本發明公開一種以發根農桿菌介導的大豆毛狀根誘導轉化方法,包括如下步驟:選取大豆播種后在真葉即將展開時的幼苗,在子葉節下0.2?0.8cm處的下胚軸處進行橫切,在帶子葉的幼苗的下胚軸切口處蘸發根農桿菌菌液后扦插,并澆注含所述發根農桿菌菌液的發根誘導營養液進行培養。本發明的優點節省大豆種植基質和空間;毛狀根產生的時間縮短,節省了操作步驟和時間,尤其是在研究根瘤菌和大豆之間互作時,減少了其它根瘤菌的污染。