結合文獻調研和數據庫檢索,選擇 L-氨基酸脫氨酶在大腸桿菌中進行異源表達,對菌株進行發酵條件優化和轉化條件優化,并對野生型 L-氨基酸脫氨酶進行蛋白質工程改造,一定程度上減輕了產物抑制作用,產量和轉化率都有所提高。主要技術指標:濕菌體 15g/L,底物 L-纈氨酸 100 g/L,α-酮異戊酸產量為 95.6 g/L,轉化率為 96.4%。
關鍵技術
(1)以大腸桿菌為宿主,生長快,周期短,催化效率高;
(2)對野生型 L-氨基酸脫氨酶進行蛋白質工程改造,一定程度上減輕了產物抑制作用,產量和轉化率都有所提高;
(3)微生物轉化具有專一性強、條件溫和的優點,該法綠色、環保、可持續,具有經濟競爭力,有很好的產業應用前景。
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