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本發明選擇結核桿菌生長期和休眠期主要的保護性抗原 Mtb10.4 和 Hsp16.3，構建融合蛋白 Mtb10.4-Hsp16.3(MH)。在大腸桿菌中表 達純化該蛋白，將該蛋白和佐劑混合構建亞單位疫苗，分別于 BCG 初免后 12、14 周加強免疫 C57BL/6 小鼠兩次，最后一次免疫 6 周后 檢測細胞免疫反應，最后一次免疫后 10 周進行結核菌毒株&nb

雄激素受體(androgen receptor，AR)被認為在前列腺癌的發生、發展和轉移中起到關鍵作用。因此，雄激素撤除療法(androgendeprivation therapy)成為治療晚期前列腺癌的最常用和有效的方法。但是在治療的兩到三年內，大部分晚期前列腺癌就會發展成去勢抵抗性前列腺癌(CRPC)。對于 CRPC 目前缺乏有效治療手段，成為前列腺癌治療中最為棘手的問題。在雄激素撤除環境下，AR 的再激活存在多種途徑，主要包括病灶部位雄激素的合成、AR 的基因突變、倍增和可變剪切以及 AR 共

本發明選擇結核桿菌生長期和休眠期主要的保護性抗原Mtb10.4 和Hsp16.3，構建融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3（MH）。在大腸桿菌中表 達純化該蛋白，將該蛋白和佐劑混合構建亞單位疫苗，分別于BCG初 免后12、14周加強免疫C57BL/6小鼠兩次，最后一次免疫6周后檢測細 胞免疫反應，最后一次免疫后10周進行結核菌毒株H37Rv攻擊。結果： 該融合蛋白能在大腸桿菌中穩定大量表達，經離子交換層析、凝膠過 濾層析和疏水層析三步純化得到純度較高的蛋白；構建的亞單位疫苗 免疫動物可產生

腦卒中為腦血管破裂或血栓阻塞血管導致大腦缺血損傷，其治療的藥物非常缺乏，阿替普酶是迄今為止唯一獲得FDA批準用于缺血性腦卒中的溶栓藥物,易引起再灌注損傷,可延長其給藥時間窗和減輕再灌注損傷。但臨床上神經保護劑十分缺乏。本項目為腦中風治療的小分子蛋白藥物研究，包括兩個小分子量蛋白。其一是犬鉤蟲抗凝多肽5（AcAP5），是一種具有強效抗血栓形成（抑制FXa）和溶血栓（抑制TAFIa）兩種功能的蛋白，其中溶栓作用為本團隊發現（已申請專利并獲得授權）。 其二是在AcAP5基礎上改造的蛋白TBN（已申請專利），具有溶栓和神經保護作用功能。體內外實驗表明AcAP5和TBN均具有較好的溶栓（溶解動脈血栓）、抗栓（預防腦中風血栓溶解過程中血栓再形成）和神經保護作用（減小梗死體積），“三位一體”的功能使其具有更好的治療腦卒中效果。

本發明公開了一種來源于象耳豆根結線蟲的Mesp1蛋白及其編碼基因和應用。本發明提供了Mesp1蛋白，是由序列表中序列1或序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質。編碼Mesp1蛋白的Mesp1基因也屬于本發明的保護范圍。本發明還保護Mesp1蛋白的應用，為如下(c1)至(c3)中的至少一種：(c1)調控根結線蟲的寄生能力；(c2)調控根結線蟲的致病能力；(c3)調控根結線蟲的發育。本發明還保護一種培育轉基因植物的方法，包括如下步驟：將所述干擾Mesp1基因表達的物質導入出發植物，得到轉基因植物；所述轉基因植物對根結線蟲的抗性高于所述出發植物。本發明對于象耳豆根結線蟲致病機理研究以及抗線蟲植物制備具有重大價值。

本發明公開了一種水稻孕穗期耐冷性相關蛋白CTB4a及編碼基因與應用。本發明提供了一種蛋白，是如下1)或2)：1)序列表中序列2所示的蛋白質；2)將序列表中序列2所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能由序列2衍生的蛋白質。本發明的實驗證明，本發明克隆了一個新的正向調控水稻孕穗期耐冷基因CTB4a，將其轉入野生型水稻中，表現出孕穗期耐冷，為水稻的耐冷品種選育提供基因資源。

 本發明提供一種抗蛋白吸附毛細管電泳共價鍵合涂層柱的制備方法。利用聚苯乙烯磺酸鈉和感光聚合物重氮樹脂的靜電自組裝和光固化交聯反應在石英毛細管柱的內壁上構筑共價鍵合抗蛋白吸附涂層。所制備的毛細管電泳涂層柱具有良好的抗蛋白吸附性能，與未涂層的石英毛細管裸柱相比，對蛋白質的分離性能提高1倍以上。本方法所用工藝流程簡單，生產效率高，生產成本低，重復性好，無毒環保，易于大規模生產，制得的共價鍵合毛細管電泳涂層柱具有優良的化學穩定性和抗蛋白吸附性能，適用于對蛋白質、糖蛋白、肽鏈、激素、酶等生物的樣品的電泳分離檢測和純化。毛細管電泳涂層柱、產品附加值高。

