本發明公開了一種融合蛋白 CMFO,其應用于制備的結核病亞單位疫苗。所述結核病亞單位疫苗,含有融合蛋白 CMFO,其濃度為0.1mg/ml 至 1mg/ml。本發明通過選擇抗原基因和融合順序制造出融合蛋白 CMFO,配合相應的疫苗佐劑 DMT 作為結核病亞單位疫苗,用于預防結核病潛伏感染的效果良好,安全性高。