食品的歡迎。由于其獨(dú)特的性能，一經(jīng)問世便受到廣泛關(guān)注，特別是近年來隨著人們對自己健康的關(guān)注，異麥芽酮糖的銷量在歐美和日本直線上升，近幾年在中國的年銷量也已達(dá)幾千噸。而目前，只有日、德、美、中等國生產(chǎn)帕拉金糖。作為一種新型的甜味劑，異麥芽酮糖由于自身的特點(diǎn)，近年來歐洲、日本等市場有較大的增長。市場上已有的異麥芽酮糖食品有糖果、巧克力、果仁軟糖、口香糖、冰淇淋、果凍、果醬、糕點(diǎn)涂抹食品、餐桌甜味劑等。由于其穩(wěn)定性，在化工行業(yè)可作為表面活性劑和多聚物的原材料。

中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)微尺度物質(zhì)科學(xué)國家研究中心和生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)部周叢照教授、陳宇星教授課題組闡明了藍(lán)藻分子伴侶Raf1協(xié)助核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶（RuBisCO）組裝的分子機(jī)理，發(fā)現(xiàn)RuBisCO組裝和成熟過程的多層次精細(xì)動(dòng)態(tài)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，為人工改造RuBisCO以提高光合作用效率奠定了基礎(chǔ)。該研究成果在線發(fā)表在《Nature Plants》上

其他成果/n一種酶法輔助制備棉籽蛋白的方法，包括如下步驟：步驟一、棉籽粉原料的制備；步驟二、將棉籽粉原料和水混勻，加入多糖復(fù)合酶酶解，并進(jìn)行超聲波振蕩處理，得到振蕩酶解液；步驟三、一次堿提得到一次蛋白液和一次沉淀；步驟四、二次酶提得到二次蛋白液；步驟五、將一次蛋白液和二次蛋白液混勻，酸沉離心得到一次沉淀粉；步驟六、將一次沉淀粉和水混勻，并加入糖化酶酶解，滅酶離心得到二次沉淀粉；步驟七、將二次沉淀粉冷凍干燥，即得棉籽蛋白。本發(fā)明提供的酶法輔助制備棉籽蛋白的方法，工藝更簡單安全，棉籽蛋白提取率可達(dá)70％

本發(fā)明公開了一種酶提取紫錐菊多糖的方法，將紫錐菊地上部分粉碎成適宜大小，脫脂，提取，加酶制劑酶解、滅酶、繼續(xù)高溫提取、離心、上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，醇沉，沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，復(fù)溶后，噴干，得紫錐菊多糖。本發(fā)明的有益效果是：本制備方法，具有反應(yīng)條件溫和、提取時(shí)間短、提取率高等優(yōu)點(diǎn)，并且重現(xiàn)性高，穩(wěn)定，制備得到的紫錐菊多糖溶解性較好，外觀均一、水溶性好，并且獲得較好的活性組分，具有較好的免疫活性。