本發明提供了一種高穩定性蛋白質?殼聚糖復凝聚交聯微膠囊及其制備方法，首先將芯材與不含還原糖的或含有還原糖的蛋白質溶液混合，高速分散形成O/W型乳狀液，再加入殼聚糖溶液，調節pH，讓蛋白質與殼聚糖通過靜電相互作用發生復凝聚反應，形成復凝聚相沉降在芯材乳滴周圍而得到微膠囊，離心收集微膠囊，加熱，使蛋白質?殼聚糖、蛋白質?殼聚糖?還原糖兩兩之間發生美拉德反應引發交聯而提高微膠囊的穩定性。本發明簡單易行、安全、高效，適于大規模生產；本發明可廣泛用于具有良好熱穩定性芯材的包埋，對于開發高穩定性的蛋白質?殼聚糖復凝聚微膠囊體系和推進復凝聚微囊化技術在食品工業中的實際應用具有重要意義。

b0,+AT-rBAT是人體內的一種氨基酸轉運蛋白復合物，屬于異源多聚體氨基酸轉運蛋白（HAT）家族。異源多聚體氨基酸轉運蛋白，由輕鏈蛋白和重鏈蛋白構成。b0,+AT是其中的輕鏈蛋白，負責轉運底物。而rBAT是其中的重鏈蛋白，具有負責輕鏈蛋白細胞膜定位（即將輕鏈蛋白“護送”到細胞膜上）和維持輕鏈蛋白的穩定性的作用。b0,+AT主要分布于小腸和腎臟中。b0,+AT或者rBAT的突變，會誘發胱氨酸尿癥，一種先天性遺傳疾病。患者尿路中常有胱氨酸結石形成，造成腎絞痛，可引起尿路感染和腎功能衰竭。該病作為一種隱性遺傳疾病在人群中的發病率約為1/7000，屬于罕見病的一種。研究b0,+AT-rBAT的最新研究成果，揭開了胱氨酸尿癥發病的分子機理。復合物的結構和功能，將能幫助我們認識胱氨酸尿癥，為可能的治療方案提供線索。本項研究工作在全世界首次解析了b0,+AT-rBAT的高分辨率電鏡結構。結構顯示，b0,+AT蛋白與rBAT蛋白首先形成異源二聚體分子，然后兩個異源二聚體分子通過rBAT蛋白的相互作用再進一步形成一個二聚體。體外轉運實驗表明rBAT蛋白對b0,+AT蛋白的轉運活性是必需的；也就是說，b0,+AT要正常發揮轉運功能，需要有rBAT蛋白的存在。這與周強實驗室2019年解析的LAT1-4F2hc復合物相似。LAT1-4F2hc復合物同屬HAT家族，其中的4F2hc蛋白是LAT1蛋白發揮轉運活性所必需的。同時，該研究也首次解析了b0,+AT-rBAT和它的天然底物精氨酸的復合物的冷凍電鏡結構，解釋了它的底物識別機制。如果把b0,+AT-rBAT復合物比做生物膜上的一艘船，那么被轉運的精氨酸，可以被理解為“貨物”。研究人員通過解析b0,+AT-rBAT與底物的復合物的結構，可以了解該“貨物”如何加載到船上的——這個過程，即為“識別機制”。在底物結合點附近，科研團隊還鑒定出了底物結合位點附近的一個轉運調控區域。通過點突變和同位素轉運實驗，他們證明了該轉運調控區域對于b0,+AT-rBAT的轉運功能至關重要。西湖大學黃晶實驗室采用了分子模擬的方式，亦驗證了該區域的重要性。對于b0,+AT-rBAT復合物突變而導致的胱氨酸尿癥，基于上述研究，研究團隊進一步揭開了該疾病發生的機理。通過分析已解析出的b0,+AT-rBAT的高分辨率結構，研究人員對突變的位點進行了準確定位，并對這些位點進行了體外生化實驗的驗證。結果顯示，b0,+AT-rBAT的關鍵位點的突變影響了氨基酸轉運的活性，造成了胱氨酸尿癥。

本成果發明了以秸稈和廢棄動物蛋白酸解氨基酸為原料，物料和空間均無需嚴格滅菌下大規模制造木霉固體菌種的技術工藝，突破了木霉全元生物有機肥制造技術瓶頸。 一、項目分類 顯著效益成果轉化 二、成果簡介 木霉生物量大、根表定殖能力強、次生代謝產物種類多和含量高，促生和生防效果比細菌更顯著，但木霉在液體擴繁后期不能有效產孢，需再進行固體發酵才能獲得高濃度木霉固體菌種，傳統工藝原料貴、物料嚴格滅菌成本高，難以擴大規模，這是木霉生物有機肥產業中的技術瓶頸。本成果發明了以秸稈和廢棄動物蛋白酸解氨基酸為原料，物料和空間均無需嚴格滅菌下大規模制造木霉固體菌種的技術工藝，突破了木霉全元生物有機肥制造技術瓶頸。