本發明利用增強型綠色熒光蛋白(EGFP)和螢火蟲熒光素酶(Fluc-Luciferase)報告基因組成的慢病毒載體感染IPSCs細胞,建立熒光示蹤的誘導性多能干細胞,并誘導其分化為胰腺祖細胞,可以在不改變干性表達的情況下,對IPSCs進行示蹤,經多次傳代后,仍具有良好的生物發光成像能力;同時,不影響其發育為胰腺祖細胞,并且分化后的胰腺祖細胞仍然具有良好的熒光成像及生物發光成像能力。所以,本發明的構建方法能夠在誘導性多能干細胞分化為胰島類器官過程中精準實時監測類器官的分化發育過程,為1型糖尿病的臨床治療提供新的思路和理論依據。
一種可示蹤誘導性多能干細胞的構建方法及鑒定
本發明的構建方法能夠在誘導性多能干細胞分化為胰島類器官過程中精準實時監測類器官的分化發育過程,為T1D的臨床治療提供新的思路和理論依據。
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